Abstract:
A rat antibody encoding gene to pre-S2 surface antibody of hepatitis B virus having immuno-globulin gene is separated from H8 hydridoma cell producing rat monoclonal antibody to ad sub-type pre-S2. The chimeric antibody to pre-S2 antigen of hepatitis B virus Adr type/consists of producing a heavy chain from plasmid pMHG-S2 (KCTC 0029BP) and a light chain from plasmid pMKg-S2 (KCTC 0030BP).
Abstract:
본 발명은 사람 글루타민 합성효소 (glutamine synthase, GS) 유전자를 이용하여 동물세포에서 재조합 단백질을 고수율로 생산하는 방법에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 메티오닌 설폭시민 (methionine sulfoximine, MSX)에 의하여 증폭되는 글루타민 합성효소 유전자를 이용하여 외래 유전자를 대량으로 발현할 수 있는 발현 벡터, 이를 이용하여 얻은 재조합 에리트로포이에틴을 고수율로 생산하는 세포주 및 그의 제조 방법 그리고 이로부터 에리트로포이에틴을 얻는 제조 방법에 관한 것으로서, 상기 발현 벡터를 이용하면 다양한 재조합 단백질을 생산하는 세포주를 단일 단계의 증폭 과정을 거쳐 용이하게 선발할 수 있어 활성이 우수한 재조합 단백질을 CHO 세포 등에서 효과적으로 생산할 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: Provided are an expression vectors containing human glutamine synthase gene and a process for producing erythropoietin from an animal cell using the same vector, thereby producing the erythropoietin having improved activity in a higher yield. CONSTITUTION: The expression vector capable of mass-expressing a foreign gene from an animal cell is produced by inserting a human glutamine synthase gene connected to the downstream of a SV40 promoter, wherein 128 to 270 bases are removed, into an expression vector pcDNA, in which the expression vector pcDNA-gs has a restriction enzyme map of figure 3. A transformant E. coli/pcDNA-gs (KCTC 8860 P) is produced by transformation of E. coli with the expression vector pcDNA-gs. The expression vector pcDNA-EPO-dE1-gs is capable of producing erythropoietin in a higher yield. A transformant E. coli/pcDNA-EPO-dE1-gs is produced by transformation of E. coli with the expression vector pcDNA-EPO-dE1-gs. The erythropoietin is produced by fermenting the transformants in a methionine sulfoximine-increased medium to select the cell lines capable of producing erythropoietin in a higher yield and fermenting the cell lines.
Abstract:
본 발명은 에리트로포이에틴 (erythropoietin, 이하 'EPO'라고 약칭함)을 생산하는 세포주 및 이를 이용한 EPO 의 제조방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 dhfr (dihydrofolate reductase)유전자 및 EPO 유전자를 포함한 발현 벡터로 형질전환된 EPO 를 생산하는 세포주를 낮은 메토트렉세이트 (Methotrexate, MTX) 농도에서 장기 계대배양하여 선별한 EPO 를 효율적으로 생산하는 세포주, 그의 제조방법 그리고 본 발명의 세포주를 이용하여 고역가의 EPO 를 대량으로 생산하는 방법에 관한 것이다.
Abstract:
본 발명은 에리트로포이에틴 (erythropoietin, 이하 'EPO'라고 약칭함)을 생산하는 세포주 및 이를 이용한 EPO 의 제조방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 dhfr (dihydrofolate reductase)유전자 및 EPO 유전자를 포함한 발현 벡터로 형질전환된 EPO 를 생산하는 세포주를 낮은 메토트렉세이트 (Methotrexate, MTX) 농도에서 장기 계대배양하여 선별한 EPO 를 효율적으로 생산하는 세포주, 그의 제조방법 그리고 본 발명의 세포주를 이용하여 고역가의 EPO 를 대량으로 생산하는 방법에 관한 것이다.
Abstract:
본 발명은 B형 간염 바이러스의 표면항원 pre-S2에 대한 인간화항체, 이의 발현벡터(KCTT 8262P, KCTC 8263P KCTC 8284P, KCTC8285P), 상기 발현 벡터로 형질전환된 형질전환체 및 이들로부터 인간화 항체를 제조하는 방법에 관한 것이다.
Abstract:
본 발명은 B형 간염 바이러스(hepatitis B virus, HBV)의 표면항원 S에 대한 키메라 항체(chimeric antibody), 이의 발현 벡터, 상기 발현 벡터로 형질전환된 트랜스펙토마(transfectoma) 세포주 및 상기 키메라 항체의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명의 트랜스펙토마 세포주 KR12H 및 CS 13으로부터 생산된 항체는 HBV의 표면항원 S에 대한 우수한 항원결합능, 경쟁적 결합능, 친화도 및 HBV 중화효과를 나타낸다.
Abstract:
The chimeric antibody to pre-S2 of HBV (I) of subtype adr is prepared by; A (for heavy chain) (1) cutting DNA of aLys-30 of 8.9 kb with BanHI and BglII for HuCr1, (2) inserting that fragment into plasmid PSV2-neo to get PVS2neo-hCr1, (3) cutting DNA of pMHG-S2 of 9.4 kb and adding EcoRI linker, and (4) inserting that fragment into PVS2neo-hCr1 to get plasmid pHS2-neo (KCTC 0031BP); (for light chain) (5) extracting hygro gene from pSVhygro, (6) cutting pHuCk with EcoRI to get HuCk gene, (7) cutting pMGK-S2 with XmnI to get MuVk and Ek genes and adding XhoI linker, (8) inserting genes of (5), (6), (7) into plasmid pBluescript SK+ to get plasmid pLS2-hygro, C (KCTC 0032BP), (for transfectoma) (9) transfecting DNA fragments of PvuI treated pHS2-neo and SpeI/NotI treated pLS2-hygro to get A-44 (KCTC 0033BP). From A-44 transfectoma, 55kd size of heavy chain and 25kd of light chain of (1) were purified.