甜瓜的遗传转化方法和应用
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119320797A

    公开(公告)日:2025-01-17

    申请号:CN202411470191.8

    申请日:2024-10-21

    Abstract: 本发明提供了一种甜瓜的遗传转化方法和应用。其中,所述遗传转化方法,包括:将经侵染的甜瓜外植体与农杆菌工程菌在无糖培养基中进行共培养处理,其中,所述无糖培养基中不含有可溶性糖。使用上述方法可以将共培养时间延长至7~9天,可以显著提高农杆菌的侵染效率,并且可以减缓农杆菌的生长,避免芽诱导过程的农杆菌污染,同时降低共培养过程外植体的免疫反应,进一步提高了遗传转化效率。与采用现有的含糖培养基的共培养时间持续4天的甜瓜遗传转化方法相比,本发明提供的上述遗传转化方法采用无糖培养基并将共培养时间延长到8天,可以使甜瓜转基因效率提高14倍以上。本发明还提供一种上述遗传转化方法在制备甜瓜遗传转化产品中的应用。

    与甜瓜蔓茎长短性状基因SI/si紧密连锁的分子标记

    公开(公告)号:CN108754006A

    公开(公告)日:2018-11-06

    申请号:CN201810544142.2

    申请日:2018-05-31

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/13 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明属于甜瓜基因工程技术领域,具体涉及一个与甜瓜(Cucumis melo L.)蔓茎长短性状基因SI/si紧密连锁的分子标记及其应用专利申请事宜。该分子标记命名为CmSSR17253;由CmSSR17253‑F和CmSSR17253‑R组成。该分子标记可用于识别、定位甜瓜短蔓基因si和正常蔓基因SI,用于分子标记辅助育种。本申请能够较好克服现有常规育种筛选、鉴定方法的时间周期长、工作量大等缺陷,从而大幅加速育种进程;另一方面,由于借助于PCR扩增方法进行检测,具有特异性好、准确度高、鉴定效率高等优点,可在甜瓜幼苗早期即可准确判定甜瓜材料表型,从而有针对性开展后续育种工作。

    一种蔬菜采摘后光照保鲜装置

    公开(公告)号:CN114041689B

    公开(公告)日:2025-03-14

    申请号:CN202111440483.3

    申请日:2021-11-30

    Abstract: 本发明涉及一种蔬菜采摘后光照保鲜装置,有效的解决了现有西蓝花在卖场保鲜时间短的问题;其解决的技术方案包括一个竖向的灯管,灯管外有环形腔,每个环形腔的上方圆周均布有多个连杆,每个连杆的外端转动安装有一个锥形筒,连杆的下方设有与锥形筒同轴固定的卷盘,卷盘上缠绕有绳索,卷盘上同轴固定有可使其复位转动的卷簧,每个连杆的下端固定有一个第一活塞缸,绳索的自由端固定在与其对应的第一活塞缸的活塞上,第一活塞缸的活塞上设有可使其向远离卷盘方向复位的第一弹簧,第一活塞缸的底部经气管与环形腔连通,每个连杆的下方固定有一个第二活塞缸,第二活塞缸的活塞杆上设有可使其向上复位的第二弹簧。

    在甜瓜毛状根中验证CRISPR或Cas9载体活性及基因功能的方法

    公开(公告)号:CN119082175A

    公开(公告)日:2024-12-06

    申请号:CN202411240080.8

    申请日:2024-09-05

    Abstract: 本发明公开了在甜瓜毛状根中验证CRISPR或Cas9载体活性及基因功能的方法,使用萌发两天的甜瓜种子的子叶作为外植体,利用发根农杆菌K599进行侵染,经过共培养,毛状根诱导,以绿色荧光蛋白eGFP作为转基因毛状根的筛选标记,可在1个月左右获得转化CRISPR/Cas9载体的毛状根。利用该转化材料,我们分析了多个基因的基因编辑靶位点的可用性,发现增加sgRNA表达单元拷贝数对于基因编辑效率具有促进作用,并且我们发现CmRHL1被编辑后,甜瓜根毛不能形成。因此,本发明为验证CRISPR/Cas9载体活性以及研究基因在根发育过程中的功能,提供了一种方便、快捷的途径,对于甜瓜的稳定遗传转化方法是一个有利补充。

