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    구제역 Ｏ형 ３Ｂ 부분이 결손된 바이러스
    21.
    发明授权
    구제역 Ｏ형 ３Ｂ 부분이 결손된 바이러스 有权
    口蹄疫病毒携带3B部分缺失的O血清型基因

    公开(公告)号：KR101374179B1

    公开(公告)日：2014-03-19

    申请号：KR1020120037406

    申请日：2012-04-10

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 박종현 ,  김수미 ,  이광녕 ,  초가기 ,  이여주 ,  김은정 ,  방민우 ,  이서용 ,  고영준 ,  이향심 ,  조인수

    IPC: C12N15/63 ,  C12N15/33 ,  C12N7/01

    Abstract: 본 발명은 구제역바이러스 유전자를 조작하여 야외주와 감별이 가능하고 실험실에서 병원성이 약화된 구제역 재조합바이러스에 관한 것이다.
    본 발명의 목적은 구제역 바이러스 한국 2002년 발생된 O형 돼지 유래바이러스를 기초로하여 클로닝한 후 비구조단백질(3B 부위) 일부를 제거하고, 비구조단백질(3B 부위) 일부 서열을 인위적으로 교체하여 야외바이러스와 감별이 가능한 바이러스로 제작하였다. 구제역 감염축과의 감별은 비구조단백질 (NSP)에 대한 항체를 검출함으로 감염임을 알수 있는 데 제작된 바이러스는 NSP 부위인 (3B region)의 일부를 결손 또는 대체시켜 백신과 감별토록 하였다. 이 바이러스는 인위적인 서열을 삽입하여 바이러스를 제작하였고, 원래 돼지에서 분리된 2002년 구제역 바이러스는 돼지에서 숙주동물로 알려져 있으나, 본 재조합 바이러스는 돼지에서 증상을 나타내지 않은 병원성이 약화된 바이러스이다. 이 바이러스는 동물에서 병원성이 약화되어 소독제 실험 또는 항바이러스 실험 등 실험실내에서 다루기에 병원성 바이러스 보다 더욱 안전한 장점을 지니고 있다.

    하이브리도마 세포주, 이에 의해 생산된 단클론항체,구제역 진단 시약, 진단 키트 및 구제역 바이러스 중화항체검출방법
    22.
    发明授权
    하이브리도마 세포주, 이에 의해 생산된 단클론항체,구제역 진단 시약, 진단 키트 및 구제역 바이러스 중화항체검출방법 有权
    杂交细胞系，从杂交细胞系产生的单克隆抗体，鱼和病毒病毒感染检测试剂，FMDV检测试剂盒和FMDV中和抗体的检测方法

    公开(公告)号：KR101102841B1

    公开(公告)日：2012-01-05

    申请号：KR1020080060980

    申请日：2008-06-26

    Applicant: 주식회사 메디안디노스틱 ,  대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 주후돈 ,  장병식 ,  박경민 ,  엄재구 ,  박종현 ,  고영준 ,  이광녕 ,  이향심 ,  김수미 ,  정혜영

