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公开(公告)号：CN108753684A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810631750.7
申请日：2018-06-19
Applicant: 山东信得科技股份有限公司 , 青岛信得药业有限公司
CPC classification number: C12N5/0686 , C12M47/12
Abstract: 本发明公开了一种去除PK15细胞中支原体的方法，具体包括以下步骤：(1)分别配置DMEM培养基和0.25％胰酶，然后经滤菌器分别进行过滤，将牛血清进行消毒和灭活处理后进行分装备用；(2)将长满单层的PK15细胞用步骤(1)制备的0.25％胰酶消化分散，加入细胞生长液进行传代；(3)加入Plasmocin treatment试剂，继续培养；(4)待PK15细胞长成致密单层后进行传代，选用含有25μg/ml的Plasmocin treatment试剂的步骤(2)中配制的细胞生长液作为传代培养基，待PK15细胞长满后按1:5加入所述的传代培养基再连续传代4代，即获得无支原体的PK15细胞。本发明能够有效去除PK15细胞中的支原体，且用时较短，获得的无支原体的PK15细胞在后期传代过程中无需再使用Plasmocin treatment试剂，也不会发生细胞的二次感染。
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公开(公告)号：CN104888210A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510244210.X
申请日：2015-05-14
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明涉及猪圆环病毒2型基因工程亚单位口服疫苗的制备方法，包括以下步骤：1、序列合成；2、重组载体在大肠杆菌中的构建；3、重组载体在乳酸乳球菌MG1363中的构建；4、蛋白的表达，重组菌保存实验以及疫苗的制备。本发明具有以下有益效果：不需要对抗原进行特殊处理，避免了抗原纯化，减少抗原损失；优化基因序列，提高了抗原表达量；优化表达条件，解决了其他原核表达添加诱导剂对动物存在毒性问题以及高成本问题，并且避免了在表达过程中添加诱导剂增加污染几率和加大工作量；采用本发明的方法，成本低，效果显著；本发明采用口服疫苗，避免了常规注射疫苗所引起的应激及疫苗吸收问题。
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公开(公告)号：CN104805060A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510246420.2
申请日：2015-05-15
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
IPC: C12N7/00 , C12N7/04 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病病毒及其在制备疫苗中的应用，本发明提供的猪伪狂犬病病毒的保藏编号为CGMCC No.10266。本发明筛选的猪伪狂犬病病毒具有安全性好，且保护率高的特点，用本发明猪伪狂犬病病毒PRV-QD株接种Vero细胞，收获细胞毒液，提取该分离株的DNA，采用基因工程的方法对该分离株进行毒力基因TK、gE和gI基因的缺失，并在细胞上进行拯救后，繁毒，加入保护剂后制成疫苗。制成的疫苗对仔猪的保护率为100％，效果明显优于Bartha-K61组(20％)，此疫苗具有高效、安全性好的优点。
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公开(公告)号：CN104645323A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510106534.7
申请日：2015-03-12
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了五龙鹅的融合催乳素主动免疫提高产蛋率的方法，包括以下步骤：（1）cRNA第一链合成及扩增；（2）PRL原核表达载体的建立、筛选和鉴定；(3)重组PRL蛋白诱导表达及破碎；（4）重组PRL蛋白的SDS-PAGE检测及浓度测定；(5)重组PRL蛋白纯化、回收；(6)重组PRL蛋白注射针剂制备；(7)主动免疫及观察记录。本发明可提高五龙鹅的就巢性和产蛋率，进而可提高五龙鹅的生产性能和市场价值。
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公开(公告)号：CN104474540A
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201410515139.X
申请日：2014-09-29
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供一种噬菌体展示表达圆环病毒抗原疫苗的制备方法，包括以下步骤：提取猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)RNA，反转录，聚合酶链式反应(PCR)扩增获取猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因开放阅读框片段，并铆定定向插入T4噬菌体；利用免疫筛选的方法获取具有ORF2基因的T4噬菌体；经纯化后重新侵染X-Blue ST1(CCTCC M 2014397)宿主细胞；发酵培养获得的X-BlueST1宿主细胞，诱导表达灭活后培养物作为抗原；ELISA标定抗原效价，并用生理盐水倍比稀释抗原终浓度为107U/ml；1:2.5的比例加入疫苗佐剂，即为疫苗。本发明利用噬菌体表达猪圆环病毒Ⅱ型抗原并制备疫苗，避免了弱毒疫苗毒力返强风险，且采用发酵培养利于大规模工业化生产，成本远低于通过细胞培养的方式生产疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107137704A
