Abstract:
본 발명은 B형 간염 바이러스(Hepatitis B Virus, 이하 HBV라고 약칭함)의 표면 항원 preS 단백질 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명은 HBV의 표면 항원 preS1 단백질의 아미노 말단에서 2번째와 3번째 아미노산을 암호 하는 뉴클레오타이드 서열이 5'-GGAGGT-3'에서 5'-AAAAAA-3'로 돌연변이된 preS1 항원 변이단백질 및 이 단백질을 박테리아에서 수용성 형태로 다량으로 안정적으로 발현시키는 제조방법에 관한 것이다.
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본 발명은 B형 간염 바이러스의 표면항원 pre-S2에 대한 인간화항체, 이의 발현벡터(KCTC 8262P, KCTC 8263P KCTC 8284P, KCTC 8285P), 상기 발현 벡터로 형질전환된 형질전환체 및 이들로부터 인간화 항체를 제조하는 방법에 관한 것이다.
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본 발명은 B형 간염 바이러스(Hepatitis B Virus, 이하HBV라고 약칭함)의 표면 항원 preS 단백질 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명은 HBV의 표면항원 preS1단백질의 아미노 말단에서 2번째와 3번째 아미노산을 암호하는 뉴클레오타이드 서열이 5'-GGAGGT-3'에서 5'-AAAAAA-3'로 돌연변이된 preS1 항원 변이단백질 및 이 단백질을 박테리아에서 수용성 형태로 다량으로 안정적으로 발현시키는 제조방법에 관한 것이다.
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The method for preparing a lot of soluble pre-S1 antigen for B-type hepatitis virus from colitis germs is designed to produce a fused protein containing a pre-S1 antigen fused with a maltose coupling protein.
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The cloning method for chimeric antibody to S surface antigen of Hepatitis B virus subtype (I) consists of (1) determining N-terminal amino acid sequences of purified murine antibody to (I) with H67 cell line, (2) PCR reacting cDNA from H67 with primers for heavy chain as 5'-CCC GAA TTC GAG GT(TC) CAG CTG CA(GA) CA(GA) TCT GG(GA) TCT GG(GA) CCT G-3' and 5-CGG TCG ACA GGG ATC CAG AGT TCC AGG GTC AC-3' to get plasmid pMHV-S (KCTC 0044BP), (3) same as (2) for light chain as 5'-CCC GAA TTC GAC ATT GTG CTG AC(CA) CA(GA) TCT CC(TA) GCT-3' and 5'-CCC GCC TTG GAC ATT GTG CTG AC(CA) CA(GA) TCT CC(TA) GCT-3' to get plasmid pMKV-S (KCTC 0045BP), and (4) sequencing the genes cloned.
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본 발명은 헤파타이티스 B 바이러스(HBV)의 pre-S-2) 표면항원에 대한 키레라향체를 생산하는 균주 및 그 항체에 관한 것이다. 본 발명에서는 adr아형 pre-S-2표면항원에 특이적으로 결합하는 생쥐 모노클로날 항체 헤비사슬의 가변영역 코딩 유전자와 사람 면역글로뷸린 불변영역 코딩유전자(Crl)를 연결시켜 재조합 DNA를 구성하고 이것을 발현벡터 pSV-neo에 클로닝시킴으로써 발현플라스미드pHS2-neo를 제조하였고, 생쥐 모노클로날 항체 카파사슬의 가변영역 코딩 유전자와 사람 면역글로뷸린 불변영역 코딩 유전가(Ck)를 연결시켜 재조합 DNA를 구성하고 이것을 발현벡터 pSV-hygro의 하이그로마이신 비 내성유전자와 연결한후 이 재조합 DNA를 pBluescript sk(+)에 클로닝시킴으로써 발현플라스미드 pLS2-hygro를 제조하였으며, 이것들을 포유동물세포에 형질전환시킨 결과, HBV의 pre-S2에 특이적으로 결합하는 사람/쥐의 키레라항체를 생산할 수 있는 트랜스펙토마 세포주를 제조하게 되었다.