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公开(公告)号：CN108998431A
公开(公告)日：2018-12-14
申请号：CN201810825284.6
申请日：2018-07-25
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高4-α-糖基转移酶可溶性表达水平的方法，属于发酵工程技术领域。本发明的方法从4-α-糖基转移酶的发酵生产工艺入手，通过在4-α-糖基转移酶生产菌株的发酵培养基中添加一定量的氧化三甲胺和/或脯氨酸，以提高其对4-α-糖基转移酶的表达水平；采用本发明的方法发酵48h，可成功将细胞破碎上清液中的4-α-糖基转移酶酶活提高至1302.6U/mL；且本发明的方法具有工艺简单易行，适合工业化生产的优点。
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公开(公告)号：CN107759556A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201711063603.6
申请日：2017-11-02
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07D311/62 , B01D11/02
CPC classification number: C07D311/62 , B01D11/0288
Abstract: 本发明公开了一种提取银杏叶原青花素的深共熔溶剂(DESs)及其制备方法和提取方法，该深共熔溶剂是由氯化胆碱和丙二酸按摩尔比1:1-2.5制备而成。本发明制备的深共熔溶剂为绿色溶剂，安全无污染，可重复利用，易生物降解，且制备工艺简单，成本低，具有蒸汽压低、不可燃、溶解性和导电性优良、电化学窗口稳定等性质；同时本发明制备的深共熔溶剂粘度小，氢键稳定，流动性好；采用本发明制备深共熔溶剂提取银杏叶原青花素的方法可以提高银杏叶中原青花素的提取率，减少提取时间，并且操作安全，对环境和人体不会产生危害。本发明深共熔溶剂的制备方法简单方便，原料来源广，成本低，生物可降解性高。
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公开(公告)号：CN115651922A
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN202210560601.2
申请日：2022-05-23
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑半乳糖苷酶突变体。属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明β‑半乳糖苷酶突变体的可溶性表达水平和热稳定性较野生型β‑半乳糖苷酶有了明显的提高。将携带编码本发明β‑半乳糖苷酶突变体lacZBf‑V181I、lacZBf‑I529Y和lacZBf‑V181I‑I529Y的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵36h，即可使胞内可溶部分酶活达9.06U·mL‑1、7.58U·mL‑1和7.30U·mL‑1，分别是野生型β‑半乳糖苷酶的1.5倍、1.25倍和1.2倍；β‑半乳糖苷酶突变体lacZBf‑V181I、lacZBf‑I529Y和lacZBf‑V181I‑I529Y在50℃下的半衰期是108h、72h、72h，分别是野生型β‑半乳糖苷酶的1.8倍、1.2倍、1.2倍。
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公开(公告)号：CN114875013A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210702442.5
申请日：2022-06-21
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种使用重组枯草芽孢杆菌分泌天然胞内β‑半乳糖苷酶的方法。属于基因工程以及微生物工程技术领域，本发明通过人工合成lacZBa基因、设计引物、PCR获得B.aryabhattai Gel‑09来源β‑半乳糖苷酶目的基因，构建重组质粒pCut‑lacZBa，并转化至枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600，得到重组枯草芽孢杆菌。以此枯草芽孢杆菌为菌种，发酵生产β‑半乳糖苷酶lacZBa。本发明以食品安全的枯草芽孢杆菌为表达宿主重组表达β‑半乳糖苷酶，产酶水平高，便于分离纯化，且发酵原料来源广泛，生产成本较低。
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公开(公告)号：CN108865962B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201810745221.X
申请日：2018-07-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种可高效可溶性表达4‑α‑糖基转移酶的大肠杆菌工程菌，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的工程菌以pETduet‑1载体或pET24a(+)载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)菌株为表达宿主菌株，同时表达来源于嗜热高温球菌(Thermococcus litoralis)的4‑α‑糖基转移酶以及分子伴侣蛋白GroES‑GroEL；将本发明的工程菌发酵培养24h，得到的发酵液中的酶活可高达82.2U/mL。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109825489A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910249596.1
申请日：2019-03-29
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的β-淀粉酶及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的β-淀粉酶具有高分泌能力，将携带本发明β-淀粉酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h，可使发酵上清液中的β-淀粉酶酶活高达434.65U/mL，将携带本发明β-淀粉酶的大肠杆菌在3L发酵罐中诱导培养30h，可使发酵上清液中的β-淀粉酶酶活高达13063.8U/mL，因此，本发明的β-淀粉酶适用于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN107760623B
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201711081504.0
申请日：2017-11-07
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N1/20 , C12N9/26 , A23L33/135 , A23K10/16 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一株产中性生淀粉酶的阿氏芽孢杆菌，属于生物工程技术领域。所述高产中性生淀粉酶的野生芽孢杆菌菌株筛选自广西木薯田浅层土壤。本发明所述菌株保藏在湖北省武汉市武汉大学中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC M 2017320。该菌株培养条件简便，发酵周期短,酶活力高；所产生淀粉酶为中温、中性酶，最适温度和最适pH分布为50℃和7.0，水解生淀粉能力强，产物以麦芽糖为主。在淀粉糖、发酵、食品和饲料等工业领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN108865962A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810745221.X
申请日：2018-07-09
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12N9/1048 , C12N15/70 , C12P19/04 , C12Y204/00
Abstract: 本发明公开了一种可高效可溶性表达4‑α‑糖基转移酶的大肠杆菌工程菌，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的工程菌以pETduet‑1载体或pET24a(+)载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)菌株为表达宿主菌株，同时表达来源于嗜热高温球菌(Thermococcus litoralis)的4‑α‑糖基转移酶以及分子伴侣蛋白GroES‑GroEL；将本发明的工程菌发酵培养24h，得到的发酵液中的酶活可高达82.2U/mL。
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公开(公告)号：CN109628433B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201910004470.8
申请日：2019-01-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N9/44 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N15/75 , C12N15/81 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/16 , C12R1/19 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶胞外分泌能力高，将携带本发明普鲁兰酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h，可使发酵液中的总酶活力达212.0U·mL‑1，其中，胞外酶活达200.5U·mL‑1，占了总酶活力的94.5％，因此，本发明的普鲁兰酶容易发酵制备，可以显著降低发酵工艺控制难度及成本；本发明的普鲁兰酶作用条件温和，能够在温度40～60℃，pH 6.0～7.5的条件下水解淀粉中的α‑1,6‑葡萄糖苷键，因此，本发明的普鲁兰酶在工业转化中能够降低成本，在食品、淀粉糖等行业中具有潜在利用价值。
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公开(公告)号：CN108998431B
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201810825284.6
申请日：2018-07-25
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高4‑α‑糖基转移酶可溶性表达水平的方法，属于发酵工程技术领域。本发明的方法从4‑α‑糖基转移酶的发酵生产工艺入手，通过在4‑α‑糖基转移酶生产菌株的发酵培养基中添加一定量的氧化三甲胺和/或脯氨酸，以提高其对4‑α‑糖基转移酶的表达水平；采用本发明的方法发酵48h，可成功将细胞破碎上清液中的4‑α‑糖基转移酶酶活提高至1302.6U/mL；且本发明的方法具有工艺简单易行，适合工业化生产的优点。
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