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公开(公告)号：CN109825489B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201910249596.1
申请日：2019-03-29
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的β‑淀粉酶及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的β‑淀粉酶具有高分泌能力，将携带本发明β‑淀粉酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h，可使发酵上清液中的β‑淀粉酶酶活高达434.65U/mL，将携带本发明β‑淀粉酶的大肠杆菌在3L发酵罐中诱导培养30h，可使发酵上清液中的β‑淀粉酶酶活高达13063.8U/mL，因此，本发明的β‑淀粉酶适用于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN107043796B
公开(公告)日：2018-11-09
申请号：CN201710352677.5
申请日：2017-05-18
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种制备麦芽糖浆的方法，属于淀粉糖转化技术领域。本发明以淀粉为底物，采用高温淀粉普鲁兰酶进行同步液化与脱支反应，然后分步或同时加入耐热β‑淀粉酶和耐热麦芽糖淀粉酶进行糖化，经过脱色、浓缩，即可获得麦芽糖浆。本工艺底物浓度高、不易污染杂菌、工艺简单，可减少淀粉制糖后期的糖液蒸发能耗，简化提取工序，有利于提高麦芽糖浆的生产效率。
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公开(公告)号：CN107043796A
公开(公告)日：2017-08-15
申请号：CN201710352677.5
申请日：2017-05-18
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12P19/22 , C12N9/2457 , C12N15/70 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12P19/16 , C12Y302/01041 , C13K7/00
Abstract: 本发明涉及一种制备麦芽糖浆的方法，属于淀粉糖转化技术领域。本发明以淀粉为底物，采用高温淀粉普鲁兰酶进行同步液化与脱支反应，然后分步或同时加入耐热β‑淀粉酶和耐热麦芽糖淀粉酶进行糖化，经过脱色、浓缩，即可获得麦芽糖浆。本工艺底物浓度高、不易污染杂菌、工艺简单，可减少淀粉制糖后期的糖液蒸发能耗，简化提取工序，有利于提高麦芽糖浆的生产效率。
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公开(公告)号：CN110184258B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201910501002.1
申请日：2019-06-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率较野生型有了明显的改善，其中，F513Y在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的81.96％，在40℃下的半衰期可达78h，Kcat/Km可达962.91s‑1·mg‑1·mL，分别为野生型的2.2倍、2.6倍和1.8倍；507‑13在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的84.60％，在40℃下的半衰期可达65h，Kcat/Km可达639.37s‑1·mg‑1·mL，分别为野生型的2.3倍、2.2倍和1.2倍；507‑11的Kcat/Km可达617.85s‑1·mg‑1·mL，是野生型的1.2倍。
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公开(公告)号：CN110184258A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910501002.1
申请日：2019-06-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率较野生型有了明显的改善，其中，F513Y在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的81.96％，在40℃下的半衰期可达78h，Kcat/Km可达962.91s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.2倍、2.6倍和1.8倍；507-13在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的84.60％，在40℃下的半衰期可达65h，Kcat/Km可达639.37s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.3倍、2.2倍和1.2倍；507-11的Kcat/Km可达617.85s-1·mg-1·mL，是野生型的1.2倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108998431A
公开(公告)日：2018-12-14
申请号：CN201810825284.6
申请日：2018-07-25
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高4-α-糖基转移酶可溶性表达水平的方法，属于发酵工程技术领域。本发明的方法从4-α-糖基转移酶的发酵生产工艺入手，通过在4-α-糖基转移酶生产菌株的发酵培养基中添加一定量的氧化三甲胺和/或脯氨酸，以提高其对4-α-糖基转移酶的表达水平；采用本发明的方法发酵48h，可成功将细胞破碎上清液中的4-α-糖基转移酶酶活提高至1302.6U/mL；且本发明的方法具有工艺简单易行，适合工业化生产的优点。
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公开(公告)号：CN109628433B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201910004470.8
申请日：2019-01-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N9/44 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N15/75 , C12N15/81 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/16 , C12R1/19 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶胞外分泌能力高，将携带本发明普鲁兰酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h，可使发酵液中的总酶活力达212.0U·mL‑1，其中，胞外酶活达200.5U·mL‑1，占了总酶活力的94.5％，因此，本发明的普鲁兰酶容易发酵制备，可以显著降低发酵工艺控制难度及成本；本发明的普鲁兰酶作用条件温和，能够在温度40～60℃，pH 6.0～7.5的条件下水解淀粉中的α‑1,6‑葡萄糖苷键，因此，本发明的普鲁兰酶在工业转化中能够降低成本，在食品、淀粉糖等行业中具有潜在利用价值。
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公开(公告)号：CN108998431B
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201810825284.6
申请日：2018-07-25
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高4‑α‑糖基转移酶可溶性表达水平的方法，属于发酵工程技术领域。本发明的方法从4‑α‑糖基转移酶的发酵生产工艺入手，通过在4‑α‑糖基转移酶生产菌株的发酵培养基中添加一定量的氧化三甲胺和/或脯氨酸，以提高其对4‑α‑糖基转移酶的表达水平；采用本发明的方法发酵48h，可成功将细胞破碎上清液中的4‑α‑糖基转移酶酶活提高至1302.6U/mL；且本发明的方法具有工艺简单易行，适合工业化生产的优点。
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公开(公告)号：CN109628433A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201910004470.8
申请日：2019-01-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N9/44 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N15/75 , C12N15/81 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/16 , C12R1/19 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶胞外分泌能力高，将携带本发明普鲁兰酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h，可使发酵液中的总酶活力达212.0U·mL‑1，其中，胞外酶活达200.5U·mL‑1，占了总酶活力的94.5％，因此，本发明的普鲁兰酶容易发酵制备，可以显著降低发酵工艺控制难度及成本；本发明的普鲁兰酶作用条件温和，能够在温度40～60℃，pH 6.0～7.5的条件下水解淀粉中的α‑1,6‑葡萄糖苷键，因此，本发明的普鲁兰酶在工业转化中能够降低成本，在食品、淀粉糖等行业中具有潜在利用价值。
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公开(公告)号：CN108865962B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201810745221.X
申请日：2018-07-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种可高效可溶性表达4‑α‑糖基转移酶的大肠杆菌工程菌，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的工程菌以pETduet‑1载体或pET24a(+)载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)菌株为表达宿主菌株，同时表达来源于嗜热高温球菌(Thermococcus litoralis)的4‑α‑糖基转移酶以及分子伴侣蛋白GroES‑GroEL；将本发明的工程菌发酵培养24h，得到的发酵液中的酶活可高达82.2U/mL。
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