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公开(公告)号:CN117660529A
公开(公告)日:2024-03-08
申请号:CN202311543756.6
申请日:2023-11-20
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及核酸构建体、表达载体、表达系统、及其应用。本发明提供的核酸构建体,不包括hCMV MIE启动子中的上游调控序列和核因子1结合位点簇序列,作为表达载体的启动子元件,构建重组蛋白表达载体和表达系统,提高重组蛋白稳定表达水平;本发明进一步优化内含子A序列,替换本发明提供核酸构建体形成的截短启动子的内含子A序列,同样能够提高重组蛋白稳定表达水平;并且优选的如SEQ ID NO:3所述的内含子A序列,与包含本发明提供的核酸构建体作为截短启动子的表达载体构建的CHO表达系统比较,能够更进一步提高重组蛋白稳定表达水平。
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公开(公告)号:CN117535292A
公开(公告)日:2024-02-09
申请号:CN202311439094.8
申请日:2023-11-01
Applicant: 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C07K16/24
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及let‑7a在CHO细胞重组蛋白表达中的应用、表达系统。本发明通过在CHO细胞重组蛋白表达系统中增加miRNA let‑7a的量提高重组蛋白表达量,并且设计试验验证在CHO细胞重组蛋白表达系统中直接转染let‑7a mimics能够提高目的蛋白,例如阿达木抗体,表达量;同时,通过试验验证,将let‑7a mimics编码核酸序列插入出发载体构建let‑7a过表达载体,将let‑7a过表达载体转染至CHO细胞重组蛋白表达系统,增加miRNA let‑7a的量,更高效提高目的蛋白表达量。
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公开(公告)号:CN116004645A
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202310056456.9
申请日:2023-01-13
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/14 , C12N15/866 , C12N5/10 , C12N15/62
Abstract: 本发明涉及一种利用昆虫细胞生产人血清白蛋白的方法、核苷酸序列及表达载体,属于生物技术领人血清白蛋白的生产领域。本发明人血清白蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明根据昆虫细胞密码子偏好性,对人血清白蛋白基因进行密码子优化,搭配核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的信号肽序列,能够实现人血清白蛋白在Sf9细胞中的表达。本发明进一步公开利用昆虫细胞生产人血清白蛋白的方法,在生产过程中添加小分子添加物,可有效的提高人血清白蛋白在Sf9细胞中的表达量。
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公开(公告)号:CN115786240A
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN202211614585.7
申请日:2022-12-15
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N5/071 , C12P21/02 , C07K14/765
Abstract: 本发明提供了一种中国仓鼠卵巢细胞外泌体的提取方法及其应用,属于基因工程技术领域。本发明采用差速超速离心法提取中国仓鼠卵巢细胞的外泌体,通过简单操作可以获得高产量、高纯度的外泌体,将该外泌体作为细胞培养基补充添加剂,能够提高重组蛋白的表达水平,提高重组蛋白药物的生产效率和经济效益。
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公开(公告)号:CN114561430A
公开(公告)日:2022-05-31
申请号:CN202210305844.1
申请日:2022-03-25
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于重组蛋白表达技术领域,具体涉及人源化细胞瞬时表达载体、表达系统及其应用。本发明构建的表达载体,引入TRE/TAP组成的反式激活蛋白元件,并且TAP作为独立表达框,相比未引入该元件的表达载体,能够成倍提高目的蛋白瞬时表达量;更进一步的,本发明将TRE/TAP组成的反式激活蛋白元件与核基质结合区元件MAR和IRES复配使用,相互之间协同增效,进一步提高目的蛋白的瞬时表达量。由此,本发明提供的表达载体和表达系统能够应用于制备蛋白类药物。
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公开(公告)号:CN114316065A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202111269645.1
申请日:2021-10-29
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于重组蛋白细胞培养技术领域,具体涉及小分子肽及其应用、细胞培养基、核酸分子。本发明将细胞穿膜肽氨基酸序列与自噬调控蛋白的功能结构域氨基酸序列整合,合成小分子肽,作为重组蛋白表达的哺乳动物细胞培养基的补充添加物,能够促进细胞自噬,实现重组蛋白在细胞的高效表达。
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公开(公告)号:CN114480496B
公开(公告)日:2024-05-07
申请号:CN202210168172.4
申请日:2022-02-23
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C12N15/53 , C12N15/66 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明属于报告基因载体领域,具体涉及一种昆虫细胞用双荧光素酶报告基因载体、构建方法、重组载体及应用。该昆虫细胞用双荧光素酶报告基因载体是对psiCHECK‑2载体改造得到;所述改造包括使用OpIE2启动子替换原有SV40启动子,以及在HSV‑TK promoter和Synthetic poly(A)之间插入合成的DNA片段;所述psiCHECK‑2载体的hRluc基因下游供插入感兴趣的昆虫靶基因;所述合成的DNA片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提供的昆虫细胞用双荧光素酶报告基因载体,成为昆虫细胞中强有力的基因转录和mRNA加工的研究工具,适用于昆虫基因功能研究。
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公开(公告)号:CN117106697A
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202311250024.8
申请日:2023-09-26
Applicant: 新乡医学院 , 新乡银海医学检验实验室有限公司 , 北京同立海源生物科技有限公司
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明涉及无血清培养基技术领域。本发明提供了Palbociclib在制备CHO细胞无血清培养基中的应用。通过添加Palbociclib制备一种CHO细胞无血清培养基,所述Palbociclib在该CHO细胞无血清培养基中的终浓度为2‑50μM。本发明CHO细胞无血清培养基中还包括维生素C,与Palbociclib搭配使用,能够更好的提高目的蛋白在CHO细胞中的表达水平,增加细胞特异性生产力,促进CHO细胞生长、提高细胞活率和产量,同时达到降低生产成本的目的。
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公开(公告)号:CN114316065B
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202111269645.1
申请日:2021-10-29
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于重组蛋白细胞培养技术领域,具体涉及小分子肽及其应用、细胞培养基、核酸分子。本发明将细胞穿膜肽氨基酸序列与自噬调控蛋白的功能结构域氨基酸序列整合,合成小分子肽,作为重组蛋白表达的哺乳动物细胞培养基的补充添加物,能够促进细胞自噬,实现重组蛋白在细胞的高效表达。
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公开(公告)号:CN116240160A
公开(公告)日:2023-06-09
申请号:CN202310062687.0
申请日:2023-01-16
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明属于细胞工程技术领域,具体涉及一种无血清培养基添加剂、无血清培养基及其应用。本发明提供的添加剂,有效成分包括黄芩素或原花青素,在一定程度上提高目的蛋白在CHO细胞中的表达水平;进一步本发明优化黄芩素和原花青素的浓度,实现目的蛋白表达量更高效的提升;更进一步的,本发明将黄芩素和原花青素组合使用,使黄芩素和原花青素发挥协同增效作用,更进一步提高重组蛋白在CHO细胞中的表达水平,从而降低生产制品生产工艺对生物反应器规模的需求和培养基的消耗,提高生产效率,最终降低生物制品的生产成本。
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