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公开(公告)号：CN110628835A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201911071026.4
申请日：2019-11-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用pH自平衡催化体系制备木糖醇的方法，其特征在于，木糖、葡萄糖、甲酸类化合物、木糖还原酶、葡萄糖脱氢酶、甲酸脱氢酶、电子载体和水形成生物催化体系，催化木糖反应生成木糖醇。与现有技术相比，本发明通过耦合反应过程，实现反应体系中酸性和碱性产物的相互中和，能够稳定反应过程的pH中和，省去了生产过程pH的调控，因此反应过程更简单、稳定、高效，可以在纯水中进行，从而提高了生产效率、降低了生产成本和操作难度；同时，采用由甲酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶和木糖还原酶构成的酶偶合反应系统催化生产木糖醇，24小时内从2M木糖中获得了278.4g/L的木糖醇产量，产率高达11.6g/L/h。
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公开(公告)号：CN108192930A
公开(公告)日：2018-06-22
申请号：CN201810250920.7
申请日：2018-03-26
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12P7/18
Abstract: 本发明公开了一种木糖醇的制备方法，木糖、葡萄糖、木糖还原酶、葡萄糖脱氢酶、辅酶、CaCO3和水形成生物催化体系，催化木糖发生还原反应生成木糖醇，催化木糖发生还原反应生成木糖醇。具体地，以木糖还原酶和NADPH作为催化体系催化木糖发生还原反应生成木糖醇；以葡萄糖脱氢酶作为NADPH的再生催化剂，催化葡萄糖发生氧化反应生成葡萄糖酸，并催化NADP+发生还原反应生成NADPH。采用双酶催化生产木糖醇，反应24h后木糖和葡萄糖完全消耗，产物中木糖醇的转化率为98％，浓度可达146.23g/L；葡萄糖酸的转化率为95％，浓度可达185.05g/L。
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公开(公告)号：CN119193643A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411339403.9
申请日：2024-09-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种增大细菌尺寸的方法、重组大肠杆菌及其应用。本发明通过调控微生物细胞形态相关蛋白，对微生物细胞形态及分裂方式进行改造，从而优化微生物细胞的特性，以提高其在生物制造等领域的应用价值。具体的，以强化了minE基因或弱化了mreB、minC、minD、dacA、ftsZ基因中的任意一个或几个蛋白基因表达的大肠杆菌为底盘菌株，通过异源表达DivIVA增大了细胞尺寸。本发明获得了可分裂、培养、遗传的大尺寸细胞，为生产一些胞内/外产物提供了更大的生产空间，并可应用于多种生物大分子生产，为增强目标产物生产效率提供了一种新的解决方案。同时，增大的细胞形态有利于细胞截留、吸附、沉淀、产物分离等过程，提高了整体生产效率。
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公开(公告)号：CN119193356A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411341211.1
申请日：2024-09-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及基于生物膜生产人表皮生长因子的重组酿酒酵母菌及其构建方法与应用。本发明以酿酒酵母BY4742和530‑1C作为表达人表皮生长因子(hEGF)底盘细胞，通过基因改造方式，优化启动子、信号肽等方式，将人表皮生长因(hEGF)的产量由80μg/L的水平提升至15mg/L；通过优化工程化蛋白分泌途径中的相关模块，单一或组合缺失降解酶基因(PEP4、PRB1、YAP3)，过表达蛋白分泌通路中的关键节点基因(KAR2、PDI1、HAC1、ERV29、ERO1、SRP54、SEC24、DER1)，将hEGF产量提升至141mg/L的水平；通过选择过表达酵母内源性的絮凝基因FLO11和白色念球菌的外源性基因ALS3，构建具有絮凝且黏附在非生物表面性能的生物膜菌株，并基于生物膜固定化连续发酵，实现了hEGF的连续生产，且产量稳定在300mg/L之上。
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公开(公告)号：CN118291510A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410536013.4
申请日：2024-04-30
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种基于凝聚‑割离技术生产目标分子的方法、重组菌株及其应用。本发明通过调控生物凝聚态的形成，实现目标分子在细胞端的高浓度富集。经过这一步骤，获得了高度富集的目标分子，并可通过细胞分裂的方式进一步累积。这一创新方法为提高目标分子的产量和积累率开辟了新途径。相较于传统方法，本方法不仅有效地提高了细胞内目标分子在特定区域的浓度，还通过细胞分裂机制，实现了这些富集分子的进一步积累。通过精确调控生物凝聚态的生成，本发明克服了目标分子在细胞内稳定积累的难题，为增强目标分子生产效率提供了一种创新解决方案。这一方法在生物工艺、医药制造及其他相关领域具有广泛的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116769843A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310757229.9
申请日：2023-06-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种表面粘附发酵与膜分离相耦合连续生产乙醇的方法，将酿酒酵母接种于含有固体载体的发酵体系中进行表面粘附发酵产乙醇，当发酵液中乙醇含量为5g/L以上时发酵液转入膜分离组件中进行膜分离得到乙醇，分离后的发酵液再次进入发酵液体系中进行表面粘附发酵。本发明所提供的方法，能降低发酵液浊度、减少分离膜被污染、提高膜分离效率、降低发酵代谢副产物甘油、琥珀酸。
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公开(公告)号：CN116716333A
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202310756772.7
申请日：2023-06-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种强化酿酒酵母生产乙醇效率的方法，在酿酒酵母基因组中整合表达凝集素蛋白得到重组酿酒酵母，所述重组酿酒酵母在含有固体载体的发酵体系中生产乙醇。本发明所构建的重组酿酒酵母菌株在乙醇的表面粘附连续化生产中，通过提高酵母细胞粘附成膜的能力，可以促进酵母细胞在固体介质上的粘附生长，实现连续化生产过程，还可以提高细胞的群体生长密度，增强细胞的耐受性和对不利生产环境的抵抗力，提高酵母细胞的反应性能和乙醇的生产效率。
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公开(公告)号：CN111088267B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN201911311861.0
申请日：2019-12-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 一种提高产溶剂梭菌液体发酵细胞密度的方法，其是通过抑制所述产溶剂梭菌中CA_C2730基因的表达来实现。与现有技术相比，本发明具有如下优势：本发明提供了一种简单，直接提高产丁醇梭菌液体发酵细胞密度的方法，通过此方法得到的工程菌株在发酵过程中，当以葡糖糖为碳源，在100mL厌氧瓶中发酵时，菌体生长速度加快，丙酮丁醇梭菌细胞密度提高约50％，丁醇产量提高约30％～50％。
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公开(公告)号：CN114395576A
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202210071825.7
申请日：2020-08-31
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高梭菌中蛋白表达效率的方法，将目标蛋白与核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的非经典分泌蛋白融合，在丙酮丁醇梭菌CGMCC No.5234中进行蛋白表达。与现有技术相比，本发明提供了一种全新的方法提高重组蛋白在梭菌中的蛋白表达效率，为优化梭菌中重组蛋白的制备与应用奠定了技术基础。
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公开(公告)号：CN111088209B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202010040929.2
申请日：2020-01-15
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种产1,4‑丁二醇的重组丁醇梭菌及其构建方法与应用，所述的重组丁醇梭菌是通过在丁醇梭菌中表达4‑羟基丁酰辅酶A脱水酶构建得到的。与现有技术相比，本发明具有如下优势：(1)相比于无法生产1,4‑丁二醇的野生菌，本发明构造的重组菌在生产1,4‑丁二醇的过程中，其产量达到66mg/L。(2)本发明进一步将丁醇梭菌中etfA基因失活，该重组菌产1,4‑丁二醇的产量进一步提高了，达到182mg/L。
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