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公开(公告)号:CN104774932A
公开(公告)日:2015-07-15
申请号:CN201510133034.2
申请日:2015-03-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种用于判定大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药水平的引物、探针和分子检测试剂盒。本发明的试剂盒可快速、敏感、准确判断大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药水平,特异性扩增大肠杆菌的核酸,而不扩增其它细菌、病毒、寄生虫、植物、动物等的核酸,并且可应用于多种组织器官与物种来源的临床样本,无需细菌分离纯化,本发明能够为疾病的及时治疗及合理用药提供参考,为耐药机制的研究提供技术支持。
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公开(公告)号:CN103642930B
公开(公告)日:2015-02-18
申请号:CN201310711918.2
申请日:2013-12-20
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种用于哺乳动物核酸样品质量控制的引物、探针及分子检测方法。所述的引物和探针如SEQ ID NO.1-4所示。所述分子检测方法是用上述引物和探针对核酸样品进行PCR扩增,根据PCR过程中荧光强度的变化,以及PCR扩增产物在琼脂糖凝胶电泳的条带,对核酸样品进行定量或/和分型。使用本发明可以方便、有效地监控在样品采集、运输、保存、提取等任何环节出现的潜在问题,为提高PCR的可信度、降低其假阴性报告率等提供技术支持。
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公开(公告)号:CN104313191A
公开(公告)日:2015-01-28
申请号:CN201410655921.1
申请日:2014-11-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/68 , C12Q1/70 , C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2600/112 , C12Q2537/143 , C12Q2561/113 , C12Q2561/101 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明提供了一种一步法反转录PCR检测和分型埃博拉病毒5种亚型的引物、探针及试剂盒,引物和探针的核苷酸序列如图1-图8,试剂盒包括样品DNA模板或者定量标准试剂、PCR缓冲液、FRET-上游引物、FRET-下游引物、的6-FAM探针、LCRed640探针、商业化Taq酶、dNTP、商业化反转录酶、商业化RNA酶抑制剂。本发明依据埃博拉病毒5种亚型中保守区间巧妙地设计1条上游引物、1对探针和5条针对五种埃博拉病毒亚型的下游引物,从而可以同时检测5种亚型的埃博拉病毒。
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公开(公告)号:CN104212905A
公开(公告)日:2014-12-17
申请号:CN201410476184.9
申请日:2014-09-18
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/6893 , C12Q1/6858 , C12Q2600/178 , C12Q2531/113 , C12Q2561/113
Abstract: 一种检测所有泰勒虫的引物、探针及试剂盒和扩增体系,该引物、探针由FRET-PCR引物、探针组成,序列如下:FRET-上游引物:5’-TAGTGACAAGAAATAACAATACGGGGCTT-3’FRET-下游引物:5’-CAGCAGAAATTCAACTACGAGCTTTTTAACT-3’6-FAM探针:5’-CCAATTGATACTCTGGAAGAGGTTT-6-FAM-3’LCRed640探针:5’-LCRed640-AATTCCCATCATTCCAATTACAAGAC-磷酸-3’。能够灵敏、特异、快速地检测所有泰勒虫的实时定量PCR,同时确保不扩增其它非泰勒虫的病原微生物。
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公开(公告)号:CN103820571A
公开(公告)日:2014-05-28
申请号:CN201310727102.9
申请日:2013-12-25
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明涉及一种用于甲型流感病毒一步反转录定量PCR检测方法的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ?ID?NO.1和2所示,所述探针为SEQ?ID?NO.3和4。采用上述引物和探针可通过一步法FRET-PCR技术对甲型流感病毒进行检测。多数现有的检测流感病毒的技术为二步法,包括以随机引物介导的反转录(第一步)和随后的PCR(第二步)。此法使用随机引物,会产生大量的背景核酸,降低反转录效率,同时产生的背景核酸会降低PCR的效率。一步法基于特异引物的反转录系统,效率高,易操作,减少污染机会,从而极大提高了PCR的扩增效率。
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公开(公告)号:CN103060468A
公开(公告)日:2013-04-24
申请号:CN201310034376.X
申请日:2013-01-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种埃里希氏菌的荧光定量PCR检测和分型的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQIDNO.1和2所示,所述探针为SEQIDNO.3和4。用上述引物和探针PCR扩增待测菌,扩增出210bp条带,且荧光检测在640nm波长增强的为埃里希氏菌阳性样本;再根据熔解温度可对埃里希氏菌进行分型。本发明的技术优势明显,具有很高的特异性和敏感,且可以方便的检测所有种的埃里希氏菌,可广泛的用于人和各种动物(牛、狗、羊)和人的埃里希氏菌病的确诊和治疗判定,将会产生很好的经济效益。
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公开(公告)号:CN104328222B
公开(公告)日:2015-11-25
申请号:CN201410655886.3
申请日:2014-11-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种反转录PCR检测和分型登革病毒的试剂盒及其检测方法,反转录PCR检测和分型登革病毒的试剂盒包括引物、探针和FRET-PCR标准品,其特征在于:所述引物为上游引物和下游引物;所述探针为6-FAM探针和Cy5探针;所述上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列;所述6-FAM探针具有SEQ ID No.2的核苷酸序列;所述Cy5探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列;所述下游引物具有SEQ ID No.4的核苷酸序列。本发明操作便捷,适合于检测大量样本,可以快速,高度灵敏、特异、快速检测的并分型所有登革病毒的血清型。
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公开(公告)号:CN104328222A
公开(公告)日:2015-02-04
申请号:CN201410655886.3
申请日:2014-11-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/68 , C12Q1/70 , Y02A50/53 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种反转录PCR检测和分型登革病毒的试剂盒及其检测方法,反转录PCR检测和分型登革病毒的试剂盒包括引物、探针和FRET-PCR标准品,其特征在于:所述引物为上游引物和下游引物;所述探针为6-FAM探针和Cy5探针;所述上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列;所述6-FAM探针具有SEQ ID No.2的核苷酸序列;所述Cy5探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列;所述下游引物具有SEQ ID No.4的核苷酸序列。本发明操作便捷,适合于检测大量样本,可以快速,高度灵敏、特异、快速检测的并分型所有登革病毒的血清型。
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公开(公告)号:CN103789442A
公开(公告)日:2014-05-14
申请号:CN201410061800.4
申请日:2014-02-24
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12Q1/6848 , C12Q2527/107 , C12Q2563/107 , C12Q2531/113 , C12Q2549/119
Abstract: 本发明涉及一种实时FRET-PCR和巢式PCR检测和分型立克次氏体的引物、探针及试剂盒。所述引物、探针如序列1-8所示。本发明设计FRET-PCR的引物和探针,可以特异地扩增所有立克次氏体种属的核酸,从而快速的判断出阳性样品;然后选择相同基因的其他保守区间设计巢式PCR的2对引物,并通过巢式PCR、琼脂糖凝胶电泳和测序确定相应阳性样品的立克次氏体种属。因此,此系统不仅能快速、特异的检测到所有种属的立克次氏体,而且能确定其种属。
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公开(公告)号:CN103103286A
公开(公告)日:2013-05-15
申请号:CN201310068863.8
申请日:2013-03-05
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种巴贝斯虫的荧光定量PCR检测和分型的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQIDNO.1、2和3所示,所述探针为SEQIDNO.4和5。用上述引物和探针PCR扩增待测菌,扩增出290bp条带,且荧光检测在640nm波长增强的为埃里希氏菌阳性样本;再根据熔解温度可对巴贝斯虫进行分型。本发明的技术优势明显,具有很高的特异性和敏感,且可以方便的检测重要种的巴贝斯虫。
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