    与甜瓜种子大小性状共分离的SNP标记及其应用

    公开(公告)号:CN115852031B

    公开(公告)日:2023-07-25

    申请号:CN202211449316.X

    申请日:2022-11-18

    Abstract: 本发明提供了一种与甜瓜种子大小性状共分离的SNP标记,甜瓜4号染色体上包含4个SNP标记,分别为:标记Chr4_12085945,等位基因T/C;标记Chr4_12894435,等位基因T/A;标记Chr4_13382545,等位基因C/T;标记Chr4_15435120,等位基因C/A。其中SNP标记Chr4_13382545位点与甜瓜种子长度、宽度、千粒重三个性状相关,可准确区分甜瓜种子大小。本发明还提供一种上述SNP标记在甜瓜种子大小性状分子标记辅助育种中的应用,能提高选择的准确性、加快新品种培育的进程。本发明提供一种利用上述SNP标记筛选甜瓜种子大小的方法。

    一种基于芽真空侵染的甜瓜VIGS沉默体系的构建方法

    公开(公告)号:CN116355951A

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202211453013.5

    申请日:2022-11-21

    Abstract: 本发明公开了一种基于芽真空侵染的甜瓜VIGS沉默体系的构建方法,选择pTRSV2为重组载体,去除种皮的芽萌发长度1‑2cm的甜瓜种子为受体材料,以体积比1:1的辅助载体pTRSV1与pTRSV2‑目的基因重组载体的混合菌液进行真空侵染,侵染条件为:侵染压强为0.9kPa、菌液浓度OD600=1.0、侵染时间5min。同时,我们以甜瓜八氢番茄红素脱氢酶基因CmPDS为例,对本发明体系进行了应用验证,结果显示该沉默体系可显著降低甜瓜中CmPDS的表达量,植株沉默率为85%。相对于子叶注射法,甜瓜芽真空侵染法时效更快,一般在侵染后1周一叶一心时期就可快速显现沉默表型,有利于在苗期快速挖掘和研究甜瓜重要农艺性状相关基因,该沉默体系也克服了甜瓜遗传转化体系不成熟、效率低、周期长的不足。

    与甜瓜种子大小性状共分离的SNP标记及其应用

    公开(公告)号:CN115852031A

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202211449316.X

    申请日:2022-11-18

    Abstract: 本发明提供了一种与甜瓜种子大小性状共分离的SNP标记,甜瓜4号染色体上包含4个SNP标记,分别为:标记Chr4_12085945,等位基因T/C;标记Chr4_12894435,等位基因T/A;标记Chr4_13382545,等位基因C/T;标记Chr4_15435120,等位基因C/A。其中SNP标记Chr4_13382545位点与甜瓜种子长度、宽度、千粒重三个性状相关,可准确区分甜瓜种子大小。本发明还提供一种上述SNP标记在甜瓜种子大小性状分子标记辅助育种中的应用,能提高选择的准确性、加快新品种培育的进程。本发明提供一种利用上述SNP标记筛选甜瓜种子大小的方法。

    与甜瓜蔓茎长短性状基因SI/si紧密连锁的分子标记

    公开(公告)号:CN108754006B

    公开(公告)日:2021-05-07

    申请号:CN201810544142.2

    申请日:2018-05-31

    Abstract: 本发明属于甜瓜基因工程技术领域,具体涉及一个与甜瓜(Cucumis melo L.)蔓茎长短性状基因SI/si紧密连锁的分子标记及其应用专利申请事宜。该分子标记命名为CmSSR17253;由CmSSR17253‑F和CmSSR17253‑R组成。该分子标记可用于识别、定位甜瓜短蔓基因si和正常蔓基因SI,用于分子标记辅助育种。本申请能够较好克服现有常规育种筛选、鉴定方法的时间周期长、工作量大等缺陷,从而大幅加速育种进程;另一方面,由于借助于PCR扩增方法进行检测,具有特异性好、准确度高、鉴定效率高等优点,可在甜瓜幼苗早期即可准确判定甜瓜材料表型,从而有针对性开展后续育种工作。

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