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公开(公告)号:CN104164363A
公开(公告)日:2014-11-26
申请号:CN201310180836.X
申请日:2013-05-16
Applicant: 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心 , 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
CPC classification number: B01L7/50 , B01L2200/147 , B01L2300/1805
Abstract: 本发明提出的便携式核酸恒温扩增仪是针对动物疫病的检测特点,在基于开源的Arduino硬件系统的基础上,使用可编程的恒温扩增技术,全面覆盖恒温检测方法,在实现检测功能的同时可以根据需要升级硬件和软件,对已有的恒温扩增技术进行校正并开发新的检测方法。本发明使用通用控制器Arduino uno作为主控制板,采用自主开发的全桥控制板控制珀尔帖器件对铝块进行加热和冷却循环,以实现恒温温度,其控制过程是通过热敏电阻和22位高精度A/D转换后送Arduino进行处理,根据处理结果采用脉冲实时控制桥臂的通断。同时自主研发了图形软件平台,可以独立控制温度和反应时间。
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公开(公告)号:CN103667509B
公开(公告)日:2016-05-18
申请号:CN201310739069.1
申请日:2012-12-11
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海欣景生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了检测食品中乳酸菌的方法,其包括,(1)提取食品中细菌基因组DNA;(2)进行PCR扩增,其中所使用的引物对是兼并引物对;(3)对PCR扩增的产物进行电泳检测,如检测到唯一PCR扩增条带,则检测结果为阳性,否则检测结果为阴性;如检测结果为阳性则不需要进行步骤(4),如检测结果为阴性则需要进行步骤(4);(4)任选对PCR扩增的产物进行测序。本发明还提供了其中所用的引物等。本发明方法,直接可对各厂家的含一种或多种乳酸菌的制品进行检测,检测结果可以有效排除假阳性,从而便于推广实施,而对于检测阴性的制品,再配合测序,可以确保检测结果的正确性。
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公开(公告)号:CN105483250A
公开(公告)日:2016-04-13
申请号:CN201511022187.6
申请日:2015-12-30
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q1/689 , C12Q2531/113 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明公开了一种双歧杆菌的实时荧光PCR检测方法,包括以下步骤:步骤一:以双歧杆菌标准菌株的DNA为模板,进行荧光定量PCR扩增,获得PCR扩增产物;步骤二:检测扩增产物的荧光信号;其中,用于PCR扩增的反应体系中含有扩增双歧杆菌的特异性引物对和双歧杆菌的特异性探针。本发明的双歧杆菌的实时荧光PCR扩增的特异性引物对和探针不仅特异性好,而且灵敏度高,为快速准确地检测食品中是否按标示添加双歧杆菌提供了一种很好的方法,具有较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN104017074A
公开(公告)日:2014-09-03
申请号:CN201410269714.2
申请日:2014-06-17
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
IPC: C07K16/12 , G01N33/577 , C12N5/20 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及一种特异性识别克诺罗杆菌的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体可良好地识别克诺罗杆菌的不同种或亚种,具备对于克诺罗杆菌的广谱识别能力,但不与其它种属菌株发生交叉反应,特异性和灵敏度均非常高。
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公开(公告)号:CN103667509A
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201310739069.1
申请日:2012-12-11
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海欣景生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12Q1/14 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了检测食品中乳酸菌的方法,其包括,(1)提取食品中细菌基因组DNA;(2)进行PCR扩增,其中所使用的引物对是兼并引物对;(3)对PCR扩增的产物进行电泳检测,如检测到唯一PCR扩增条带,则检测结果为阳性,否则检测结果为阴性;如检测结果为阳性则不需要进行步骤(4),如检测结果为阴性则需要进行步骤(4);(4)任选对PCR扩增的产物进行测序。本发明还提供了其中所用的引物等。本发明方法,直接可对各厂家的含一种或多种乳酸菌的制品进行检测,检测结果可以有效排除假阳性,从而便于推广实施,而对于检测阴性的制品,再配合测序,可以确保检测结果的正确性。
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公开(公告)号:CN107058482A
公开(公告)日:2017-08-18
申请号:CN201611213301.8
申请日:2016-12-23
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海昂朴生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/6869 , C12Q2535/122
