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公开(公告)号：CN114574456A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210271535.7
申请日：2022-03-18
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明涉及一种亚硝酸盐还原酶突变体及其编码基因和应用，所述亚硝酸盐还原酶突变体是对植物乳杆菌的亚硝酸盐还原酶完整亲本序列基础上，删除蛋白序列中1‑16位氨基酸和533‑545位氨基酸且在原有亲本序列基础上通过突变引入二硫键所得，其氨基酸序列为SEQ ID NO:49，其对应编码基因序列为SEQ ID NO:50。本发明制备得到的亚硝酸盐还原酶突变体相比野生型酶蛋白酶活力分别提高10倍，且在该酶最适反应温度条件下的半衰期提高9倍，表达量提升2.5倍。在食品、环保等领域将具有广泛应用前景。
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公开(公告)号：CN114073864B
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202210057257.5
申请日：2022-01-19
Applicant: 华南理工大学
IPC: B01D11/04
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种四液相体系同步萃取分离原料中多组分的方法，将含有多种不同极性组分的原料与水、可溶性盐和亲水性溶剂混合，配成四液相体系；将四液相体系离心和/或静置，形成四层液相，原料中的各组分依极性差异被分别萃取到强疏水层、弱疏水层、弱亲水层、强亲水层的各层中，不溶性残渣则会分配在相与相的界面之间。本发明可以有效的对成分复杂的粗提物进行同时萃取分离，具有能耗小、分离步骤简单等优点，克服当前多组分产物同步萃取分离操作复杂、产物易损失、生产成本高等难题。
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公开(公告)号：CN112662645B
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202110067084.0
申请日：2021-01-19
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于酶的基因工程技术领域，本发明公开了一种鞘磷脂酶D突变体及其应用，所述的鞘磷脂酶D突变体是以来自Loxoscelesarizonica的鞘磷脂酶D(Laz‑SMD)(氨基酸序列SEQ ID NO:1)的亲本序列基础上突变第78位的半胱氨酸或第84位的半胱氨酸。本发明改造获得的Laz‑SMD突变体水解溶血磷脂底物改变了原有反应只产环状磷脂酸(cPA)的特点，转而只反应产生溶血磷脂酸，本发明提供了一种利用Laz‑SMD水解溶血磷脂生产溶血磷脂酸的方法，进一步提升了该酶在药物领域的利用价值。
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公开(公告)号：CN109295030B
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN201811119015.4
申请日：2018-09-25
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12N9/20 , C12N11/00 , C12P7/6432 , C12P7/6434
Abstract: 本发明公开了一种基于固定化酶富集鱼油中DHA和EPA的方法，包括以下步骤：配置脂肪酶的酶液，向酶液中添加可溶性盐和亲水性溶剂，形成两相体系，分液得到液态固定化脂肪酶上相和富盐下相；将得到的液态固定化脂肪酶与可溶性盐溶液、鱼油配成三液相体系，于搅拌条件下进行酶催化反应，反应结束后，静置或离心至分成三层，上相为鱼油产物，中相为液态固定化脂肪酶，下相为富含甘油水解物的反应介质；将上相鱼油产物加入碱液，然后加入疏水性有机溶剂，静置萃取后取上相，经蒸馏得到富EPA和DHA的甘油酯产物。本发明实现了产物与催化剂的快速分离，脂肪酶可连续多次重复使用，同时还可以提高催化效率，从而大幅降低酶的损耗与纯化成本。
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公开(公告)号：CN113801862A
公开(公告)日：2021-12-17
申请号：CN202110962378.X
申请日：2021-08-20