    IPC: C12N5/12 ,  C12N5/02 ,  C12N5/00 ,  C07K16/00

    Abstract: 본 발명은 구제역 바이러스의 O형, A형 및 Asia 1형에 공통적인 면역반응성을 나타내는 단클론항체를 생산하는 하이브리도마 세포주, 구제역 바이러스 O형 VP1 사이트 A에 대한 특이적인 면역반응성과 바이러스 중화능을 나타내는 단클론항체를 생산하는 하이브리도마 세포주, 구제역 바이러스 A형 VP1 사이트 A에 대한 특이적인 면역반응성과 바이러스 중화능을 나타내는 단클론항체를 생산하는 하이브리도마 세포주, 상기 각 하이브리도마 세포주에 의해 생산되는 단클론항체, 상기 단클론항체를 포함하는 구제역 진단 시약, 상기 구제역 진단 시약을 포함하는 구제역 진단 키트 및 구제역 바이러스 중화항체 검출방법 또는 구제역 진단방법에 관한 것이다.
    본 발명에 의하면 구제역 바이러스 혈청형에 대한 각각의 항체를 이용하여 구제역 바이러스 진단용 항원을 포획할 필요가 없고, 유전자 재조합 구제역 바이러스 구조단백질을 진단용 항원으로 사용함으로써 종래 차폐시설을 갖춘 실험실에서만 배양이 가능한 구제역 바이러스를 사용하던 방법에 비해 매우 편리하며, 구제역 바이러스 혈청형에 특이적인 단클론항체를 사용하여 각 축종별 이차항체를 따로 사용하는 번거로움 없이 중화항체 검출이 가능하다. 그리고 본 발명의 진단방법은 종래 기술에 비해 검출 민감도와 특이도가 우수하다.
    구제역 바이러스, 하이브리도마, 단클론항체, 중화항체, 진단 시약, 진단 키트, 진단방법, 유전자 재조합 구조단백질

    하이브리도마 세포주, 이에 의해 생산된 단클론항체,구제역 진단 시약, 진단 키트 및 구제역 바이러스 중화항체검출방법
    23.
    发明公开
    하이브리도마 세포주, 이에 의해 생산된 단클론항체,구제역 진단 시약, 진단 키트 및 구제역 바이러스 중화항체검출방법 有权
    杂交细胞系，从混合细胞系产生的单克隆抗体，FOOD-AND-MOUTH DISEASE VIRUS（FMDV）检测试剂，FMDV检测试剂盒和FMDV中和抗体的检测方法

    公开(公告)号：KR1020100001169A

    公开(公告)日：2010-01-06

    申请号：KR1020080060980

    申请日：2008-06-26

    Applicant: 주식회사 메디안디노스틱 ,  대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 주후돈 ,  장병식 ,  박경민 ,  엄재구 ,  박종현 ,  고영준 ,  이광녕 ,  이향심 ,  김수미 ,  정혜영

    IPC: C12N5/12 ,  C12N5/02 ,  C12N5/00 ,  C07K16/00

    Abstract: PURPOSE: A hybridoma cell line producing monoclonal antibody to foot-and-mouth disease virus and a method for detecting foot-and-mouth disease virus neutralization antibody are provided to ensure detection convenience without capture of antigen. CONSTITUTION: A hybridoma cell line(KCTC 11337BP) produces monoclonal antibody having common immunoreactivity to virus type O, A and Asia 1. A method for detecting foot-and-mouth disease virus neutralization antibody comprises: a step of fixing monoclonal antibody on a solid support; a step of washing to remove antibodies which are not fixed on the solid support; a step of reacting antigen for diagnosing foot-and-mouth disease virus on the solid support; a step of washing the antigens to remove antigens which are not bound to the solid support; and a step of reacting probe-conjugated monoclonal antibody with the antigen.

    Abstract translation: 目的：提供产生口蹄疫病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞系和口蹄疫病毒中和抗体检测方法，以确保检测方便而无需捕获抗原。 构成：杂交瘤细胞系（KCTC 11337BP）产生对病毒O，A和亚洲1具有常见免疫反应性的单克隆抗体。一种用于检测口蹄疫病毒中和抗体的方法，包括：将单克隆抗体固定在固体上的步骤 支持; 洗涤步骤以除去未固定在固体支持物上的抗体; 将抗原用于诊断口蹄疫病毒的固体支持物的步骤; 洗涤抗原以除去不与固体支持物结合的抗原的步骤; 和探针结合的单克隆抗体与抗原反应的步骤。

    재조합 구제역 2Ｃ 비구조단백질 항원 및 단클론항체를이용한 구제역 진단방법
    24.
    发明授权
    재조합 구제역 2Ｃ 비구조단백질 항원 및 단클론항체를이용한 구제역 진단방법 有权
    재조합구제역2C비구조단백질항원및단클론항체를이용한구제역진단방재

