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11.发明授权
公开(公告)号：KR100958096B1
公开(公告)日：2010-05-14
申请号：KR1020080012377
申请日：2008-02-11
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12N15/102 , C12N15/70 , C12N15/902 , C12N2800/80 , C12N2830/002
Abstract: 본 발명은 염색체 특정 부위 제거용 재조합 벡터 및 이를 이용한 미생물 내 염색체 특정 부위의 제거방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 아라비노즈에 의해 유도되는 프로모터; 람다(λ)-레드(red) 재조합에 관여하는 단백질을 코딩하는 유전자; 람노즈에 의해 유도되는 프로모터; 및 I-
Sce I 제한효소를 코딩하는 유전자;를 포함하는, 염색체 특정 부위 제거용 재조합 벡터로, 기존 방법에 비해 보다 간편하고 빠르게, 선별마커를 남기지 않고, 미생물 내 특정 유전자를 연속적으로 제거할 수 있다.
유전자 제거, 람다-레드 재조합 (λ-red recombination), 람노즈, 아라비노즈, 유전체 재조합-
公开(公告)号：KR100958095B1
公开(公告)日：2010-05-14
申请号：KR1020070141932
申请日：2007-12-31
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12N15/67 , C07K14/4702
Abstract: 본 발명은 미생물로부터 항균 펩타이드(antimicrobial peptide)를 효과적으로 생산할 수 있는 유전자 구조물 및 이를 이용하여 항균 펩타이드를 효과적으로 대량생산 및 분리하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 유전자 구조물에는 하나의 프로모터 하에 상반된 전하 값(charge)을 지닌 산성(acidic) 펩타이드와 염기성(basic)의 항균 펩타이드를 코딩하는 두 개의 독립된 시스트론(cistron)이 번역동반(translational coupling) 상태로 존재한다. 번역동반된 산성 펩타이드와 염기성 항균 펩타이드는 발현과 동시에 서로 전기적으로 결합(charge-charge interaction)하여 항균 펩타이드의 세포 독성을 중화시켜, 항균 펩타이드에 의한 숙주 미생물의 사멸을 방지할 수 있다. 뿐만 아니라, 화학물질 또는 효소에 의한 분해 없이 결합된 산성 펩타이드와 항균 펩타이드를 분리할 수 있어 재조합 미생물로부터 항균 펩타이드를 손쉽게 대량으로 생산할 수 있다.
항균 펩타이드, 대량발현, 번역동반(translational coupling), 산성 단백질-
13.发明公开
公开(公告)号：KR1020090086870A
公开(公告)日：2009-08-14
申请号：KR1020080012377
申请日：2008-02-11
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12N15/102 , C12N15/70 , C12N15/902 , C12N2800/80 , C12N2830/002
Abstract: A recombinant vector for removing a specific site of chromosome is provided to sequencially and simply remove the specific gene site in a microorganism at once. A recombinant vector for removing a specific site of chromosome comprises a promoter (Para) which is induced by arabinose; a gene which encodes a protein related to lamda-red recombination; and promoter which is induced by a rhamnose. A method for removing the specific site of the chromosome using the recombinant vector comprises: a step of preparing a linear DNA fragment having homologous site A and B which is related to lamda-red recombination, I-SceI restriction enzyme cutting site, and homologous site C which is related to homologous recombination for removing selection marker; a step of introducing linear DNA fragement in transformed microorganism and replacing at specific site of microorganism chromosome; and a step of expressing I-SceI restriction enzyme and removing selection marker.
