基于CRISPR系统的单碱基突变基因的检测方法、检测装置及其应用

    公开(公告)号:CN117126926A

    公开(公告)日:2023-11-28

    申请号:CN202311040183.5

    申请日:2023-08-17

    Abstract: 本发明涉及基因检测技术,公开了一种单碱基突变基因的检测方法、检测装置及其应用。该方法包括以下步骤:根据目标单碱基突变基因及其相应的野生型基因,分别设计突变型引导RNA、野生型引导RNA、突变型基因引物对以及野生型基因引物对;将待测样品进行DNA提取获得待测基因,将待测基因或者野生型基因与相应的引物对、限制性内切酶进行RPA扩增得到待测RPA产物和野生型RPA产物;将待测RPA产物或者野生型RPA产物与相应的引导RNA进行CRISPR反应得到待测CRISPR产物和野生型CRISPR产物,检测荧光强度得到待测样品荧光值和野生型荧光值,将待测样品荧光值与野生型荧光值进行比较分析。该检测方法快速简便、效率高,且特异性好、灵敏度高。

    基于CIRSPR-Cas体系检测铅离子的方法

    公开(公告)号:CN116106298A

    公开(公告)日:2023-05-12

    申请号:CN202210933674.1

    申请日:2022-08-04

    Abstract: 本发明涉及比色分析检测技术,公开了一种基于CIRSPR‑Cas体系检测铅离子的方法。该方法包括以下步骤:将含有靶DNA片段的特异酶与可能含有铅离子的待测样品混合形成待测混合物I,将所述待测混合物I与CRISPR‑Cas12a体系溶液进行混合反应后得到待测混合物II;将所述待测混合物II与含有单链DNA的生物传感器进行混合反应后得到待测反应液,将所述待测反应液经固液分离得到的沉淀与显色剂混合进行显色反应得到显色反应液,对所述显色反应液进行比色分析或者吸光值检测分析;其中,所述靶DNA能够激活所述CRISPR‑Cas12a体系中的Cas12a蛋白。该方法对重金属的检测灵敏度高,且能够有效缩短检测时间,实用性强。

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