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种海洋链霉菌磷脂酶D突变体及其重组表达菌株的制备方法，所述的磷脂酶D突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的亲本序列基础上发生如下突变：P343A；或Y383L；或P343A，Y383L；或P343A，Y383L，S380V，其对应的氨基酸序列为SEQIDNO:2，SEQID NO:3，SEQID NO:4，SEQID NO:5。相比于野生型，本发明突变体1的酶活力是野生型的1.3倍，突变体2的酶活是野生型的1.46倍，突变体3的酶活是野生型的3.9倍，突变体4的酶活是野生型的11.6倍。本发明获得的磷脂酶突变体活力得到显著提高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113584092A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110848481.1
申请日：2021-07-27
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12P7/64 , C07C67/54 , C07C67/58 , C07C69/587
Abstract: 本发明属富集油脂中特定脂肪酸的技术领域，公开了一种酶法水解富集鱼油中EPA、DHA的方法，包括如下步骤：(1)将鱼油、水和脂肪酶混合，20‑70℃进行水解反应，水解产物酸价为60±15mg/g时停止反应；(2)离心步骤(1)水解产物，取上层油相，与水和偏甘油酯脂肪酶混合继续水解反应，水解产物酸价为70±15mg/g时，停止反应；(3)离心步骤(2)水解产物，取上层油相，分子蒸馏后所得重相为富含EPA、DHA的混合甘油酯。水解法直接使用鱼油和水作为原料，环境友好、绿色安全、操作简单，不消耗试剂，成本降低，两步水解后DHA、EPA在鱼油中占比可达45.53％‑60.45％。
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公开(公告)号：CN112322670B
公开(公告)日：2021-10-15
申请号：CN202011232198.8
申请日：2020-11-06
Applicant: 华南理工大学 , 广州永华特医营养科技有限公司
IPC: C12P7/64
Abstract: 本发明涉及一种一种甘油二酯的合成方法，包括以下步骤：(1)将油脂、脂肪酶和溶剂混合，进行水解反应，得水解产物；(2)在甘油二酯脂肪酶的作用下，将步骤(1)所得水解产物与甘油进行酯化反应；步骤(1)所述脂肪酶为脂肪酶MAS1或MAS1‑H108A。本发明的合成方法可以制备得到高纯度的甘油二酯，且操作简便，成本低。
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公开(公告)号：CN112592910A
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN202110008611.0
申请日：2021-01-05
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种甘油酯脂肪酶突变体，其氨基酸构成包括如SEQ ID NO.3所示序列；或其编码基因包括如SEQ ID NO.4所示序列或其反向互补序列。本发明还涉及了该突变体的应用。本发明所述甘油酯脂肪酶突变体，其可在黑曲霉工程菌中高效表达，并具有很好的热稳定性。而且，在相同的催化条件下，该甘油酯脂肪酶突变体酯化合成甘油酯活力为野生型的3.5倍，很适合甘油二酯的工业化生产的应用。
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公开(公告)号：CN112322670A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011232198.8
申请日：2020-11-06
Applicant: 华南理工大学 , 广州永华特医营养科技有限公司
IPC: C12P7/64
Abstract: 本发明涉及一种一种甘油二酯的合成方法，包括以下步骤：(1)将油脂、脂肪酶和溶剂混合，进行水解反应，得水解产物；(2)在甘油二酯脂肪酶的作用下，将步骤(1)所得水解产物与甘油进行酯化反应；步骤(1)所述脂肪酶为脂肪酶MAS1或MAS1‑H108A。本发明的合成方法可以制备得到高纯度的甘油二酯，且操作简便，成本低。
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公开(公告)号：CN111944798A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN202010679190.X
申请日：2020-07-15
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种固定化脂肪酶及其制备方法和在生物柴油中的应用，将脂肪酶MAS1-H108A与载体固定化，所述脂肪酶MAS1-H108A的氨基酸序列如SEQ NO.1所示；所述载体为疏水非极性树脂，其孔径≥30nm。本申请的固定化酶同时具有高酯化能力和高转酯化能力，耐受高温和有机溶剂，且多次重复使用后保留较高的催化能力，适合用于制备生物柴油。使用这种固定化脂肪酶可以在20-55℃均可高效制备生物柴油，生物柴油的产率为95-98％，酸价为0.7-2mg/g，且反应30-50批次催化效果无明显降低，从而一定程度解决了酶促反应过程中时间久，生物柴油酸价高和酶稳定性差的问题。
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