Abstract translation: 提供了一种用于去除染色体特异性位点的重组载体，以便一次性地顺序并简单地除去微生物中的特异性基因位点。 用于去除染色体特异位点的重组载体包含由阿拉伯糖诱导的启动子（Para）; 编码与lamda-red重组相关的蛋白质的基因; 和由鼠李糖诱导的启动子。 使用重组载体去除染色体的特定位点的方法包括：制备与lamda-red重组，I-SceI限制酶切割位点和同源位点相关的具有同源位点A和B的线性DNA片段的步骤 C与同源重组相关，用于去除选择标记; 在转化的微生物中引入线性DNA分解并在微生物染色体的特定部位置换的步骤; 以及表达I-SceI限制酶并除去选择标记的步骤。
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公开(公告)号：KR1020090073863A
公开(公告)日：2009-07-03
申请号：KR1020070141932
申请日：2007-12-31
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12N15/67 , C07K14/4702
Abstract: A method for expressing an antimicrobial peptide is provided to neutralize toxicity effect to host microbe by translational coupling system of antimicrobial peptide and acidic peptide and massively produce the antimicrobial peptide. A method for producing an antimicrobial peptide comprises: a step of preparing 2-cistron DNA structure to express a gene of basic antimicrobial peptide and gene of acidic peptide with a promoter; a step of inserting the 2-cistron DNA structure into an expression vector, inducing in microbe and express an inclusion body of basic antimicrobial peptide and acidic peptide; and a step of obtaining the inclusion body from a microbial cell and isolate basic antimicrobial peptide.
Abstract translation: 提供表达抗微生物肽的方法，通过抗微生物肽和酸性肽的平移偶联体系中和宿主微生物的毒性作用，大量生产抗菌肽。 一种抗微生物肽的制造方法，其特征在于，具有通过促进剂表达碱性抗菌肽基因和酸性肽基因的2-顺反子DNA结构的步骤。 将2-顺反子DNA结构插入表达载体，诱导微生物并表达碱性抗微生物肽和酸性肽的包涵体的步骤; 以及从微生物细胞获得包涵体并分离碱性抗微生物肽的步骤。
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15.发明授权분자내 양방향 염색체 제거에 사용되는 트랜스포존, 이를이용한 미생물 변이주 제조 및 생장 비필수 유전자 선별방법 失效双向内分泌基因删除的转运，新型微生物的构建和使用该基因的非遗传性基因的鉴定
公开(公告)号：KR100470907B1
公开(公告)日：2005-03-08
申请号：KR1020020021811
申请日：2002-04-20
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/00
CPC classification number: C12N15/1082 , C12N15/90
Abstract: 본 발명은 트랜스포존(transposon)의 분자내 전위(intramolecular trnaposition)와 선별마커(selection marker)를 이용한 염색체의 임의 부위의 제거에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 트랜스포존의 전위효소 인식부위(outer element, OE)와 선별마커(selection markers)를 포함하는 트랜스포존 및 상기 트랜스포존과 전위효소(transposase) 발현벡터를 미생물에 삽입시켜 미생물 염색체의 임의 부위를 양방향으로 제거함으로써, 주어진 생장조건 하에서 생장에 불필요한 유전자를 선별함과 동시에, 유전자 일부가 제거된 새로운 미생물 변이주를 제조하는 새로운 방법에 관한 것이다.
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Patent Agency Ranking16.发明授权트랜스포존과 Cre/loxP 부위 특이적 재조합 방법을 이용하는 염색체의 특정부위가 제거된 미생물 변이주 제조방법 失效트랜스포존과과/ lo lo과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과과
公开(公告)号：KR100459870B1
公开(公告)日：2004-12-04
申请号：KR1020020009647
申请日：2002-02-22
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/63
Abstract: Disclosed is a method for developing novel strains deleted specific chromosome sites, using transposon and Cre/loxP site-specific recombination by Cre expression vector, wherein the transposon comprises a selectable marker and loxP site. The method comprises the steps of: (1) preparing a transposon comprising a selectable marker and loxP site; (2) inserting the transposon into an optional position of microbial chromosome, and determining the inserted site; (3) integrating two transposons comprising a different selectable marker to one chromosome; (4) deleting a chromosomal site between the two lox sites by introducing a Cre expression vector into the chromosome of step (3); and (5) repeating steps (3 and 4) for the mutant deleted a part of chromosome, to shorten the chromosome of mutant gradually.
