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公开(公告)号：CN114062561A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111433550.9
申请日：2021-11-29
Applicant: 江南大学 , 山西杏花村汾酒厂股份有限公司
Abstract: 本发明公开了基于高效液相色谱技术同时检测清香型酒醅中乳酸、乙酸及其衍生酯的方法，属于食品检测技术领域。该方法包括以下步骤：酒醅样品浸提、酒醅浸提液离心并重复上述步骤、收集两次酒醅浸提液的离心上清液、酒醅浸提液的离心上清液稀释、液相色谱分析，其中，所述浸提采用的溶剂为0％vol～100％vol乙醇溶液。通过对酒醅浸提过程中乙醇浓度的优化，建立了基于高效液相色谱技术的酒醅中乳酸、乙酸、乳酸乙酯、乙酸乙酯的定性定量检测方法。该方法操作简便，检测快速，精确性和准确性高，为白酒酒醅检测技术提供了科学的指导意义。
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公开(公告)号：CN113913351B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202111433036.5
申请日：2021-11-29
Applicant: 山西杏花村汾酒厂股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种清香型白酒酒醅中乳酸菌的筛选方法，属于白酒酿造技术领域。本发明方法包括：称取酒醅于含玻璃珠的灭菌后的PBS缓冲液中，室温下振荡，使样品与水充分混合。振荡结束后静置，取上清液稀释至不同梯度。然后吸取梯度稀释液均匀涂布于带溴甲酚绿指示剂的MRS培养基上培养，及时将变绿菌落标记出来，挑取变色菌落中形态不同的菌株在MRS培养基平板上划线纯化。得到单菌落后接种于MRS液体培养基中，培养一定时间后保藏备用。以上培养基均用稀盐酸调节pH至6.0，且加入两性霉素抑制真菌。该方法筛选出来的菌株针对性更强，增加了乳酸菌筛选的准确性，同时节省了人力物力的消耗。
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公开(公告)号：CN113913351A
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN202111433036.5
申请日：2021-11-29
Applicant: 山西杏花村汾酒厂股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种清香型白酒酒醅中乳酸菌的筛选方法，属于白酒酿造技术领域。本发明方法包括：称取酒醅于含玻璃珠的灭菌后的PBS缓冲液中，室温下振荡，使样品与水充分混合。振荡结束后静置，取上清液稀释至不同梯度。然后吸取梯度稀释液均匀涂布于带溴甲酚绿指示剂的MRS培养基上培养，及时将变绿菌落标记出来，挑取变色菌落中形态不同的菌株在MRS培养基平板上划线纯化。得到单菌落后接种于MRS液体培养基中，培养一定时间后保藏备用。以上培养基均用稀盐酸调节pH至6.0，且加入两性霉素抑制真菌。该方法筛选出来的菌株针对性更强，增加了乳酸菌筛选的准确性，同时节省了人力物力的消耗。
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公开(公告)号：CN120005846A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202411970882.4
申请日：2024-12-30
Applicant: 江南大学 , 山东金城生物药业有限公司
IPC: C12N9/10 , G16C20/70 , G16C20/10 , G06F18/24 , G06F18/214 , G06F17/16 , G06F17/18 , G06N20/00 , C12N15/54 , C12P19/56
Abstract: 本发明涉及一种提高UDP糖基转移酶催化活性的改造方法及改造所得突变体，属于酶工程技术领域。本发明通过建立UDP糖基转移酶同源空间结构模型，对出发酶的限速区域进行切割，并对切割后的区域进行随机嵌合，得到嵌合酶序列空间，通过贪心算法在序列空间中确定信息量最大的初始序列，通过多轮迭代结合体外验证，得到具有最高酶活性的迭代序列作为最优酶核苷酸序列，该方法改造得到最优UDP糖基转移酶突变体催化活性为出发酶的2.26倍，能够应用于以莱鲍迪苷A为底物生产莱鲍迪苷D，在促进了莱鲍迪苷D工业化生产的同时，为酶的改造和高通量筛选提供了全新的方法和思路，在相关化合物生产领域展现出重要价值和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN119876104A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202411091498.7
申请日：2024-08-09
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/88 , C12P19/26 , C12N15/60 , C12N11/02 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/62 , C07K19/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于自组装策略构建固定化肝素裂解酶及其制备低分子量肝素的方法，属于生物技术领域。本发明提供的肝素III突变体相较于野生型有着更高的催化效率，突变体K85A/Q95F/S471T的催化效率是野生型的1.75倍；本发明还利用聚集蛋白自组装肝素裂解酶Ⅲ，实现酶的固定化，进一步对Linker进行筛选和优化，提高了转化效率。本发明构建的酶固定系统可实现肝素裂解酶III的固定化，通过对重组细胞破壁后离心收集沉淀，减少了蛋白纯化脱盐等复杂步骤。固定化肝素裂解酶在循环10次以后仍有50％的催化活性，实现了低分子量肝素的高效制备，增加了酶的利用效率，降低了生产成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119753083A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411949322.0
