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公开(公告)号：CN119876298A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202510075277.9
申请日：2025-01-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种制备β‑环糊精的方法，具体涉及一种固定化连续催化生产β‑环糊精的方法。本发明基于固定化技术，同时通过优化催化条件如时间、温度和pH值，并在菌体生长阶段添加单氰胺，实现了在不灭菌的条件下，即可多批次的固定化连续催化生产β‑环糊精，并在连续反应过程中，保持了高酶活性和高产物转化率。实验结果表明，该方法在非灭菌条件下进行多批次固定化催化时，酶活性和产物转化率均表现出良好的稳定性和可重复性。相比传统方法，本发明不仅简化了操作步骤，降低了生产成本，同时提高了生产效率和产品质量，具有广泛的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN119639640A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411724504.8
申请日：2024-11-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种表面展示普鲁兰酶的重组菌及其构建方法与应用。以枯草芽孢杆菌为底盘菌株，利用淀粉样纤维蛋白tasA或分选酶锚定普鲁兰酶，构建得到了一种表面展示普鲁兰酶的重组菌。利用该重组菌株在连续发酵、连续催化生产普鲁兰酶中，无需提取和纯化胞外普鲁兰酶，无需再利用物理或者化学方法进行酶固定化，大幅度减少了多步操作过程中带来的酶活损失，并且该方法结合生物膜连续化发酵的优点使得表面展示酶活复苏，不会像传统固定化方式酶活越来越低。带来高收益，低成本，节约资源，减少环境污染等优点，该方法也为以后普鲁兰酶的催化提供新思路。
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公开(公告)号：CN117625700A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202311636775.3
申请日：2023-12-01
Applicant: 南京高新工大生物技术研究院有限公司 , 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种固定化大肠杆菌发酵产有机酸的方法及其应用。将大肠杆菌的种子液接种于含有固定化载体和种子培养基的固定化反应器中进行种子固定化培养使得大肠杆菌菌种固定于固定化载体上，再进行单批次固定化补料发酵，最后进行间歇式固定化补料发酵生产有机酸。本发明基于流体力学模拟分析对固定化反应器的设计进行优化，获得了传质、传氧效果较佳的固定化反应器，并通过对发酵过程中的发酵参数进行调控，获得了最佳的产有机酸浓度和高转化率，相对于游离发酵转化率提高大于3个百分点。本发明显著促进了基于固定化的间歇式补料发酵的稳定性，与固定化发酵工艺适配性高，同时节约了葡萄糖用量，经济效益显著，具有广阔的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN116622605A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202310468440.9
申请日：2023-04-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用。本发明利用CRISPR/cas9技术，先构建出了敲除产孢膜丝氨酸蛋白酶htrC和碱性丝氨酸蛋白酶aprX的出发菌株B.S168△2，再以出发菌株B.S168△2为基础，构建出了八种敲除胞外蛋白酶基因的底盘细胞B.S168△3、B.S168△4、B.S168△5、B.S168△6、B.S168△7、B.S168△8、B.S168△9和B.S168△10，并进一步筛选出了无抗性残留，转化效率高、几乎无胞外蛋白酶且不会影响胞外目的蛋白积累的底盘细胞B.S168△8、B.S168△9和B.S168△10，随后在此基础上又筛选出了最适合分泌表达普鲁兰酶的底盘菌株B.S168△9，构建出的重组菌株B.S168△9amyX相比于原始菌株B.S168的酶活有显著提升。
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公开(公告)号：CN116286583A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310523928.7
申请日：2023-05-10
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种能高效分解单氰胺和氧化亚磷酸盐的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用，所述重组枯草芽孢杆菌在枯草芽孢杆菌中表达氰胺水合酶和亚磷酸盐脱氢酶。本发明所提供的重组枯草芽孢杆菌能分解单氰胺产生尿素作为氮源，分解氧化亚磷酸盐成为磷酸盐作为磷源，改变氮源和磷源的来源途径，使其在特定的MOPS培养基中能正常生长，而不同时具有这两条代谢途径的杂菌微生物就会由于缺乏氮源或磷源营养物质的来源而被“饿死”，从而使重组枯草芽孢杆菌成为特定培养基的优势菌，杂菌就不能生长繁殖。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114908030A
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202210511506.3
申请日：2022-05-11
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种在枯草芽孢杆菌表面展示β‑环糊精葡萄糖基转移酶的重组菌及其应用。本发明首次以枯草芽孢杆菌的表面疏水蛋白bslA为锚定蛋白，将环糊精葡萄糖基转移酶展示到枯草芽孢杆菌细胞表面，通过基因工程手段将环糊精葡萄糖基转移酶基因片段与表面疏水蛋白bslA编码基因融合，利用枯草芽孢杆菌整合型质粒pBE2R作为载体，转化到枯草芽孢杆菌中，从而得到一种可以在细胞表面展示环糊精葡萄糖基转移酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌。本发明所涉及的枯草芽孢杆菌工程菌表达体系具有表达稳定、产酶量高的特点，并且作为生物安全菌株，在食品和医药领域具有优势。
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公开(公告)号：CN114606171A
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202210300902.1
申请日：2022-03-24
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株敲除bluR基因的重组大肠杆菌及其构建方法与应用，本发明通过敲除bluR基因，解除了蓝光对大肠杆菌生物膜形成的抑制，同时对菌株的生长能力、发酵能力没有产生影响，并将蓝光影响生物膜形成相关基因进行验证。探究其在生物膜形成中的应用，为后续光遗传学工具的利用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112592877B
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN202011519849.1
申请日：2020-12-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株过表达lsrC基因的重组大肠杆菌及其构建方法与应用；所述的重组大肠杆菌过表达lsrC基因。本发明通过过表达lsrC基因增加了大肠杆菌菌群的聚集效果，加强了生物膜的形成，通过生物膜的表征实验以及固定化发酵实验证实了lsrC基因的过表达促进了菌群之间的相互作用，加强了生物膜的形成，缩短了发酵周期，提高了L‑苏氨酸的产量和合成效率。
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公开(公告)号：CN110106095B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201910271574.5
申请日：2019-04-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株钙离子通道CchA基因失活的黑曲霉基因工程菌及其构建方法与应用，它是敲除钙离子通道CchA基因的黑曲霉菌。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法。进一步公开了基因工程菌在生产柠檬酸中的应用。本发明通过构建基因敲除钙离子通道CchA基因的黑曲霉基因工程菌，使黑曲霉在固定化发酵生产柠檬酸过程中生物膜产量降低并且疏水性降低，减轻了载体的抱团现象，提高了柠檬酸产量和糖转化效率，适宜于工业生产。
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公开(公告)号：CN119979430A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510094259.5
申请日：2025-01-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种细菌纤维素生产菌株及其构建方法与发酵产细菌纤维素的应用，在木糖醋杆菌中过表达木糖代谢途径关键基因xylA。本发明通过将木糖代谢途径中的关键基因在木糖醋杆菌中进行过表达以此提高木糖醋杆菌的细菌纤维素产量及木糖利用量，得到的木糖醋杆菌基因工程菌的细菌纤维素产量最高可达10.3g/L，与原始菌株相比提高了71.7％，以纯木糖为底物进行发酵时，木糖消耗量最高可达11.61g/L。
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