一种3α-羟基甾体脱氢酶及其在制备去氢表雄酮中的应用

    公开(公告)号:CN115786292A

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN202211028698.9

    申请日:2022-08-25

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种3α‑羟基甾体脱氢酶SfSDR及其在制备去氢表雄酮中的应用。本发明将3α‑羟基甾体脱氢酶SfSDR与葡萄糖脱氢酶BtGDH在大肠埃希氏菌中共表达,并以共表达工程菌的静息细胞作为生物催化剂协同酯酶Z03共同催化3‑乙酰氧基‑△3,5‑雄甾二烯‑17‑酮合成去氢表雄酮。该生物催化剂具有较高的催化活性、区域选择性和立体选择性,可以在6 h以内完全转化32.8 g/L的3‑乙酰氧基‑△3,5‑雄甾二烯‑17‑酮生成目标产物去氢表雄酮,无需添加有机溶剂且无副产物产生,经过分离纯化,产物回收率高达95%以上,说明该生物催化剂是去氢表雄酮绿色合成的高效催化剂。

    一种定点突变改造热稳定性提高的琼胶酶突变体

    公开(公告)号:CN109207459B

    公开(公告)日:2021-11-30

    申请号:CN201811408686.2

    申请日:2018-11-23

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供一种定点突变改造热稳定性提高的琼胶酶突变体,属于基因工程与酶工程领域。本发明突变体是在SEQ ID NO.2所示的β‑琼胶酶rAgaZC‑1的氨基酸基础上,将第602位天冬氨酸突变为甘氨酸(D602G),突变体D602G核苷酸序列及对应的氨基酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。D602G的催化效率较于rAgaZC‑1有17.6%的提高。热失活动力学和水解动力学分析表明,D602G的热稳定性明显提高,T5010提高1.5℃,41℃下的半衰期t1/2延长3倍,且在43℃下可以积累更多的琼胶寡糖,提高了琼胶酶在降解琼脂糖制备琼胶寡糖上的应用潜力。

    一种苯丙酮单加氧酶及在拉唑类药物制备中的应用

    公开(公告)号:CN113430216A

    公开(公告)日:2021-09-24

    申请号:CN202110845214.9

    申请日:2021-07-26

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供一种苯丙酮单加氧酶,其氨基酸序列由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列通过突变获得,并公开基于该苯丙酮单加氧酶的不对称生物催化合成亚砜类药物的技术方法。本发明通过基因挖掘筛选获得来源于Limnobacter sp.的苯丙酮单加氧酶基因,采用基因工程技术构建重组大肠杆菌表达菌株,通过分子改造技术实现酶活力和立体选择性的提高。同时构建了单加氧酶突变体与不同脱氢酶的共表达菌株。以奥美拉唑硫醚为原料,采用全细胞或酶蛋白催化的方法,不对称催化合成光学纯埃索美拉唑。本发明可以在温和的条件下通过一步反应获得目标产物,没有副产物奥美拉唑砜,同时环境友好,是一种绿色生物催化合成途径。

    一种定点突变改造的碱性普鲁兰酶及其应用

    公开(公告)号:CN108913677B

    公开(公告)日:2021-06-29

    申请号:CN201810813706.8

    申请日:2018-07-23

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供一种定点突变改造的碱性普鲁兰酶及其应用,本发明定点突变改造的碱性普鲁兰酶是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸基础上,将第744位苯丙氨酸突变为丙氨酸。对突变体F744A转化大肠杆菌进行异源表达,发现突变体酶活提高了32.18%;热稳定性也得到了提高,T5030为55.84℃,比原始酶PulSL3△C提高了2.94℃;突变体F744A的pH稳定范围更宽,在pH 5.0~10.0范围内保温1 h仍可保留90%以上的酶活力。作为添加剂应用于洗涤剂行业,可以明显提高洗涤效果。

    一种高产洛伐他汀不产桔霉素红色红曲霉菌株的构建方法

    公开(公告)号:CN111073821A

    公开(公告)日:2020-04-28

    申请号:CN202010113602.3

    申请日:2020-02-24

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明涉及一种高产洛伐他汀不产桔霉素红色红曲霉菌株的构建方法,包括以下步骤:(1)构建ctnR基因敲除质粒pGKO2-Neo-up-ctnR-dn;(2)构建ctnR基因敲除菌株GN-01△ctnR;(3)敲除菌株GN-01△ctnR的验证;(4)构建mokC基因过表达质粒;(5)在基因敲除菌株GN-01△ctnR中导入mokC基因过表达质粒,获得mokC过表达菌株;(6)mokC过表达菌株的验证。本发明通过代谢产物验证,构建的GN-01△ctnR基因缺失菌株已不产桔霉素,GN-01△ctnR-mokC过表达菌株产Monacolin K的能力较野生菌株提高了30%,达到267 mg/L。

    一种水产饲料添加剂褐藻寡糖的制备方法

    公开(公告)号:CN109221811A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201811137102.2

    申请日:2018-09-28

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供一种水产饲料添加剂褐藻寡糖的制备方法,属于水产饲料领域。本发明采用碱提醇沉法从海带中提取褐藻胶,利用褐藻胶裂解酶水解褐藻胶制备褐藻寡糖,添加于水产饲料中,并应用于大黄鱼和石斑鱼的养殖。添加褐藻寡糖可极显著地提高大黄鱼和石斑鱼的体重、全长、存活率,大黄鱼和石斑鱼肌肉中的蛋白质含量、EAA/TAA和EAA/NEAA的比例,大黄鱼血清中过氧化氢酶和溶酶菌活力,石斑鱼血清中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、过氧化氢酶和溶菌酶的活力,大黄鱼和石斑鱼消化系统中的蛋白酶活性(P

    漆酶在蛋白凝胶脱色中的应用

    公开(公告)号:CN109060926A

    公开(公告)日:2018-12-21

    申请号:CN201810746438.2

    申请日:2015-02-10

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,更具体涉及漆酶在蛋白凝胶脱色中的应用。具体是将漆酶应用于蛋白凝胶电泳中常规染色后的脱色。本发明的目的是利用漆酶进行染色蛋白凝胶的脱色,环保、快速、简便,不需要有机溶剂,节约能源,降低染料废水的污染。本发明利用漆酶进行蛋白凝胶脱色,脱色快速(2小时可获得低背景的清晰蛋白条带),操作简便(不需要沸腾或更换脱色液)且环保(不使用传统脱色液所需的有机溶剂如甲醇、乙酸,在脱色的同时实现染料降解,无废液处理问题及费用)。通过优化漆酶浓度、介体种类和浓度、脱色时间等因素,在较短时间内获得了良好的脱色效果,操作简便且绿色环保。

    一种定点突变改造的碱性普鲁兰酶及其应用

    公开(公告)号:CN108913677A

    公开(公告)日:2018-11-30

    申请号:CN201810813706.8

    申请日:2018-07-23

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供一种定点突变改造的碱性普鲁兰酶及其应用,本发明定点突变改造的碱性普鲁兰酶是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸基础上,将第744位苯丙氨酸突变为丙氨酸。对突变体F744A转化大肠杆菌进行异源表达,发现突变体酶活提高了32.18%;热稳定性也得到了提高,T5030为55.84℃,比原始酶PulSL3△C提高了2.94℃;突变体F744A的pH稳定范围更宽,在pH 5.0~10.0范围内保温1 h仍可保留90%以上的酶活力。作为添加剂应用于洗涤剂行业,可以明显提高洗涤效果。

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