公开(公告)号：WO2016052851A1

公开(公告)日：2016-04-07

申请号：PCT/KR2015/007694

申请日：2015-07-23

Applicant: 단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  김주현 ,  정진숙 ,  한상영

IPC: C12N15/85 ,  C12N9/22 ,  A61K31/713 ,  A61K38/43 ,  A61P35/00

CPC classification number: A61K31/713 ,  A61K38/43 ,  C12N9/22 ,  C12N15/85

Abstract: 본 발명은 (i) 조직 특이적 프로모터; 및 (ii) 암특이적 유전자를 표적으로 하는 트랜스-스플라이싱 라이보자임 및 상기 라이보자임의 3' 엑손에 연결된 목적 유전자를 포함하는, 라이보자임-목적 유전자 발현 카세트를 포함하며, 상기 발현카세트는 라이보자임-목적 유전자 발현 카세트의 5' 말단에 스플라이싱 공여/스플라이싱 수여 서열(splicing donor/splicing acceptor sequence, SD/SA sequence)이 연결되고, 3' 말단에 WPRE(Woodchuck hepatitis virus Posttranscriptional Regulatory Element)가 연결된 것으로, (iii) 상기 WPRE의 3' 말단에 마이크로 RNA-122a(microRNA-122a, miR-122a)를 인식하는 핵산 서열이 추가로 연결된 것을 특징으로 하는, 재조합 벡터, 상기 재조합 벡터가 도입된 형질전환 세포, 상기 재조합 벡터로부터 발현된 라이보자임, 상기 재조합 벡터 또는 라이보자임을 포함하는 간암 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 상기 조성물을 이용한 간암 치료방법에 관한 것이다.

Abstract translation: 本发明涉及重组载体，引入重组载体的转化细胞，从重组载体表达的核酶，包含重组载体和核酶的肝癌预防或治疗组合物，以及肝脏治疗方法 使用该组合物的癌症，所述重组载体包含：组织特异性启动子; 和核酶靶基因表达盒，其包含靶向癌特异性基因的反式剪接核酶和与核酶的3'外显子连接的靶基因，其中将剪接供体/剪接受体序列（SD / SA序列）连接 到核酶靶基因表达盒的5'端，土拨鼠肝炎病毒转录调控元件（WPRE）连接到核酶靶基因表达盒的3'末端，并且识别微RNA-122a的核酸序列 （microRNA-122a，miR-122a）进一步连接到WPRE的3'末端。

公开(公告)号：KR102252423B1

公开(公告)日：2021-05-13

申请号：KR1020200021014

申请日：2020-02-20

Applicant: 알지노믹스 주식회사 ,  동아대학교 산학협력단 ,  단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  이창호 ,  한승렬 ,  김지현 ,  조은이 ,  정진숙 ,  주미하

IPC: C12N15/86 ,  C12N9/12 ,  C12N15/113 ,  C12N15/67 ,  A61K38/45 ,  A61K48/00 ,  A61P35/00

Abstract: 본발명은암 특이적트랜스-스플라이싱리보자임및 이의용도에관한것이다. 본발명에따른트랜스-스플라이싱리보자임은정상조직에는작용하지않고암 조직특이적으로발현되어안전성이높고, 전사후 수준에서발현효율이우수하므로암을치료하는데 유용하게사용될수 있다. 구체적으로, 본발명의재조합벡터는 CMV 프로모터, SD/SA 및 WPRE를보유하여리보자임의발현효율이높고, miR-122T를보유함으로써 miR-122에의해활성이조절될수 있어안전성이우수하다. 따라서, HCV가원인인간암중에서 miR-122의발현수준이정상조직보다암 조직에서높게나타나는일부간암을제외한모든간암을치료하는데 효과적으로이용될수 있고, miR-122를실질적으로발현하지않는다른암종에서도효과적으로이용될수 있다.

公开(公告)号：KR1020100052070A

公开(公告)日：2010-05-19

申请号：KR1020080110937

申请日：2008-11-10

Applicant: 단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  김성진 ,  김주현 ,  정진숙

IPC: C12N15/11 ,  C12N5/10 ,  C12P19/34

Abstract: PURPOSE: A trans-splicing group I which specifically recognizes single nucleotide mutant transcript is provided to specifically treat and diagnose cancer cells expressing mutant transcript. CONSTITUTION: A trans-splicing group I ribozyme targets and specifically recognizes Kra G12V RNA. The ribozyme has 'GCAGCU' or 'GACAGC' as an inner nucleotide sequence. The ribozymes is AS100KRib1 of sequence number 25, AS300KRib1, of sequence number 26, AS100KRib2 of sequence number 27, or AS300KRib2 of sequence number 28. The trans-splicing group I ribozyme contains a reporter gene at 3'-exon. The reporter gene is a gene encoding chloramphenicol acetyl transferase, Renila luciferase, red fluorescence protein, green fluorescence protein, secreted placental alkaline phosphatase, or Herpes simplex virus-thymidine kinase.