    公开(公告)号：KR100449906B1

    公开(公告)日：2004-09-22

    申请号：KR1020010082977

    申请日：2001-12-21

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 현방훈 ,  엄재구 ,  구복경 ,  이광녕 ,  김인중 ,  고영준 ,  권창희 ,  주이석 ,  안수환

    IPC: C12N15/33

    Abstract: PURPOSE: A diagnostic method of foot-and-mouth disease using a recombinant FMCV 2C non-structural protein and a monoclonal antibody is provided, thereby more rapidly and accurately diagnosing the foot-and-mouth disease than the prior methods. CONSTITUTION: A gene encoding a recombinant FMCV 2C non-structural protein derived from Korean foot-and-mouth disease virus O/SKR/2000 has the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1. A recombinant vector is prepared by cloning the gene encoding the recombinant FMCV 2C non-structural protein of SEQ ID NO: 1. The recombinant FMCV 2C non-structural protein is expressed by transformation of a cell with the recombinant vector. A hybridoma cell line(KCTC 10137BP) is prepared by introducing the recombinant FMCV 2C non-structural protein into an animal, collecting an immunized cell from the animal and fusing the immunized cell with a cancer cell. A recombinant FMCV 2C non-structural protein specific monoclonal antibody is produced from the hybridoma cell line(KCTC 10137BP). A diagnostic method of foot-and-mouth disease comprises the steps of: (1) diluting the recombinant FMCV 2C non-structural protein specific monoclonal antibody in a coating buffer solution and pouring the diluate on a plate; (2) washing the plate to remove unattached monoclonal antibodies; (3) reacting the recombinant FMCV 2C non-structural protein with the plate; (4) washing the plate to remove unreacted recombinant FMCV 2C non-structural proteins; (5) reacting the testing serum with the plate; (6) washing the plate to remove unreacted testing serum; (7) reacting a conjugate, which binds with an antibody for foot-and-mouth disease virus in the testing serum and has an enzyme, a radioactive material or a fluorescent material, with the testing serum; and (8) measuring intensity of the enzyme reaction, fluorescence reaction or radiation reaction with the conjugate.

    Abstract translation: 目的：提供使用重组FMCV 2C非结构蛋白和单克隆抗体的口蹄疫诊断方法，从而比现有方法更快速和更准确地诊断口蹄疫。 构成：编码来源于韩国口蹄疫病毒O / SKR / 2000的重组FMCV 2C非结构蛋白的基​​因具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列。重组载体通过克隆编码 重组FMCV 2C非结构蛋白SEQ ID NO：1。通过用重组载体转化细胞表达重组FMCV 2C非结构蛋白。 通过将重组FMCV 2C非结构蛋白导入动物中，从动物中收集免疫的细胞并将免疫的细胞与癌细胞融合来制备杂交瘤细胞系（KCTC 10137BP）。 从杂交瘤细胞系（KCTC 10137BP）产生重组FMCV 2C非结构蛋白特异性单克隆抗体。 一种口蹄疫诊断方法，包括以下步骤：（1）将重组FMCV 2C非结构蛋白特异性单克隆抗体稀释于包被缓冲液中，并将稀释液倒入平板中; （2）清洗平板以去除未附着的单克隆抗体; （3）使重组FMCV 2C非结构蛋白与平板反应; （4）洗涤平板以除去未反应的重组FMCV 2C非结构蛋白; （5）使测试血清与平板反应; （6）洗涤平板以除去未反应的测试血清; （7）使与试验血清中的口蹄疫病毒抗体结合的缀合物与试验血清具有酶，放射性物质或荧光物质的步骤; 和（8）测量酶反应的强度，与缀合物的荧光反应或辐射反应。

    재조합 구제역 2Ｃ 비구조단백질 항원 및 단클론항체를이용한 구제역 진단방법
    25.
    发明公开
    재조합 구제역 2Ｃ 비구조단백질 항원 및 단클론항체를이용한 구제역 진단방법 有权
    使用重组FMCV 2C非结构蛋白和单克隆抗体的足球疾病诊断方法