Abstract translation: 公开了一种开发利用由Cre表达载体进行的转座子和Cre / loxP位点特异性重组来删除特定染色体位点的新型菌株的方法，其中所述转座子包含选择标记和loxP位点。 该方法包括以下步骤：（1）制备包含选择标记和loxP位点的转座子; （2）将转座子插入微生物染色体的任选位置，并确定插入的位点; （3）将包含不同选择标记的两个转座子整合到一条染色体上; （4）通过将Cre表达载体导入步骤（3）的染色体中，从而删除两个lox位点之间的染色体位点; （5）重复步骤（3和4）中突变体缺失部分染色体，逐渐缩短突变体的染色体。
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公开(公告)号：KR1020030077363A
公开(公告)日：2003-10-01
申请号：KR1020020016445
申请日：2002-03-26
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C07K7/08
CPC classification number: C07K14/43527 , A61K38/00 , C07K7/08 , C07K14/001 , C07K14/4723 , Y02A50/481
Abstract: PURPOSE: Provided are antimicrobial peptide derivatives which involve powerful antimicrobial activity with respect to gram positive bacillus, gram negative bacillus and fungus. They powerfully inhibit microbial expression at the wound portion while not exhibiting any hemolysis, and are used as antimicrobial agent for the wound treatment facilitation, trauma treatment, mouthwash, and eyewash. CONSTITUTION: The antimicrobial peptide comprises an amino acid sequence expressed by formula 1(N-terminal-X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15-C-terminal), wherein X1 is vacant or a basic amino acid, X2 is two hydrophobic amino acids identical with or different from each other, and X3 is a basic amino acid. Furthermore, in the formula 1, X4 is glutamine or asparagine, X5 is phenylalanine or tryptophan, X6 is proline, X7 is isoleucine or valine, X8 is glycine, X9 is a basic amino acid, X10, X12 and X14 are two hydrophobic amino acids identical with or different from each other, respectively, X11 and X13 are basic amino acids identical with or different from each other, respectively, and X15 is vacant or a basic amino acid.
Abstract translation: 目的：提供抗菌肽衍生物，其涉及革兰氏阳性杆菌，革兰氏阴性杆菌和真菌具有强大的抗微生物活性。 它们强力地抑制伤口部分的微生物表达，而不显示任何溶血作用，并且用作伤口治疗促进，创伤治疗，漱口水和洗眼剂的抗微生物剂。 构成：抗微生物肽包含由式1表示的氨基酸序列（N-末端-X 1 X 2 X 3 X 4 X 5 X 6 X 7 X 8 X 9 X 10 X 11 X 12 X 13 X 14 X 15 C-末端），其中X 1为空位或碱性氨基酸，X 2为彼此相同或不同的2个疏水性氨基酸， X3是碱性氨基酸。 此外，在式1中，X4为谷氨酰胺或天冬酰胺，X5为苯丙氨酸或色氨酸，X6为脯氨酸，X7为异亮氨酸或缬氨酸，X8为甘氨酸，X9为碱性氨基酸，X10为X12，X14为两个疏水性氨基酸 分别相同或不同，X 11和X 13分别是彼此相同或不同的碱性氨基酸，X15为空位或碱性氨基酸。
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18.发明公开
公开(公告)号：KR1020000034279A
公开(公告)日：2000-06-15
申请号：KR1019980051563
申请日：1998-11-28
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: PURPOSE: Recombinant plasmids having secretion signal sequence of endoxylanase from Bacillus are provided which express and secret foreign protein in transformed E. coli therewith. CONSTITUTION: A secretion signal sequence of endoxylanase fragment from plasmid, pKJX4, containing endoxylase gene from Bacillus is amplified by PCR. Recombinant plasmid, pJS101, is constructed by cloning PCR fragments into plasmid, pTrc99A, having strong trc promoter. Plasmid pJS101 contains signal sequence of endoxylanase and endoxylanase joined with PstI site. 3' end of endoxylanase has restriction sites of BamHI, XbaI, SalI, PstI and HindIII for the cloning of foreign protein. Plasmid pJS101DeltaP is constructed by removing PstI site of 3' end of endoxylanase gene for the easy introduction of foreign protein. T7 promoter containing vector, pJS301, is constructed by joining of NdeI and BamHI digested fragment from pJS101DeltaP and pET21c. Induction experiment with IPTG shows that the yield of secreted protein is at least 6% of total protein. Alkaline phosphatase is over expressed and constitutes 6.9% of total protein.