Abstract translation: 目的：提供特异性识别单核苷酸突变转录物的转录组I，以特异性地治疗和诊断表达突变转录物的癌细胞。 构成：转录组I核酶靶向并特异性识别Kra G12V RNA。 核酶具有“GCAGCU”或“GACAGC”作为内部核苷酸序列。 核酶是序列号为25的AS100KRib1，序列号26的AS300KRib1，序列号27的AS100KRib2，序列号28的AS300KRib2。转录组I核酶在3'-外显子中含有报道基因。 报告基因是编码氯霉素乙酰转移酶，Renila萤光素酶，红色荧光蛋白，绿色荧光蛋白，分泌型胎盘碱性磷酸酶或单纯疱疹病毒 - 胸苷激酶的基因。

公开(公告)号：KR101034811B1

公开(公告)日：2011-05-16

申请号：KR1020080082732

申请日：2008-08-25

Applicant: 단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  송민선 ,  김인후 ,  정진숙

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/09

CPC classification number: C12N15/1135 ,  A61K38/00 ,  C12N15/86 ,  C12N2310/124 ,  C12N2710/10343 ,  C12N2830/008 ,  C12N2840/445

Abstract: 본 발명은 조직 특이적 프로모터와 암 특이 유전자를 타겟팅하는 트랜스-스플라이싱 라이보자임을 포함하는 재조합 아데노바이러스 및 이의 용도에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 (1) 조직 특이적 프로모터; (2) 상기 프로모터와 작동 가능하게 연결된 암 특이 유전자에 작용하는 트랜스-스플라이싱 라이보자임 ; 및 (3) 상기 라이보자임의 3' 엑손에 연결된 치료 유전자 또는 리포터 유전자를 포함하는 재조합 아데노바이러스, 이를 포함하는 항암용 약학 조성물 및 암 진단용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 재조합 아데노바이러스는 유전자 타겟 조직에 대한 높은 특이성 및 현저하게 개선된 치료 효능을 갖는다. 따라서, 유전자 치료 효능이 우수한 본 발명의 재조합 아데노바이러스는 유전자 전달 벡터로서 항암제 또는 암 진단제로 유용하게 사용될 수 있다.
아데노바이러스, 조직 특이적 프로모터, 트랜스-스플라이싱 라이보자임

公开(公告)号：KR1020150021839A

公开(公告)日：2015-03-03

申请号：KR1020130099276

申请日：2013-08-21

Applicant: 단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  임지영 ,  정진숙 ,  김성진

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/12 ,  A61P35/00

CPC classification number: C12N15/861

Abstract: The present invention provides a recombination adenovirus including regulated derivatives of tumor-targeting trans-splicing ribozyme and a purpose thereof. The present invention includes a promotor and a ribozyme-purpose gene expression cassette. The expression cassette connects splicing donor/splicing acceptor sequence (SD/SA sequence) to the 5′ end of the ribozyme-purpose gene expression cassette and Woodchuck hepatitis virus posttranscriptional regulatory element (WPRE) to the 3′ end.

Abstract translation: 本发明提供了包含肿瘤靶向转录核酶的调节衍生物的重组腺病毒及其目的。 本发明包括启动子和核酶目的基因表达盒。 表达盒将剪接供体/剪接受体序列（SD / SA序列）连接到3'端的核酶基因表达盒和Woodchuck肝炎病毒转录调控元件（WPRE）的5'末端。

公开(公告)号：KR1020120132594A

公开(公告)日：2012-12-06

申请号：KR1020110050324

申请日：2011-05-26

Applicant: 단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  정진숙 ,  김주현 ,  원유섭

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  A61K48/00

Abstract: PURPOSE: A cancer-specific gene therapeutic agent using microRNA is provided to regulate expression of an expression vector during post-transcription and to reduce side effects. CONSTITUTION: An expression vector contains a promoter, a trans-splicing ribozyme coding DNA which is operatively linked with the promoter and acts in a cancer-specific gene; and a microRNA target sequence coding DNA. The expression vector additionally contains a therapeutic gene or reporter gene. The cancer-specific gene is hTERT(human telomerase reverse transcriptase). The ribozyme is trans-splicing group I intron ribozyme which specifically targets hTERT mRNA. The reporter gene is firefly luciferase gene or renillar luciferase. The promoter is a promoter of PEPCK(phosphoenolpyruvate carboxykinase) gene. The expression vector contains a base sequence selected from sequence numbers 4-9. A pharmaceutical composition for anti-cancer contains the expression vector as an active ingredient.

