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公开(公告)号：KR1020000055980A
公开(公告)日：2000-09-15
申请号：KR1019990004939
申请日：1999-02-12
Applicant: 한국과학기술연구원 , 주식회사 녹십자홀딩스
IPC: A61K39/00
Abstract: PURPOSE: A humanized antibody to surface antigen free-S 2 of hepatitis B virus(HBV) is provided, which maintains similar antigen-binding abilities with existing humanized antibody, but diminishes immune-causing abilities than existing humanized antibody obviously, so which can be used to prevent HBV infection and to treat the chronic hepatitis B. CONSTITUTION: A process for the preparation of humanized antibody to HBV surface antigen free-S 2 comprises of: preparing humanized heavy-chained genes; preparing humanized light-chained genes; preparing representing vector(pCMV-HS2(II)HC) producing humanized heavy-chain; preparing representing vector(pKC-dhfr-HS2(II)) producing humanized light-chain; culturing COS7 cells, and washing with OPTI MEM I; mixing pCMV-HS2(II)HC, pKC-dhfr-HS2(II) and Lipofectamine, adding OPTI MEM I, and pouring the mixture over the COS7 cells, culturing, concentrating, and measuring the concentration of the humanized antibody in COS7 cell; investigating binding ability of humanized antibody to HBV surface antigen free-S2; and investigating binding affinity to antigen of humanized antibody.
Abstract translation: 目的：提供乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原自由-S2的人源化抗体，其与现有的人源化抗体保持相似的抗原结合能力，但明显降低免疫原性，比现有的人源化抗体明显降低，因此可以 用于预防HBV感染并治疗慢性乙型肝炎。构成：用于制备HBV表面抗原游离-S2的人源化抗体的方法包括：制备人源化重链基因; 制备人源化轻链基因; 制备表达载体（pCMV-HS2（II）HC）产生人源化重链; 制备产生人源化轻链的载体（pKC-dhfr-HS2（II））; 培养COS7细胞，用OPTI MEM I洗涤; 混合pCMV-HS2（II）HC，pKC-dhfr-HS2（II）和Lipofectamine，加入OPTI MEM I，并将混合物倒在COS7细胞上，培养，浓缩和测量COS7细胞中人源化抗体的浓度; 研究人源化抗体对HBV表面抗原游离-S2的结合能力; 并研究人源化抗体对抗原的结合亲和力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR100267058B1
公开(公告)日：2000-09-15
申请号：KR1019970076922
申请日：1997-12-29
Applicant: 한국과학기술연구원
IPC: C07K16/08
Abstract: PURPOSE: A bispecific antibody being capable of recognizing antigens of hepatitis B virus and a producing method thereof are provided, which can recognize hepatitis B virus antigens which are different each other, and is thus effectively used in the prevention and treatment of hepatitis. CONSTITUTION: The bispecific antibody TBSIg recognizing antigens of hepatitis B virus contains amino acid sequence represented by sequence ID No. 12 and comprises a S antigen of hepatitis B virus recognizing region, link peptides, a pre-S2 of hepatitis B virus recognizing region, and human antibody Fc region. An expression vector pCMV-dhfr-TBSIg contains the bispecific TBSIg gene represented by sequence ID No. 11. The transformant E. coli(KCTC 8861P) is produced by transforming with the expression vector pCMV-dhfr-TBSIg. The CHO cell line BSG-18H produces the bispecific antibody TBSIg. The method for producing the bispecific antibody TBSIg comprises the steps of: transforming CHO cell line with the expression vector pCMV-dhfr-TBSIg; selecting CHO cell line capable of mass producing the bispecific antibody by incubating the transformed CHO cell line in a medium containing MTX; transferring the CHO cell line into a serum free medium and incubating it; and subjecting the fermented culture to column chromatography to obtain the bispecific antibody. The sequences ID. No. 11 and 12 above are described as in the description.
