Closed-system multi-stage nucleic acid amplification reactions
    1.
    发明专利
    Closed-system multi-stage nucleic acid amplification reactions 有权
    封闭系统多级核酸放大反应

    公开(公告)号:JP2014064591A

    公开(公告)日:2014-04-17

    申请号:JP2014002146

    申请日:2014-01-09

    Abstract: PROBLEM TO BE SOLVED: To provide systems, methods, and an apparatus for closed multi-stage nucleic acid amplification reactions wherein a portion of a prior-stage reaction mixture serves as the sample for the next stage reaction.SOLUTION: The invention is directed to systems, methods and an apparatus for carrying out multi-stage amplification reactions, especially under fluidly closed conditions. In one aspect, the methods of the invention are carried out in a fluidly closed reaction system that permits the isolation of a portion of a first (or prior) reaction mixture and its use as a sample or specimen in a second (or subsequent) reaction mixture, thereby substantially avoiding interfering effects that first reaction components may have in the second reaction if both reaction mixtures were simply combined together. In the aspect, the systems, methods, and apparatus of the invention may be used with any amplification reaction that permits multiple stages of amplification based on the use of nested primers.

    Abstract translation: 要解决的问题:提供用于闭合多级核酸扩增反应的系统,方法和装置,其中一部分前期反应混合物用作下一阶段反应的样品。解决方案:本发明涉及 系统,方法和用于进行多级扩增反应的装置,特别是在流体封闭的条件下。 在一个方面,本发明的方法在流体封闭的反应体系中进行,其允许分离第一(或先前)反应混合物的一部分,并且其在第二次(或随后的)反应中作为样品或样品的用途 从而基本上避免了如果两个反应混合物简单地组合在一起,第一反应组分可能在第二反应中可能具有干扰效应。 在这方面,本发明的系统,方法和装置可以与基于嵌套引物的使用允许多个扩增阶段的任何扩增反应一起使用。

    Closed-system multistage nucleic acid amplification reaction
    3.
    发明专利
    Closed-system multistage nucleic acid amplification reaction 有权
    封闭系统多级核酸放大反应

    公开(公告)号:JP2012055320A

    公开(公告)日:2012-03-22

    申请号:JP2011274877

    申请日:2011-12-15

    Abstract: PROBLEM TO BE SOLVED: To provide systems, methods, and apparatus for closed multistage nucleic acid amplification reactions wherein a part of a prior-stage reaction mixture serves as the sample for the next stage reaction.SOLUTION: There are provided systems, methods, and apparatus for carrying out multistage amplification reactions, especially under fluidly closed conditions. In one embodiment are carried out in a fluidly closed reaction system that permits the isolation of a part of a first (or prior) reaction mixture and its use as a sample or specimen in a second (or subsequent) reaction mixture, thereby substantially avoiding interfering effects that first reaction components may have in the second reaction if both reaction mixtures were simply combined together. In the above embodiment, the systems, the methods, and the apparatus may be used with any amplification reaction that permits multiple stages of amplification based on the use of nested primers.

    Abstract translation: 要解决的问题:提供封闭多级核酸扩增反应的系统,方法和装置,其中一部分前期反应混合物用作下一阶段反应的样品。 解决方案:提供用于进行多级扩增反应的系统,方法和装置,特别是在流体关闭的条件下。 在一个实施方案中,在流体封闭的反应体系中进行,其允许在第二(或后续)反应混合物中分离第一(或在先)反应混合物的一部分及其作为样品或样品的用途,从而基本避免干扰 如果两个反应混合物简单地组合在一起,第一反应组分可能在第二反应中具有影响。 在上述实施方案中,系统,方法和装置可以与允许基于嵌套引物的使用允许多个扩增阶段的任何扩增反应一起使用。 版权所有(C)2012,JPO&INPIT

    Reacciones de amplificación de ácido nucleico de múltiples estadios en sistema cerrado

    公开(公告)号:ES2502815T3

    公开(公告)日:2014-10-06

    申请号:ES05824763

    申请日:2005-10-27

    Applicant: CEPHEID

    Abstract: Un método para realizar una reacción de amplificación anidada, comprendiendo el método las etapas de: a) realizar una reacción de amplificación de primer estadio en una cámara de reacción de un sistema cerrado de forma fluida, comprendiendo la reacción de amplificación de primer estadio uno o más polinucleótidos diana de una muestra usando reactivos de amplificación de primer estadio en una primera mezcla de reacción para formar uno o más primeros amplicones, incluyendo los reactivos de amplificación de primer estadio cebadores iniciales para cada polinucleótido diana, en donde el o los primeros amplicones se amplifican en presencia de un indicador fluorescente capaz de generar una señal óptica relacionada con una cantidad de un amplicón en la reacción de amplificación de primer estadio; b) controlar la señal óptica del indicador fluorescente en la reacción de amplificación de primer estadio en la cámara de reacción; c) retener automáticamente una parte efectiva de la mezcla de reacción de la reacción de amplificación de primer estadio cuando la señal óptica alcanza o supera un nivel umbral; d) amplificar en la cámara de reacción el o los primeros amplicones en la parte efectiva usando reactivos de amplificación de segundo estadio en una segunda mezcla de reacción para formar uno o más segundos amplicones, incluyendo los reactivos de amplificación de segundo estadio al menos un cebador secundario para cada uno del o los primeros amplicones, de modo que cada cebador secundario esté anidado en dicho primer amplicón en relación con un cebador inicial de dicho primer amplicón; y e) detectar el o los segundos amplicones para determinar la presencia o ausencia del o los polinucleótidos diana en la muestra.

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