Abstract translation: 目的：提供使用microRNA的癌症特异性基因治疗剂，以调节转录后表达载体的表达并减少副作用。 构成：表达载体含有启动子，编码转录核糖核酸酶的DNA，其与启动子可操作地连接并作用于癌症特异性基因; 和编码DNA的microRNA靶序列。 表达载体另外含有治疗基因或报告基因。 癌症特异性基因是hTERT（人端粒酶逆转录酶）。 核酶是特异性靶向hTERT mRNA的转录组I内含子核酶。 报告基因是萤火虫荧光素酶基因或肾脏荧光素酶。 启动子是PEPCK（磷酸烯醇丙酮酸羧激酶）基因的启动子。 表达载体含有选自序列号4-9的碱基序列。 用于抗癌的药物组合物含有表达载体作为活性成分。

公开(公告)号：KR101153845B1

公开(公告)日：2012-07-09

申请号：KR1020080110937

申请日：2008-11-10

Applicant: 단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  김성진 ,  김주현 ,  정진숙

IPC: C12N15/11 ,  C12N5/10 ,  C12P19/34

Abstract: 본 발명은 단 염기 변이 전사체를 특이적으로 인지할 수 있는 트랜스-스플라이싱 그룹 I 리보자임에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 Kras 유전자의 12번째 코돈의 단 염기 변이 Ras RNA를 특이적으로 인식하여 치환할 수 있는 트랜스-스플라이싱 그룹 I 리보자임에 관한 것이다.
본 발명의 리보자임은 단 염기 변이된 유전자 전사체를 정상 유전자 전사체와 구별하여 특이적으로 인식하므로, 이러한 리보자임을 이용하여 돌연변이 전사체를 발현하는 암세포를 특이적으로 치료 및 진단이 가능하다.
단 염기 변이, 트랜스-스플라이싱 그룹 I 리보자임, Kras 유전자

公开(公告)号：KR101712247B1

公开(公告)日：2017-03-06

申请号：KR1020140185976

申请日：2014-12-22

Applicant: 단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  김주현 ,  정진숙 ,  한상영

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  A61K31/713

CPC classification number: C12N15/113 ,  A61K31/713 ,  A61K38/00 ,  A61K38/43 ,  A61K48/0058 ,  A61K48/0066 ,  C07K14/4705 ,  C07K2319/01 ,  C07K2319/33 ,  C07K2319/61 ,  C12N9/22 ,  C12N15/1135 ,  C12N15/63 ,  C12N15/79 ,  C12N15/85 ,  C12N15/86 ,  C12N2310/113 ,  C12N2310/12 ,  C12N2310/124 ,  C12N2310/128 ,  C12N2330/51 ,  C12N2710/10343 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/42 ,  C12N2830/48

Abstract: 본발명은 (i) 조직특이적프로모터; 및 (ii) 암특이적유전자를표적으로하는트랜스-스플라이싱라이보자임및 상기라이보자임의 3' 엑손에연결된목적유전자를포함하는, 라이보자임-목적유전자발현카세트를포함하며, 상기발현카세트는라이보자임-목적유전자발현카세트의 5' 말단에스플라이싱공여/스플라이싱수여서열(splicing donor/splicing acceptor sequence, SD/SA sequence)이연결되고, 3' 말단에 WPRE(Woodchuck hepatitis virus Posttranscriptional Regulatory Element)가연결된것으로, (ⅲ) 상기 WPRE의 3' 말단에마이크로 RNA-122a(microRNA-122a, miR-122a)를인식하는핵산서열이추가로연결된것을특징으로하는, 재조합벡터, 상기재조합벡터가도입된형질전환세포, 상기재조합벡터로부터발현된라이보자임, 상기재조합벡터또는라이보자임을포함하는간암예방또는치료용약학조성물및 상기조성물을이용한간암치료방법에관한것이다.