Abstract: 本发明涉及检测技术领域,涉及一种乳制品中益生菌的溯源方法,尤其涉及一种Illumina Miseq测序平台对乳制品中益生菌的溯源方法。所述方法包括如下步骤:(1)样品前处理:向待检测样品中加入柠檬酸钠和氢氧化钠,混合后离心弃上清,向沉淀中加入溶菌酶孵育;(2)处理后样品的基因组DNA的提取;(3)16S rRNA PCR扩增:针对细菌16s rDNA的v1‑v3区和v5‑v6区,设计引物进行PCR扩增;(4)Illumina Miseq测序:将PCR产物进行Illumina Miseq测序。本发明利用Illumina Miseq测序平台对市售发酵乳制品及益生菌奶粉等食品所含的益生菌进行了菌株种类和丰度的分析,表明固体益生菌产品中益生菌实际丰度与标示基本一致,而发酵型益生菌产品中实际测序与标示的菌株比对差异较大。
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公开(公告)号:CN106591291A
公开(公告)日:2017-04-26
申请号:CN201611203788.1
申请日:2016-12-23
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
CPC classification number: C12Q1/6806 , C12N15/1003 , C12Q2527/125
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,涉及一种DNA提取的方法及应用,尤其涉及一种酸奶、奶粉、保健品或菌粉中DNA提取的方法及应用,所述方法包括如下步骤:(1)样品前处理:向待检测样品中加入柠檬酸钠和氢氧化钠,混合后离心弃上清,向沉淀中加入溶菌酶孵育;(2)将步骤(1)前处理后的样品进行DNA提取。本发明的DNA提取的方法可用于酸奶、奶粉、菌粉和保健品中的DNA提取,通过样品前处理步骤,尤其是通过加入特定浓度的柠檬酸钠和氢氧化钠混合离心,配合溶菌酶孵育,在这三个组分的配合下,使得前处理大大提高了DNA提取的效果,使得DNA提取的纯度较高,有利于后续的检测方法的建立。
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公开(公告)号:CN106701912A
公开(公告)日:2017-05-24
申请号:CN201610875224.6
申请日:2016-09-30
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海昂朴生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/6869 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明涉及奶粉检测技术领域,尤其涉及一种Illumina Miseq测序平台检测奶粉中的益生菌的方法,所述方法包括如下步骤:(1)奶粉基因组DNA的提取:将奶粉冲泡后,进行第一次离心取上清,再进行第二次离心取沉淀,加入缓冲液震荡,再加入溶菌酶反应后进行基因组DNA的提取;(2)PCR扩增:针对细菌16s rDNA的v1‑v3区,选用特异性引物进行PCR扩增;(3)Illumina Miseq测序:将PCR产物进行Illumina Miseq测序。Illumina MiSeq测序方法分析有效的避免了通量低、操作复杂和准确率低等缺陷,不仅可实现对多样品的多个可变区同时测序,而且在测序速度和测序通量上都有进一步提升,检测结果可信度高。
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公开(公告)号:CN105039565A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510509552.X
申请日:2015-08-19
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q2561/101 , C12Q2545/114 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了一种鹅鸭源性羽绒成份的定量检测方法、定量检测试剂盒及应用,所述鹅鸭源性羽绒成份的定量检测方法包括的步骤有:一、以待测样品的DNA为模板,进行荧光定量PCR扩增,获得PCR扩增产物;二、检测扩增产物的荧光信号;三、计算待测样品中鹅源性羽绒成分和鸭源性羽绒成分的含量;其中,用于PCR扩增的反应体系中含有扩增鹅源性羽绒成分特异性引物对和鹅源性羽绒成分特异性探针,以及扩增鸭源性羽绒成分特异性引物对和鸭源性羽绒成分特异性探针。本发明根据鹅鸭线粒体DNA设计引物探针,并构建定量检测试剂盒,应用于鹅鸭源性羽绒成分的定量检测,其检测方法准确、快速,具有较好的工业应用价值。
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公开(公告)号:CN103014160A
公开(公告)日:2013-04-03
申请号:CN201210532379.1
申请日:2012-12-11
Applicant: 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心 , 上海欣景生物科技有限公司
IPC: C12Q1/68 , C12Q1/14 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/23 , C12R1/46 , C12R1/245 , C12R1/225 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了检测食品中乳酸菌的方法,其包括,(1)提取食品中细菌基因组DNA;(2)进行PCR扩增,其中所使用的引物对是兼并引物对;(3)对PCR扩增的产物进行电泳检测,如检测到唯一PCR扩增条带,则检测结果为阳性,否则检测结果为阴性;如检测结果为阳性则不需要进行步骤(4),如检测结果为阴性则需要进行步骤(4);(4)任选对PCR扩增的产物进行测序。本发明还提供了其中所用的引物等。本发明方法,直接可对各厂家的含一种或多种乳酸菌的制品进行检测,检测结果可以有效排除假阳性,从而便于推广实施,而对于检测阴性的制品,再配合测序,可以确保检测结果的正确性。
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