    公开(公告)号：KR1020030052859A

    公开(公告)日：2003-06-27

    申请号：KR1020010082977

    申请日：2001-12-21

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 현방훈 ,  엄재구 ,  구복경 ,  이광녕 ,  김인중 ,  고영준 ,  권창희 ,  주이석 ,  안수환

    IPC: C12N15/33

    CPC classification number: C12N5/163 ,  C07K16/1009 ,  C07K2317/14 ,  C12N2770/32131 ,  G01N33/56983 ,  G01N33/577 ,  G01N2333/09

    Abstract: PURPOSE: A diagnostic method of foot-and-mouth disease using a recombinant FMCV 2C non-structural protein and a monoclonal antibody is provided, thereby more rapidly and accurately diagnosing the foot-and-mouth disease than the prior methods. CONSTITUTION: A gene encoding a recombinant FMCV 2C non-structural protein derived from Korean foot-and-mouth disease virus O/SKR/2000 has the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1. A recombinant vector is prepared by cloning the gene encoding the recombinant FMCV 2C non-structural protein of SEQ ID NO: 1. The recombinant FMCV 2C non-structural protein is expressed by transformation of a cell with the recombinant vector. A hybridoma cell line(KCTC 10137BP) is prepared by introducing the recombinant FMCV 2C non-structural protein into an animal, collecting an immunized cell from the animal and fusing the immunized cell with a cancer cell. A recombinant FMCV 2C non-structural protein specific monoclonal antibody is produced from the hybridoma cell line(KCTC 10137BP). A diagnostic method of foot-and-mouth disease comprises the steps of: (1) diluting the recombinant FMCV 2C non-structural protein specific monoclonal antibody in a coating buffer solution and pouring the diluate on a plate; (2) washing the plate to remove unattached monoclonal antibodies; (3) reacting the recombinant FMCV 2C non-structural protein with the plate; (4) washing the plate to remove unreacted recombinant FMCV 2C non-structural proteins; (5) reacting the testing serum with the plate; (6) washing the plate to remove unreacted testing serum; (7) reacting a conjugate, which binds with an antibody for foot-and-mouth disease virus in the testing serum and has an enzyme, a radioactive material or a fluorescent material, with the testing serum; and (8) measuring intensity of the enzyme reaction, fluorescence reaction or radiation reaction with the conjugate.

    Abstract translation: 目的：提供使用重组FMCV 2C非结构蛋白和单克隆抗体的口蹄疫诊断方法，从而比现有方法更快速，准确地诊断口蹄疫。 构成：编码来自韩国口蹄疫病毒O / SKR / 2000的重组FMCV 2C非结构蛋白的基​​因具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列。通过克隆编码 SEQ ID NO：1的重组FMCV 2C非结构蛋白。通过用重组载体转化细胞来表达重组FMCV 2C非结构蛋白。 通过将重组FMCV 2C非结构蛋白引入动物中，从动物中收集免疫的细胞并将免疫的细胞与癌细胞融合，来制备杂交瘤细胞系（KCTC 10137BP）。 从杂交瘤细胞系（KCTC 10137BP）产生重组FMCV 2C非结构蛋白特异性单克隆抗体。 口蹄疫的诊断方法包括以下步骤：（1）在包衣缓冲溶液中稀释重组FMCV 2C非结构蛋白特异性单克隆抗体，将稀释物倒入板上; （2）洗涤板以除去未附着的单克隆抗体; （3）使重组FMCV 2C非结构蛋白与板反应; （4）洗涤板以除去未反应的重组FMCV 2C非结构蛋白; （5）使测试血清与板反应; （6）洗板以除去未反应的检测血清; （7）使与测试血清中的口蹄疫病毒抗体结合并具有酶，放射性物质或荧光材料的缀合物与测试血清反应; 和（8）测量酶反应的强度，荧光反应或与缀合物的辐射反应。

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