Abstract translation: 本发明涉及重组载体，引入重组载体的转化细胞，从重组载体表达的核酶，用于预防或治疗肝癌并包括重组载体或核酶的药物组合物，以及用于 使用所述组合物治疗肝癌。 重组载体的特征在于包含：（i）组织特异性启动子; 和（ii）核酶靶基因表达盒，其包括靶向肿瘤靶向基因的转拼核酶和与核酶的3'外显子连接的靶基因，其中剪接供体/剪接受体序列（SD / SA 序列）连接到核酶靶基因表达盒的5'末端，并且土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件（WPRE）连接到3'末端。 另外，（iii）将识别microRNA-122（miR-122a）的核酸序列进一步添加到WPRE的3'末端。

公开(公告)号：KR1020160038674A

公开(公告)日：2016-04-07

申请号：KR1020140185976

申请日：2014-12-22

Applicant: 단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  김주현 ,  정진숙 ,  한상영

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  A61K31/713

CPC classification number: C12N15/113 ,  A61K31/713 ,  A61K38/00 ,  A61K38/43 ,  A61K48/0058 ,  A61K48/0066 ,  C07K14/4705 ,  C07K2319/01 ,  C07K2319/33 ,  C07K2319/61 ,  C12N9/22 ,  C12N15/1135 ,  C12N15/63 ,  C12N15/79 ,  C12N15/85 ,  C12N15/86 ,  C12N2310/113 ,  C12N2310/12 ,  C12N2310/124 ,  C12N2310/128 ,  C12N2330/51 ,  C12N2710/10343 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/42 ,  C12N2830/48

Abstract: 본발명은 (i) 조직특이적프로모터; 및 (ii) 암특이적유전자를표적으로하는트랜스-스플라이싱라이보자임및 상기라이보자임의 3' 엑손에연결된목적유전자를포함하는, 라이보자임-목적유전자발현카세트를포함하며, 상기발현카세트는라이보자임-목적유전자발현카세트의 5' 말단에스플라이싱공여/스플라이싱수여서열(splicing donor/splicing acceptor sequence, SD/SA sequence)이연결되고, 3' 말단에 WPRE(Woodchuck hepatitis virus Posttranscriptional Regulatory Element)가연결된것으로, (ⅲ) 상기 WPRE의 3' 말단에마이크로 RNA-122a(microRNA-122a, miR-122a)를인식하는핵산서열이추가로연결된것을특징으로하는, 재조합벡터, 상기재조합벡터가도입된형질전환세포, 상기재조합벡터로부터발현된라이보자임, 상기재조합벡터또는라이보자임을포함하는간암예방또는치료용약학조성물및 상기조성물을이용한간암치료방법에관한것이다.

Abstract translation: 本发明涉及重组载体，引入重组载体的转化细胞，从重组载体表达的核酶，用于预防或治疗肝癌并包括重组载体或核酶的药物组合物，以及用于 使用所述组合物治疗肝癌。 重组载体的特征在于包含：（i）组织特异性启动子; 和（ii）核酶靶基因表达盒，其包括靶向肿瘤靶向基因的转拼核酶和与核酶的3'外显子连接的靶基因，其中剪接供体/剪接受体序列（SD / SA 序列）连接到核酶靶基因表达盒的5'末端，并且土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件（WPRE）连接到3'末端。 另外，（iii）将识别microRNA-122（miR-122a）的核酸序列进一步添加到WPRE的3'末端。

公开(公告)号：KR101478869B1

公开(公告)日：2015-01-06

申请号：KR1020110050324

申请日：2011-05-26

Applicant: 단국대학교 산학협력단

Inventor： 이성욱 ,  정진숙 ,  김주현 ,  원유섭

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  A61K48/00

Abstract: 본 발명은 마이크로 RNA를 이용하여 발현벡터의 발현을 전사 후 과정에서 조절함으로써 암 특이적인 항암효과 및 진단 효과를 갖는 유전자 치료제에 관한 것이다. 본 발명을 이용하면, 암세포에서 발현되지 않는 특정 마이크로RNA에 대한 표적 서열을 라이보자임의 3' UTR 부위에 반복적으로 포함시킴으로써 발현벡터의 발현이 전사 후 과정에서 조절되도록 하여, 정상세포에서 세포 독성이 나타나는 부작용을 현저하게 감소시키고 종래 기술들에 비하여 암 특이성을 더욱 보강할 수 있으며, 암 세포 특이적으로 치료 유전자를 도입함으로써 암 치료 효능도 우수한 장점이 있다. 또한, 암 특이적으로 암 진행 여부를 진단할 수 있는 진단제 및 생체내 영상화제로 이용할 수도 있다.