申请日：2024-12-27
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/10 , C12Q1/48 , C12Q1/6897 , C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/18 , C12P19/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种α‑1,2‑岩藻糖基转移酶的高通量筛选方法及筛选得到的突变体，属于酶工程技术领域。本发明提供一种α‑1,2‑岩藻糖基转移酶高通量筛选方法，步骤包括构建2’‑岩藻糖基乳糖的指示菌株，使2’‑岩藻糖基乳糖的含量与荧光强度呈正相关，之后在底盘菌株中表达L‑岩藻糖激酶和α‑1,2‑岩藻糖基转移酶突变体文库，将底盘菌株进行油包水液滴包埋并将其与指示菌株融合共培养，通过液滴微流控分选根据荧光检测结果得到包含α‑1,2‑岩藻糖基转移酶正向突变体的底盘菌株，其中突变体FutCV93I的酶活为原始酶的2.31倍，酶活力得到极大提升。使用本发明提供的方法，能够对α‑1,2‑岩藻糖基转移酶进行高通量筛选，有利于2’‑岩藻糖基乳糖的工业化生产及其在食品和医药等领域的大规模应用推广。
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公开(公告)号：CN119752957A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411946161.X
申请日：2024-12-27
Applicant: 江南大学 , 山东润德生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种基于棒状杆菌内源重组酶的谷氨酸棒杆菌基因编辑工具及其应用，属于基因编辑技术领域。为了解决非模式菌株基因编辑效率低下的问题，本发明以C.glutamicum S9114为例，构建了以cpf1为基础的高效基因编辑工具，具体地：由于目前谷氨酸棒杆菌没有兼容性较好的基因编辑重组酶，且缺少效率良好的编辑系统，本发明通过blast迭代法进行筛选，为该菌株的基因编辑提供了一种来自C.aurimucosum ATCC 700975的新的工具酶CauR，其在非模式菌株谷氨酸棒杆菌S9114中的效率相较于现有的高效重组酶recET和red系统更高。在此基础上，我们对cpf1核酸酶和CauR重组酶进行了耦合，进一步显著提升了C.glutamicum S9114的同源重组能力，为非模式菌株的基因编辑提供了一种新的选择。
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公开(公告)号：CN117946224B
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202410156909.X
申请日：2024-02-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种无膜细胞器的构建及其在调控代谢合成中的应用。通过设计八肽基本元件，构建由肽段重复串联构成的重组无序蛋白，导入表达宿主中，得到生物分子凝聚体即无膜细胞器，在枯草芽孢杆菌胞内构建了具有良好流动性、稳定性与温敏性的无膜细胞器并对其进行验证，证明构建得到的重组无序蛋白具有高度的可编程性。利用可视化实验对无膜细胞器的功能进行测试，构建得到的无膜细胞器不仅可以允许小分子化合物的扩展渗透，而且可以招募特定的靶向蛋白，能够应用于调控目标化合物代谢。
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公开(公告)号：CN119220470A
公开(公告)日：2024-12-31
申请号：CN202411381169.6
申请日：2024-09-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶法磺酸化合成缓解溃疡性结肠炎药物硫酸胆固醇的方法，属于生物技术领域。本发明用大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌，对来自于B.thetaiotaomicron的羟基类固醇磺基转移酶2B1进行表达后纯化，再利用底物胆固醇在体外催化合成胆固醇硫酸盐，实现胆固醇硫酸盐的绿色、高效磺酸化修饰，从而用于缓解溃疡性结肠炎药物生产。
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公开(公告)号：CN116064270B
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202210802864.X
申请日：2022-07-07
Applicant: 宜宾五粮液股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及同时产蛋白酶及多种风味物质的地衣芽孢杆菌菌株及用途。目前所报道的芽孢杆菌菌株功能较为单一，为进一步提升白酒风味，本发明提供了一株同时产蛋白酶及多种风味物质的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)菌株，保藏编号为CGMCC No.24905。该菌株能够同时产蛋白酶、2,5‑二甲基吡嗪、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪、苯乙醇，在白酒酿造中有利于原料中蛋白质的分解，以及白酒风味的改善。对于功能性酿造微生物资源的强化利用和传统制曲过程的创新具有重要意义。
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