Abstract translation: 目的：提供能够识别乙型肝炎病毒抗原的双特异性抗体及其制备方法，其可以识别彼此不同的乙型肝炎病毒抗原，因此有效地用于预防和治疗肝炎。 构成：识别乙型肝炎病毒抗原的双特异性抗体TBSIg含有由序列号12表示的氨基酸序列，包含乙型肝炎病毒识别区域的S抗原，链接肽，乙型肝炎病毒识别区域的前S2位点，以及 人抗体Fc区。 表达载体pCMV-dhfr-TBSIg含有由序列号11表示的双特异性TBSIg基因。通过用表达载体pCMV-dhfr-TBSIg转化产生转化体大肠杆菌（KCTC 8861P）。 CHO细胞系BSG-18H产生双特异性抗体TBSIg。 制备双特异性抗体TBSIg的方法包括以下步骤：用表达载体pCMV-dhfr-TBSIg转化CHO细胞系; 选择能够通过在含有MTX的培养基中培养转化的CHO细胞系来大量产生双特异性抗体的CHO细胞系; 将CHO细胞系转移到无血清培养基中并孵育; 并将发酵的培养物进行柱色谱以获得双特异性抗体。 序列ID。 上述11和12描述如下。
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公开(公告)号：KR1019990056898A
公开(公告)日：1999-07-15
申请号：KR1019970076922
申请日：1997-12-29
Applicant: 한국과학기술연구원
IPC: C07K16/08
Abstract: 본 발명은 B형 간염 바이러스의 다른 두 항원을 동시에 인식하는 이중특이 항체 및 그의 제조방법에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 B형 간염 바이러스 (HBV) 표면항원인 S 항원 및 프리-S2 항원을 동시에 인식하는 이중특이 항체 (bispecific antibody), 그의 유전자, 이를 포함하는 발현 벡터, 상기 항체를 생산하는 세포주 및 이를 이용하여 간염 항체를 얻는 제조방법에 관한 것으로서, 상기 이중특이 항체는 HBV 입자를 효과적으로 인식하여 간염을 예방하고 치료하는데 유용하게 사용될 수 있다.
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公开(公告)号：KR100163163B1
公开(公告)日：1998-11-16
申请号：KR1019950030147
申请日：1995-09-14
Applicant: 한국과학기술연구원 , 주식회사 녹십자홀딩스
IPC: C12N15/51
Abstract: 본 발명은 B형 간염 바이러스의 표면항원 pre-S2에 대한 인간화항체, 이의 발현벡터(KCTC 8262P, KCTC 8263P KCTC 8284P, KCTC 8285P), 상기 발현 벡터로 형질전환된 형질전환체 및 이들로부터 인간화 항체를 제조하는 방법에 관한 것이다.
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公开(公告)号：KR1019930023464A
公开(公告)日：1993-12-18
申请号：KR1019920007593
申请日：1992-05-04
Applicant: 한국과학기술연구원
IPC: C12N15/51
Abstract: 본 발명은 헤파타이티스 B 바이러스(HBV)의 pre-S-2) 표면항원에 대한 키레라향체를 생산하는 균주 및 그 항체에 관한 것이다.
본 발명에서는 adr아형 pre-S-2표면항원에 특이적으로 결합하는 생쥐 모노클로날 항체 헤비사슬의 가변영역 코딩 유전자와 사람 면역글로뷸린 불변영역 코딩유전자(Crl)를 연결시켜 재조합 DNA를 구성하고 이것을 발현벡터 pSV-neo에 클로닝시킴으로써 발현플라스미드pHS2-neo를 제조하였고, 생쥐 모노클로날 항체 카파사슬의 가변영역 코딩 유전자와 사람 면역글로뷸린 불변영역 코딩 유전가(Ck)를 연결시켜 재조합 DNA를 구성하고 이것을 발현벡터 pSV-hygro의 하이그로마이신 비 내성유전자와 연결한후 이 재조합 DNA를 pBluescript sk(+)에 클로닝시킴으로써 발현플라스미드 pLS2-hygro를 제조하였으며, 이것들을 포유동물세포에 형질전환시킨 결과, HBV의 pre-S2에 특이적으로 결합하는 사람/쥐의 키레라항체를 생산할 수 있는 트랜스펙토마 세포주를 제조하게 되었다.
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