公开(公告)号：CN112760241A

公开(公告)日：2021-05-07

申请号：CN202110148438.4

申请日：2021-02-03

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈勇 ,  崔崟 ,  应汉杰 ,  余斌 ,  欧阳平凯 ,  王芳娟

IPC: C12N1/15 ,  C12N15/90 ,  C12N15/31 ,  C12N11/087 ,  C12P37/00 ,  C12R1/82

Abstract: 本发明公开了一株重组产黄青霉基因工程菌及其构建方法与应用，所述重组产黄青霉基因工程菌由原始产黄青霉菌中StuA基因被Bleo抗性基因替代所得。本发明所提供的基因工程菌使产黄青霉在固定化发酵生产青霉素过程中生物膜量OD570增多了约2.5倍，使菌丝更好的吸附结合在塑料介质上；提高了菌种的抗逆性，使发酵过程中菌种形态更稳定；提高了青霉素的效价达到2126.775U/mL，同时缩短了整个发酵周期约24h，从而提高了发酵效率并减少了生产成本，有效解决了现有技术中产黄青霉发酵生产青霉素菌种形态不稳定，发酵周期长且持续性差，导致发酵效率低且成本高的问题。

公开(公告)号：CN112725323A

公开(公告)日：2021-04-30

申请号：CN202110163676.2

申请日：2021-02-05

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 赵谷林 ,  牛欢青 ,  姜达海 ,  应汉杰 ,  陈勇 ,  柳东 ,  余斌

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/32 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组耐盐腺苷酸环化酶及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，长度为1008 bp，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，共335个氨基酸，理论分子量为36.09 kDa。该耐盐腺苷酸环化酶最适pH为10.0，最适温度为45℃，该重组耐盐腺苷酸环化酶活性随着氯化钠浓度的提高而增强，在氯化钠浓度为2.5 M时酶活性达到最大(约22倍)，具有良好的耐盐性，与现有报道的腺苷酸环化酶相比，其在高渗条件下能更好地提高生产效率，具有良好的工业应用前景。

公开(公告)号：CN112662576A

公开(公告)日：2021-04-16

申请号：CN202110096375.2

申请日：2021-01-25

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  蒋颖 ,  陈勇 ,  梁偲策 ,  张涛 ,  朱家庆 ,  赵伟 ,  余斌

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C12N15/31 ,  C12P7/06 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一株过表达Gis4基因的酿酒酵母基因工程菌，该菌株由原始酿酒酵母的Gis4基因过表达后改造得到。由于原始菌株S288c在固定化发酵中菌体聚集过多且聚集体不成熟，电阻较高，阻碍了传质传导，导致其发酵周期的加长，而过表达Gis4基因的酿酒酵母基因工程菌对比原始酿酒酵母菌株在游离发酵中絮凝特性明显减弱，在固定化发酵中细胞粘附聚集情况减少，黏附性降低，游离细胞增多，加强了传质传导，缩短了发酵周期。

公开(公告)号：CN110055205B

公开(公告)日：2020-09-01

申请号：CN201910393054.1

申请日：2019-05-13

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  陈天鹏 ,  陈勇 ,  刘娜 ,  任培芳 ,  俞莹 ,  余斌 ,  柳东 ,  欧阳平凯

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/65 ,  C12N15/70 ,  C12P13/08 ,  C12P13/12 ,  C12P7/54 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种敲除fimH基因的重组大肠杆菌，该大肠杆菌fimH基因失活。本发明进一步提供敲除fimH基因的重组大肠杆菌的构建方法及该重组大肠杆菌在发酵生产氨基酸或有机酸中的应用。本发明借鉴医学上的致病性大肠杆菌形成生物膜的细胞相较于游离的细胞更适应极端环境，在已知fim操纵子调控的fimH基因可以调控大肠杆菌生物膜的形成，通过转录组分析发现了敲除fimH基因后氨基酸及有机酸代谢通路的变化，为后期工业化过程中筛选其他高产氨基酸有机酸的重组菌株做好铺垫，最终达到提高产量、发酵速率和糖转化率的目的。

公开(公告)号：CN110106095A

公开(公告)日：2019-08-09

申请号：CN201910271574.5

申请日：2019-04-04

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈勇 ,  刘丽 ,  应汉杰 ,  余斌 ,  孙文俊 ,  杨乐云 ,  王芳娟 ,  欧阳平凯

IPC: C12N1/15 ,  C12N15/90 ,  C12P7/48 ,  C12R1/685

Abstract: 本发明公开了一株钙离子通道CchA基因失活的黑曲霉基因工程菌及其构建方法与应用，它是敲除钙离子通道CchA基因的黑曲霉菌。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法。进一步公开了基因工程菌在生产柠檬酸中的应用。本发明通过构建基因敲除钙离子通道CchA基因的黑曲霉基因工程菌，使黑曲霉在固定化发酵生产柠檬酸过程中生物膜产量降低并且疏水性降低，减轻了载体的抱团现象，提高了柠檬酸产量和糖转化效率，适宜于工业生产。

公开(公告)号：CN110004070A

公开(公告)日：2019-07-12

申请号：CN201910284360.1

申请日：2019-04-10

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  孙文俊 ,  陈勇 ,  余斌 ,  刘丽 ,  任培芳 ,  刘娜 ,  奚迅 ,  欧阳平凯

IPC: C12N1/15 ,  C12N9/24 ,  C12R1/685

Abstract: 本发明公开了一株产木聚糖的黑曲霉基因工程菌，该菌株中Msb2基因失活；所述Msb2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述Msb2基因失活后的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法。本发明进一步地公开了基因工程菌在发酵生产木聚糖酶中的应用。本发明通过构建Msb2基因的黑曲霉基因工程菌，使黑曲霉在发酵产木聚糖酶过程中生物膜产量减少，并且黏附性变弱，提高了木聚糖酶的产量，缩短了发酵周期。