公开(公告)日：2017-09-08
申请号：CN201610696422.6
申请日：2016-08-20
Applicant: 山东信得科技股份有限公司 , 青岛信得药业有限公司
IPC: A61K39/235 , A61P31/20 , C12N7/00
Abstract: 本发明提供一种鸭2型腺病毒灭活疫苗，其中抗原为灭活后的GD株病毒；GD株病毒于2016年6月5日保藏在武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：V201633。本发明制备的鸭2型腺病毒灭活疫苗安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效；利用血清学方法和免疫攻毒法评估疫苗的免疫效果，结果显示，本发明中制备的灭活疫苗对鸭群能够提供有效的免疫保护，具有很好的商品化开发前景。
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公开(公告)号：CN107137704B
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201610696422.6
申请日：2016-08-20
Applicant: 山东信得科技股份有限公司 , 青岛信得药业有限公司
IPC: A61K39/235 , A61P31/20 , C12N7/00
Abstract: 本发明提供一种鸭2型腺病毒灭活疫苗，其中抗原为灭活后的GD株病毒；GD株病毒于2016年6月5日保藏在武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：V201633。本发明制备的鸭2型腺病毒灭活疫苗安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效；利用血清学方法和免疫攻毒法评估疫苗的免疫效果，结果显示，本发明中制备的灭活疫苗对鸭群能够提供有效的免疫保护，具有很好的商品化开发前景。
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公开(公告)号：CN105348372A
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201510697228.5
申请日：2015-10-22
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
IPC: C07K14/03 , C07K16/08 , C12N15/38 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/005 , C07K16/085 , C12N2710/16722 , G01N33/56983 , G01N2333/032
Abstract: 本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病毒的检测方法，本发明的方法使用针对氨基酸序列为SEQ ID NO:1的gE蛋白的高特异性单克隆抗体，基于该单抗建立的阻断ELISA方法具有特异性高、灵敏度强、无假阳检测的特点，从而为PR准确诊断提供科学的依据。
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公开(公告)号：CN104592366A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201410812737.3
申请日：2014-12-24
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
CPC classification number: C07K14/08
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白初步纯化方法，包括以下步骤：(1)菌体处理；(2)向上清中添加硫酸铵至20％饱和度，冰上搅拌至硫酸铵完全溶解静置过夜后，8000rpm，在4℃温度下离心15min，收集上清；(3)向步骤2的上清中加入硫酸铵至50％饱和度，冰上搅拌至硫酸铵完全溶解静置过夜后，8000rpm，在4℃温度下离心15min，收集沉淀；(4)真空干燥，之后即为获得的重组鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白。本发明的提供一种操作简单、成本低廉的方法。
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公开(公告)号：CN104356211A
公开(公告)日：2015-02-18
申请号：CN201410485475.4
申请日：2014-09-22
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
CPC classification number: C07K14/005 , C12N2720/00051
Abstract: 本发明公开了一种应用Triton X-114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法，包括以下步骤：在100ml VP2重组蛋白质溶液中加入1ml Triton X-114，充分混溶得到混合物A，将混合物A冰浴30min；混合物A在37℃条件下水浴放置10min，搅拌；25℃条件下，将搅拌均匀的混合物A在12000g下离心15min，移出上层水相；将用于去除内毒素的尿囊素直接加到上层水相中，得到混合物B，将混合物B在室温下震荡20min；25℃条件下，将震荡后的混合物B在5000g下离心5min，去除底层沉淀，保留上清溶液，上清液即为去除内毒素的VP2重组蛋白质溶液。本方法具有处理量大、处理周期短、生产成本低、去除内毒素彻底，可将内毒素含量控制在畜禽临床应用标准范围内的优点，并且符合规模化生产的需求。
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