Abstract:
본 발명은 단백질 과발현 카세트가 넉인된 유전자 적중 벡터 제조 방법 및 이 벡터가 도입된 이종간 이식용 형질전환 복제동물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 사용 목적에 따라 프로모터의 선택이 가능하여 과발현시키기 위한 유전자의 발현 조절이 가능하며, 알파 1,3-갈락토실트랜스퍼라제 유전자를 효과적으로 넉아웃시킴과 동시에 사람 CD46(MCP) 과발현 카세트가 상기 선택된 프로모터에 의해 과발현되도록 넉인됨으로써, 이식거부반응이 억제된 형질전환 복제 미니어쳐 복제 돼지를 생산할 수 있으며, 이들 및 이들의 자손을 이용하여 이종간 세포와 장기의 이식에 널리 사용할 수 있는 장점이 있다.
Abstract:
PURPOSE: A composition containing porcine follicular fluid and a method for producing cloned animal are provided to reduce apoptosis of donor cells and to remarkably enhance productivity of cloned animals. CONSTITUTION: A method for preparing nuclear transfer embryo of animals except for human comprises: a step of enucleation, injecting donor cell, and fusing the cells, and activating fused oocytes; and a step of culturing the oocytes in a composition containing porcine follicular fluid. The composition additionally contains 1-5% FBS. The animal is a pig.
Abstract:
PURPOSE: A gene targeting knock-in vector including protein over-revelation cassette, a manufacturing method thereof, and a transformation cloned animal for heterograft in which the vector is introduced are provided to manufacture a transformation reproduction miniature reproduction pig in which a graft rejection is controlled by effectively knock-out and knock-in at the same time. CONSTITUTION: A gene targeting knock-in vector successively including protein over-revelation cassette comprises a first area having base sequences which are homologous in gene of mammal, a cassette for protein over-revelation, and a second area having homologous base sequences in gene of mamma. The gene of mammal is alpha 1,3- galactosyltransferase gene. The mammal is a pig. The pig is a NH-miniature pig. The first area is a left arm including a part of intron 8 of the alpha 1,3- galactosyltransferase or Exxon 9. A size of the first area is 2kb~6kb.
Abstract:
본 발명은 사람 CD73 발현 벡터, 이를 포함하는 세포주 및 형질전환 복제동물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 새로운 면역거부반응 조절기술의 개발로 고부가가치의 장기이식용 미니돼지의 생산에 기여할 수 있으며, 새로운 장기 이식용 형질전환 복제 돼지의 생산으로 이종 장기 이식의 실용화를 촉진할 수 있다.
Abstract:
The present invention relates to a knock-in vector that can target a complement regulatory protein (decay accelerating factor, DAF) gene and a human alpha 1,2-fucosyltransferase (HT) gene in a position of an alpha 1,3-galactosyl transferase (alpha 1,3-GT) gene, a cell transduced with the vector, a fertilized egg that is nuclear transplanted in the cell, a transgenic animal that is knocked out by the vector, and a method for producing the same. The knock-in vector of the present invention can be used to produce a transgenic animal in which hyperacute rejection that occurs in xeno-transplantation is controlled, so that the knock-in vector can be widely used for the production of a transgenic animal that can be used for effective xeno-transplantation.
Abstract:
본 발명은 복제동물의 생산성 향상을 위한 동결융해 공여세포의 처리 방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는 급속냉동된 체세포를 융해하여 바로 핵이식에 사용하는 단계를 포함하는 동결융해 공여세포의 처리 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면 존의 복제동물 생산에서 가장 중요한 과정인 공여세포의 처리 과정에서 동결융해 후 추가적인 배양 없이 곧바로 핵이식에 사용함으로써 핵이식 과정을 단축시킬 수 있으며, 이를 통해 복제(형질전환 복제) 동물의 생산 효율을 향상시킬 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: A method for treating frozen and thawed donor cells for improving the productivity of cloned animals is provided to shorten nuclear transplantation without additional culturing. CONSTITUTION: A method for treating frozen and thawed donor cells comprises: a step of culturing somatic cells for synchronization to a G0/G1 phase; a step of quickly freezing the somatic cells at -70 to -120 deg. C; and a step of thawing the somatic cells and transplanting. The somatic cell is transformed.