筛选MicroRNAs在褐飞虱对水稻抗性适应性作用的方法

    公开(公告)号:CN108504748A

    公开(公告)日:2018-09-07

    申请号:CN201810332911.2

    申请日:2018-04-13

    Abstract: 本发明公开了一种筛选MicroRNAs在褐飞虱对水稻抗性适应性作用的方法,涉及生物工程技术。本方法包括下列步骤:①样品的收集;②小RNA的测序;③测序原始数据的预处理;④序列比对;⑤新miRNA预测;⑥miRNA差异表达分析;⑦差异miRNA靶基因预测;⑧miRNA mimic、miRNA inhibitor及对照链的合成;⑨向褐飞虱显微注射和人工喂养miRNA mimic、miRNA inhibitor,验证miRNAs的功能;⑩显微注射和人工喂养后的褐飞虱对水稻抗性适应性变化的初步研究。本发明研究利用高通量测序技术对两个褐飞虱群体的小RNA进行了深度测序,并通过后续的生物信息学分析鉴定并预测miRNAs,比较在感虫水稻TN1和抗虫水稻YHY15上两个褐飞虱群体间的差异,分析、筛选和发现与寄主抗性适应性相关的miRNA,为水稻抗虫育种提供新的方法。

    一种快速利用水稻籼粳杂种优势的方法

    公开(公告)号:CN108207617A

    公开(公告)日:2018-06-29

    申请号:CN201810070776.9

    申请日:2018-01-25

    Abstract: 本发明公开了一种快速利用水稻籼粳杂种优势的方法,属于植物育种技术领域。本方法主要是:以籼稻和粳稻其中一种水稻亚种材料作供体亲本,另一种水稻亚种材料作轮回亲本进行杂交,收获F1种子;大田生长期间进行农艺性状调查,成熟后收获考种,根据田间表现及考种数据选择具有籼粳杂种优势的单株,选出的单株材料可直接用于水稻优良品种的选育。与饱和回交相比,本发明采用不饱和回交的方式,后代材料遗传多态性大,籼粳杂种优势明显;与不饱和回交相比,本发明将不饱和回交与花药培养相结合,后代材料籼粳杂种优势明显而且性状稳定快;本发明实现了巨大的籼粳杂种优势利用与较短的材料培育时间的统一。

    一种高通量钢珠加样方法及其装置

    公开(公告)号:CN106754301A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710024135.5

    申请日:2017-01-13

    CPC classification number: C12N15/1003 C12Q2563/149

    Abstract: 本发明公开了一种高通量钢珠加样方法及其装置,该装置的中筛板两侧分别设有凸板,所述的凸板插入基座侧壁的开孔中,将中筛板固定于上、下筛板之间;在中筛板的凸板侧设有2个长方形缺口,第一弹簧、第二弹簧位于缺口中,与基座的侧壁连接;上、中、下筛板均匀设有8行×12列的96孔,上、中筛板的96孔对齐排列,中、下筛板的96孔错位排列,通过推动中筛板上的凸板使中筛板的96孔与下筛板的孔对齐。使用时,将研磨用钢珠倒入上筛板上方,通过推动中间筛板外侧凸起便可以实现一次对96孔DNA提取管的每一管加入一粒研磨钢珠,该方法不但避免了传统手工加钢珠时的多加或者漏加,更有效提高了实验人员提取DNA的效率。

    水稻抗稻瘟病基因Pita特异性分子标记引物及应用

    公开(公告)号:CN105907884A

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201610517576.4

    申请日:2016-07-04

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/13 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明公开了水稻抗稻瘟病基因Pita特异性分子标记引物及应用。申请人通过将携带不同Pita等位基因的水稻品种测序及序列比对在Pita编码区内含子鉴定到一个Pita特异性位点并开发了一套鉴定该目标位点的分子标记引物,分别为:SF:GCAGGTTATAAGCTAGCTAT;SR:GCCAAATAGCCAATTCATA;RF:CAAGAGAGAGTATTTGCTTAGGAGT;RR:CCTATATCTCTTTAAAATATGTTTGGC。利用该引物对水稻种质资源DNA进行PCR扩增,可快速判断待测试水稻Pita的基因型,从而将携带抗性等位基因的材料应用于生产。方法简便快速、成本低廉,可广泛应用于分子标记辅助选择育种或者水稻种质资源Pita基因型鉴定。

    一种筛选中等直链淀粉含量水稻的方法及其专用引物

    公开(公告)号:CN102912014A

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201210361030.6

    申请日:2012-09-26

    Abstract: 本发明公开了一种辅助筛选中等直链淀粉含量水稻的方法与其专用引物。辅助筛选水稻的引物,是由序列表中序列WxMF、WxMR、WxHF和WxHR的核苷酸序列组成的四条引物。该辅助筛选水稻的方法,是以待检测水稻的基因组DNA为模板,用序列表中序列WxMF、WxMR、WxHF和WxHR的核苷酸序列组成的四条引物进行PCR扩增,如该待测水稻的扩增产物有766bp的条带,则该待测水稻为候选水稻。本发明的辅助筛选中等直链淀粉含量水稻的方法可用于选育中等直链淀粉含量水稻,缩短水稻的育种周期,加快育种速度,降低育种成本,具有操作简单,成本低廉,周期短的优点,适应于推广应用,为选育中等直链淀粉含量水稻品种提供了一种快捷的检测方法。

    一种筛选抗褐飞虱水稻的方法及其专用引物

    公开(公告)号:CN102296108A

    公开(公告)日:2011-12-28

    申请号:CN201110170178.7

    申请日:2011-10-12

    Abstract: 一种辅助筛选抗褐飞虱水稻的方法与其专用引物。辅助筛选抗褐飞虱水稻的引物,是由序列表中序列B14F1、B14R1、B14F2和B14R2的核苷酸序列组成的四条引物。该方法是以待检测水稻的基因组DNA为模板,用序列表中序列B14F1、B14R1、B14F2和B14R2的核苷酸序列组成的四条引物进行PCR扩增,如该待测水稻的扩增产物为大小566bp的条带,则该待测水稻为候选抗褐飞虱水稻。该方法可用于选育抗褐飞虱水稻,缩短抗褐飞虱水稻的育种周期,加快育种速度,降低育种成本,具有操作简单,成本低廉,周期短的优点,适应于推广应用,为选育抗褐飞虱水稻品种提供了一种快捷的检测方法。

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