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公开(公告)号：KR1019960041359A
公开(公告)日：1996-12-19
申请号：KR1019950013818
申请日：1995-05-30
Applicant: 한국과학기술연구원 , 주식회사 녹십자홀딩스
Abstract: 본 발명은 B형 간염 바이러스(hepatitis B virus, HBV)의 표면항원 S에 대한 키메라 항체(chimeric antibody), 이의 발현 벡터, 상기 발현 벡터로 형질전환된 트랜스펙토마(transfectoma) 세포주 및 상기 키메라 항체의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명의 트랜스펙토마 세포주 KR12H 및 CS 13으로부터 생산된 항체는 HBV의 표면항원 S에 대한 우수한 항원결합능, 경쟁적 결합능, 친화도 및 HBV 중화효과를 나타낸다.
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR1019950009841B1
公开(公告)日：1995-08-29
申请号：KR1019920007593
申请日：1992-05-04
Applicant: 한국과학기술연구원
IPC: C12N15/51
Abstract: The chimeric antibody to pre-S2 of HBV (I) of subtype adr is prepared by; A (for heavy chain) (1) cutting DNA of aLys-30 of 8.9 kb with BanHI and BglII for HuCr1, (2) inserting that fragment into plasmid PSV2-neo to get PVS2neo-hCr1, (3) cutting DNA of pMHG-S2 of 9.4 kb and adding EcoRI linker, and (4) inserting that fragment into PVS2neo-hCr1 to get plasmid pHS2-neo (KCTC 0031BP); (for light chain) (5) extracting hygro gene from pSVhygro, (6) cutting pHuCk with EcoRI to get HuCk gene, (7) cutting pMGK-S2 with XmnI to get MuVk and Ek genes and adding XhoI linker, (8) inserting genes of (5), (6), (7) into plasmid pBluescript SK+ to get plasmid pLS2-hygro, C (KCTC 0032BP), (for transfectoma) (9) transfecting DNA fragments of PvuI treated pHS2-neo and SpeI/NotI treated pLS2-hygro to get A-44 (KCTC 0033BP). From A-44 transfectoma, 55kd size of heavy chain and 25kd of light chain of (1) were purified.
Abstract translation: 亚型adr的HBV（I）前S2的嵌合抗体通过以下方法制备： A（用于重链）（1）用BamHI和BglII切割用于HuCr1的8.9kb的Lys-30 DNA，（2）将该片段插入质粒PSV2-neo以获得PVS2neo-hCr1，（3）切割pMHG- S2，9.4kb，加入EcoRI接头，（4）将该片段插入到PVS2neo-hCr1中，得到质粒pHS2-neo（KCTC 0031BP）; （轻链）（5）从pSVhygro提取hygro基因，（6）用EcoRI切割pHuCk得到HuCk基因，（7）用XmnI切割pMGK-S2以获得MuVk和Ek基因并加入XhoI接头，（8）插入 （5），（6），（7）的基因转化到质粒pBluescript SK +中以获得质粒pLS2-hygro，C（KCTC 0032BP）（用于转染瘤）（9）转染PvuI处理的pHS2-neo和SpeI / NotI的DNA片段 治疗的pLS2-hygro得到A-44（KCTC 0033BP）。 从A-44转染瘤，纯化了55kd大小的重链和25kd的轻链（1）。
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4.发明公开
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公开(公告)号：KR1019960001817B1
公开(公告)日：1996-02-05
申请号：KR1019920011992
申请日：1992-07-06
Applicant: 한국과학기술연구원
IPC: C12N15/13
Abstract: The cloning method for chimeric antibody to S surface antigen of Hepatitis B virus subtype (I) consists of (1) determining N-terminal amino acid sequences of purified murine antibody to (I) with H67 cell line, (2) PCR reacting cDNA from H67 with primers for heavy chain as 5'-CCC GAA TTC GAG GT(TC) CAG CTG CA(GA) CA(GA) TCT GG(GA) TCT GG(GA) CCT G-3' and 5-CGG TCG ACA GGG ATC CAG AGT TCC AGG GTC AC-3' to get plasmid pMHV-S (KCTC 0044BP), (3) same as (2) for light chain as 5'-CCC GAA TTC GAC ATT GTG CTG AC(CA) CA(GA) TCT CC(TA) GCT-3' and 5'-CCC GCC TTG GAC ATT GTG CTG AC(CA) CA(GA) TCT CC(TA) GCT-3' to get plasmid pMKV-S (KCTC 0045BP), and (4) sequencing the genes cloned.
Abstract translation: 乙型肝炎病毒亚型（I）的S表面抗原嵌合抗体的克隆方法包括：（1）用H67细胞系确定（I）纯化的鼠抗体的N-末端氨基酸序列，（2）PCR反应来自 H67与重链引物作为5'-CCC GAA TTC GAG GT（TC）CAG CTG CA（GA）CA（GA）TCT GG（GA）TCT GG（GA）CCT G-3'和5-CGG TCG ACA GGG ATC CAG AGT TCC AGG GTC AC-3'获得质粒pMHV-S（KCTC 0044BP），（3）与（2）相同的轻链作为5'-CCC GAA TTC GAC ATT GTG CTG AC（CA）CA ）TCT CC（TA）GCT-3'和5'-CCC GCC TTG GAC ATT GTG CTG AC（CA）CA（GA）TCT CC（TA）GCT-3'获得质粒pMKV-S（KCTC 0045BP） （4）测序克隆的基因。
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公开(公告)号：KR1019930023464A
公开(公告)日：1993-12-18
申请号：KR1019920007593
申请日：1992-05-04
Applicant: 한국과학기술연구원
IPC: C12N15/51
Abstract: 본 발명은 헤파타이티스 B 바이러스(HBV)의 pre-S-2) 표면항원에 대한 키레라향체를 생산하는 균주 및 그 항체에 관한 것이다.
본 발명에서는 adr아형 pre-S-2표면항원에 특이적으로 결합하는 생쥐 모노클로날 항체 헤비사슬의 가변영역 코딩 유전자와 사람 면역글로뷸린 불변영역 코딩유전자(Crl)를 연결시켜 재조합 DNA를 구성하고 이것을 발현벡터 pSV-neo에 클로닝시킴으로써 발현플라스미드pHS2-neo를 제조하였고, 생쥐 모노클로날 항체 카파사슬의 가변영역 코딩 유전자와 사람 면역글로뷸린 불변영역 코딩 유전가(Ck)를 연결시켜 재조합 DNA를 구성하고 이것을 발현벡터 pSV-hygro의 하이그로마이신 비 내성유전자와 연결한후 이 재조합 DNA를 pBluescript sk(+)에 클로닝시킴으로써 발현플라스미드 pLS2-hygro를 제조하였으며, 이것들을 포유동물세포에 형질전환시킨 결과, HBV의 pre-S2에 특이적으로 결합하는 사람/쥐의 키레라항체를 생산할 수 있는 트랜스펙토마 세포주를 제조하게 되었다.
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