Abstract translation: 目的：提供具有来自芽孢杆菌的内切木聚糖酶的分泌信号序列的重组质粒，其在转化的大肠杆菌中表达和分泌外源蛋白。 构成：通过PCR扩增来自质粒pKJX4的含有来自芽孢杆菌的内切酶基因的内切木聚糖酶片段的分泌信号序列。 通过将PCR片段克隆到具有强trc启动子的质粒pTrc99A中构建重组质粒pJS101。 质粒pJS101含有与PstI位点连接的内切木聚糖酶和内切木聚糖酶的信号序列。 3'末端的木聚糖酶具有BamHI，XbaI，SalI，PstI和HindIII的限制性位点，用于克隆外来蛋白。 通过除去3'末端的内切木聚糖酶基因的PstI位点构建质粒pJS101DeltaP，便于引入外源蛋白。 通过从pJS101DeltaP和pET21c连接NdeI和BamHI消化的片段构建含有T7启动子的载体pJS301。 IPTG的诱导实验表明，分泌蛋白的产量至少占总蛋白的6％。 碱性磷酸酶过表达，占总蛋白的6.9％。
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公开(公告)号：KR1019980086606A
公开(公告)日：1998-12-05
申请号：KR1019980013372
申请日：1998-04-09
Applicant: 주식회사 삼양제넥스 , 한국과학기술원
IPC: C12N15/62
Abstract: 본 발명은 항균 펩타이드의 대량 제조방법에 관한 것으로, 유전자 조작을 통하여 염기성의 항균 펩타이드(basic antimicrobial peptide)와 산성 펩타이드(acidic peptide)의 융합 유전자의 중합체를 제조하고, 그를 숙주 미생물에서 발현시킴으로써, 발현된 산성 펩타이드가 항균 펩타이드의 염기성을 중화시켜 항균 펩타이드의 항균력을 일시적으로 소거할 수 있어 숙주 미생물의 사멸을 방지하여, 재조합 미생물로부터 항균 펩타이드를 대량으로 생산하는 방법에 관한 것이다.
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20.发明公开
公开(公告)号：KR1020170106627A
公开(公告)日：2017-09-21
申请号：KR1020170114728
申请日：2017-09-07
Applicant: 한국과학기술원 , 재단법인 지능형 바이오 시스템 설계 및 합성 연구단
IPC: A61K31/56 , A61K31/575 , A61K31/704 , A23L33/10
CPC classification number: A61K31/56 , A23L33/10 , A23V2002/00 , A23V2200/308 , A23V2250/60 , A61K31/575 , A61K31/704 , A61K2300/00
Abstract: 본발명은파낙사디올류진세노사이드화합물의일종인 PPD(protopanaxadiol) 또는컴파운드-K를유효성분으로포함하는교모세포종전이억제용약학조성물및 교모세포종전이억제용식품조성물에관한것이다. 본발명에서제공하는진세노사이드 C-K 또는 PPD는교모세포종세포의부착을억제하여아노이키스를유발시킬수 있을뿐만아니라교모세포종세포에대하여세포독성을나타내므로, 교모세포종의치료와전이억제를동시에수행함으로써교모세포종환자를효과적으로치료하는데널리활용될수 있을것이다.
Abstract translation: 本发明涉及一种类型的PPD（原人参二醇）或成胶质细胞瘤转移的抑制的药物组合物和食品组合物用于抑制胶质母细胞瘤转移包含该化合物作为活性成分-K的eunpa入射二醇RYUJIN人参皂甙化合物。 仅sikilsu抑制本发明所提供的人参皂甙CK或PPD neungyo髓母细胞瘤细胞的粘附导致ahnoyi接吻作为针对胶质母细胞瘤的细胞毒性的展品和T通过同时进行成胶质细胞瘤的转移的治疗和抑制 它可能被广泛用于有效治疗母细胞瘤患者。
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