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公开(公告)号：CN105274132A
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201510810669.1
申请日：2015-11-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改造调控因子降低酵母尿素积累的方法，属于微生物遗传和分子生物学领域。本发明方法是对调控因子进行改造，具体是消除调控因子Gln3p或Gat1p的核定位调控序列并突变核定位序列上的磷酸化位点，然后将改造后的序列连接到表达载体并转化到酵母中进行表达。本发明通过对2个不同的酿酒酵母氮代谢物阻遏效应相关调控因子的改造，从根本上较少酿酒酵母发酵过程中尿素的积累，得到的基因工程菌的尿素积累量分别减少了37.4％和44.3％。
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公开(公告)号：CN105154378A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510440032.8
申请日：2015-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效分泌表达转肽酶Sortase A的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了利用诱导时添加甘氨酸的添加策略在重组大肠菌BL21(DE3)中胞外高效生产转肽酶Sortase A，解决了目前转肽酶Sortase A分泌效率低，发酵周期长的问题。本发明通过对目的蛋白载体以及发酵体系中添加剂和添加策略的优化，表明pET-22b载体是适合Sortase A胞外生产的载体，采取两阶段添加甘氨酸(阶段一：诱导时添加终浓度为0.5％的甘氨酸；阶段二：诱导后6小时添加2％的甘氨酸)可以极大地提高大肠杆菌胞外生产Sortase A的水平。该发明第一次实现了Sortase A在大肠杆菌中的胞外高效生产，为后续Sortase A的工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116064270B
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202210802864.X
申请日：2022-07-07
Applicant: 宜宾五粮液股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及同时产蛋白酶及多种风味物质的地衣芽孢杆菌菌株及用途。目前所报道的芽孢杆菌菌株功能较为单一，为进一步提升白酒风味，本发明提供了一株同时产蛋白酶及多种风味物质的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)菌株，保藏编号为CGMCC No.24905。该菌株能够同时产蛋白酶、2,5‑二甲基吡嗪、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪、苯乙醇，在白酒酿造中有利于原料中蛋白质的分解，以及白酒风味的改善。对于功能性酿造微生物资源的强化利用和传统制曲过程的创新具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117925872A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202410104821.3
申请日：2024-01-24
Applicant: 宜宾五粮液股份有限公司 , 江南大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及大曲微生物总RNA指纹图谱、构建方法及其应用。针对目前还未见基于宏转录组分析方法构建大曲微生物RNA指纹图谱的报道，本发明通过：a、大曲总RNA的提取；b、样品检测与质控；c、质控合格样品进行RNA打断、cDNA合成、末端修复、接头连接、文库检测；d、环化制备与测序；e、原始数据过滤，获得高质量数据；f、宏转录组Denovo组装；g、基因集功能注释；h、大曲微生物RNA指纹图谱分析等步骤获得大曲微生物总RNA指纹图谱，并将其应用于准确揭示大曲活性微生物功能及代谢途径。
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公开(公告)号：CN117487727A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311299446.4
申请日：2023-10-09
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/31 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12N15/52 , C12P33/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了利用大肠杆菌P450酶全细胞催化合成羟基化脱氧胆酸的方法及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过提高P450酶Olep的可溶性表达、改造血红素合成途径、氧化还原伴侣工程改造、全细胞催化体系的优化，增强了催化脱氧胆酸6β羟基化的能力，最终催化脱氧胆酸合成6β‑OH脱氧胆酸的转化率达到99.1％。该方法为提高羟基化甾体物质的生物合成提供了新的策略。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117187268A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311137487.3
