公开(公告)号：CN116837010A

公开(公告)日：2023-10-03

申请号：CN202310830429.2

申请日：2023-07-07

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 张玺 ,  王耀坤 ,  郭潇 ,  王天云 ,  王小引 ,  贾岩龙 ,  张俊河 ,  林艳 ,  米春柳

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/85 ,  C12N15/13

Abstract: 本发明提供了一种CHO细胞来源的外泌体miRNA在调控重组蛋白表达中的应用，本发明属于生物医药技术领域。本发明提供的一种CHO细胞来源的外泌体miRNA在调控重组蛋白表达中的应用中所述miRNA为cgr‑miR‑92a‑3p，核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明发现转染miRNA inhibitor下调CHO细胞来源的外泌体miR‑92a‑3p水平，阿达木抗体(重组蛋白)的表达水平显著升高，有望提供一种提高CHO细胞重组蛋白表达的新方法。

公开(公告)号：CN115786240A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202211614585.7

申请日：2022-12-15

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 张玺 ,  王天云 ,  王耀坤 ,  孙秋丽 ,  耿少雷 ,  王小引 ,  贾岩龙 ,  张俊河 ,  韩明明 ,  王浩民

IPC: C12N5/071 ,  C12P21/02 ,  C07K14/765

Abstract: 本发明提供了一种中国仓鼠卵巢细胞外泌体的提取方法及其应用，属于基因工程技术领域。本发明采用差速超速离心法提取中国仓鼠卵巢细胞的外泌体，通过简单操作可以获得高产量、高纯度的外泌体，将该外泌体作为细胞培养基补充添加剂，能够提高重组蛋白的表达水平，提高重组蛋白药物的生产效率和经济效益。

公开(公告)号：CN114316065A

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202111269645.1

申请日：2021-10-29

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 王天云 ,  林艳 ,  孙秋丽 ,  张玺 ,  米春柳 ,  耿少雷 ,  王冲

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明属于重组蛋白细胞培养技术领域，具体涉及小分子肽及其应用、细胞培养基、核酸分子。本发明将细胞穿膜肽氨基酸序列与自噬调控蛋白的功能结构域氨基酸序列整合，合成小分子肽，作为重组蛋白表达的哺乳动物细胞培养基的补充添加物，能够促进细胞自噬，实现重组蛋白在细胞的高效表达。

公开(公告)号：CN114214359A

公开(公告)日：2022-03-22

申请号：CN202111361923.6

申请日：2021-11-17

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 王小引 ,  王天云 ,  张玺 ,  易丹丹 ,  林艳 ,  赵春澎 ,  贾岩龙

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/67 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12N15/13 ,  C12N5/10 ,  C07K14/78 ,  C07K16/24

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种提高CHO细胞重组蛋白表达水平的方法。包括以下步骤：（1）将目的基因重组载体与含细胞周期调控相关基因p18和/或调控细胞生长的基因aFGF的共转基因重组载体共转染CHO细胞；所述基因p18的序列如SEQ ID NO:1所示；所述基因aFGF的序列如SEQ ID NO:2所示；（2）将共转基因重组载体和目的基因重组载体共转染到CHO细胞中后，培养并筛选，得到CHO细胞表达系统；（3）将瞬时和稳定转染CHO细胞株进行悬浮无血清培养，得到目的蛋白。本发明方法可以显著提高目的基因在CHO细胞中的表达水平，实现目的蛋白在CHO细胞的瞬时和稳定高水平表达。

公开(公告)号：CN106544362B

公开(公告)日：2019-04-09

申请号：CN201611111154.3

申请日：2016-12-06

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 赵春澎 ,  王天云 ,  王小引 ,  张玺 ,  徐光华 ,  付笑笑 ,  高向征 ,  白可可

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种基于cHS4元件的哺乳动物细胞附着体表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。鸡超敏感位点4(cHS4)是一种经典绝缘子元件，具有増强子阻断与异染色质屏障的功能，能将转基因沉默的主要原因‑位置效应降到最低，还能降低外源启动子及增强子造成邻近基因异常表达的概率。本发明将cHS4序列引入载体的多克隆位点即eGFP下游处，一方面能克服转基因沉默，另一方面还能介导外源基因在无选择压力的情况下在哺乳动物细胞中稳定、高效、持久的表达，且安全性较好。

公开(公告)号：CN105802997A

公开(公告)日：2016-07-27

申请号：CN201610270090.5

申请日：2016-04-27

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 王小引 ,  王天云 ,  杜爱玲 ,  贾岩龙 ,  赵春澎 ,  张俊河 ,  张玺 ,  高向征 ,  白可可 ,  孙彩霞

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66

CPC classification number: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N2800/107

Abstract: 本发明公开了一种人类及哺乳动物细胞附着体表达载体、构建方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。本发明以pEGFP?C1为出发载体构建含核基质结合区特征性序列(如SEQ ID NO:1所示)的附着体表达载体，并以EF?1α启动子(如SEQ ID NO:2所示)替换pEGFP?C1载体上原CMV启动子，得到的pEME载体能高效、持续、稳定表达外源目的基因。