申请日：2023-09-28
Abstract: 本发明公开了用于合成复杂香豆素的CYP450环化酶基因PpDC与PpOC及其应用。所述PpDC的CDS区核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述PpOC的CDS区核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明PpDC基因能够调控7‑去甲基软木花椒素环化合成线型吡喃香豆素和线型呋喃香豆素，PpOC基因能够调控王草酚环化合成角型吡喃香豆素和角型呋喃香豆素。本发明采用分子生物技术对PpDC基因和PpOC基因进行功能验证，对于了解复杂香豆素的化学多样性机制意义深重，同时能够为将来利用合成生物学方法生产复杂香豆素化合物以及用植物基因工程的方法调控白花前胡品质提供理论依据，具有广阔的应用前景和极大的经济价值。
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公开(公告)号：CN113186147B
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202110561197.6
申请日：2021-05-21
Applicant: 江南大学 , 江苏东汇生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种提高毕赤酵母工程菌生产猪肌红蛋白的发酵方法，属于生物工程技术领域。本发明是以产猪肌红蛋白毕赤酵母工程Pichia pastoris X33‑GAP‑Mb为出发菌株，在摇瓶水平进行培养基和培养条件的初步优化。以Pichia pastoris X33‑GAP‑Mb、Pichia pastorisX33‑G1‑Mb为出发菌株，在发酵罐水平进行发酵条件优化，发现DO为30％，血红素流加浓度为150mg/L时，可显著提升猪肌红蛋白的产量，达到285.42mg/L。本发明中猪肌红蛋白的生物制造具有污染少、产品质量高等优点，具有发展前景，这对于猪肌红蛋白的工业化生产具有重要的应用意义。
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公开(公告)号：CN116064270A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202210802864.X
申请日：2022-07-07
Applicant: 宜宾五粮液股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及同时产蛋白酶及多种风味物质的地衣芽孢杆菌菌株及用途。目前所报道的芽孢杆菌菌株功能较为单一，为进一步提升白酒风味，本发明提供了一株同时产蛋白酶及多种风味物质的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)菌株，保藏编号为CGMCC No.24905。该菌株能够同时产蛋白酶、2,5‑二甲基吡嗪、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪、苯乙醇，在白酒酿造中有利于原料中蛋白质的分解，以及白酒风味的改善。对于功能性酿造微生物资源的强化利用和传统制曲过程的创新具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113913351A
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN202111433036.5
申请日：2021-11-29
Applicant: 山西杏花村汾酒厂股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种清香型白酒酒醅中乳酸菌的筛选方法，属于白酒酿造技术领域。本发明方法包括：称取酒醅于含玻璃珠的灭菌后的PBS缓冲液中，室温下振荡，使样品与水充分混合。振荡结束后静置，取上清液稀释至不同梯度。然后吸取梯度稀释液均匀涂布于带溴甲酚绿指示剂的MRS培养基上培养，及时将变绿菌落标记出来，挑取变色菌落中形态不同的菌株在MRS培养基平板上划线纯化。得到单菌落后接种于MRS液体培养基中，培养一定时间后保藏备用。以上培养基均用稀盐酸调节pH至6.0，且加入两性霉素抑制真菌。该方法筛选出来的菌株针对性更强，增加了乳酸菌筛选的准确性，同时节省了人力物力的消耗。
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公开(公告)号：CN113549561A
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202110777292.X
申请日：2021-07-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了高效合成不同来源的血红或肌红蛋白的酿酒酵母菌株的构建及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通选取合适的表达载体、伴侣蛋白以及启动子，并对宿主进行改造，在酿酒酵母中实现了不同来源的血红蛋白或肌红蛋白的异源表达，保障了血红蛋白和肌红蛋白的安全性，并获得了血红蛋白或肌红蛋白的高效生产，解决了之前报道中表达宿主不是食品级宿主的安全隐患。在摇瓶水平，所得大豆血红蛋白产量至少可达120mg L‑1，三叶草血红蛋白产量至少可达20mg L‑1，猪肌红蛋白产量至少可达99mg L‑1，牛肌红蛋白产量至少可达89mg L‑1，猪血红蛋白产量至少可达20mg L‑1，牛血红蛋白产量至少可达23mg L‑1，该结果为血红/肌红蛋白在人造肉等食品加工领域的应用奠定了基础。
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