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公开(公告)号：CN112501133B
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202011386352.7
申请日：2020-12-01
Applicant: 山东信得科技股份有限公司 , 青岛信得药业有限公司
IPC: C12N7/00 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种猪伪狂犬病毒QD株gE‑/gI‑/11K‑三基因缺失致弱株，是对猪伪狂犬病病毒株进行gE和gI和11K基因进行缺失后制成的。所述的猪伪狂犬病病毒株，为猪伪狂犬病病毒株PRV‑QD株，其保藏编号为CGMCC No.10266。本发明制备的疫苗株可有效预防猪伪狂犬病，而且作为抗原的猪伪狂犬病病毒为基因缺失株，通过水平传播感染在小鼠体连续传代，均未见毒力返强现象，遗传性稳定，符合猪伪狂犬病病毒缺失疫苗株无毒力返强的标准，制成的疫苗能够提供有效的免疫保护，具有很好的商品化开发前景。
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公开(公告)号：CN111979202A
公开(公告)日：2020-11-24
申请号：CN202010880377.6
申请日：2020-08-27
Applicant: 山东信得科技股份有限公司 , 青岛信得药业有限公司
IPC: C12N7/00 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种伪狂犬病毒弱毒株，为伪狂犬病病毒TK缺失株，是将猪伪狂犬病病毒QD株缺失TK基因制备的；所述的伪狂犬病病毒QD株的保藏编号为CGMCC No.10266。本发明又提供了所述的伪狂犬病病毒弱毒株在制备伪狂犬疫苗中的应用。本发明伪狂犬病毒弱毒株是由保存的伪狂犬病病毒株经过TK基因缺失处理获得，于其往前构建方法相比，采用brdU压力与EGFP荧光标记双重筛选，缩短了重组伪狂犬病毒病病毒纯化代次和纯化时间，重组伪狂犬病病毒其致病力低，免疫原性强，用改伪狂犬病病毒弱毒株制备的弱毒活疫苗可以对小鼠和猪只等伪狂犬病病毒易感动物提供有效免疫保护。
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公开(公告)号：CN103333916A
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201310120764.X
申请日：2013-04-02
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种适应鸡新城疫病毒增殖的BHK细胞系的建立方法以及在鸡新城疫病毒的增殖中的应用。本发明通过改进新城疫病毒培养方式、优化培养参数、筛选传代细胞，建立传代细胞疫苗生产工艺，生产工艺流程将大大简化，生产过程更加可控。
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公开(公告)号：CN111228859A
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN202010126855.4
申请日：2020-02-28
Applicant: 山东信得科技股份有限公司 , 青岛信得药业有限公司
Abstract: 本发明是提供一种重组抗原蛋白亚单位疫苗的破乳方法，是将使用油乳剂作为佐剂的亚单位疫苗在冰浴上进行超声破乳；其中超声破乳，一种具体条件如下：1000-2500焦耳，超声2-5秒，停止2-5秒，共30-45个循环，超声结束后在室温条件下离心获得水相。本发明的方法简便、迅速，可在10分钟内完成；抗原分离效果好，同时可保证法氏囊病毒VP2蛋白的稳定性；破乳后分离出的水相中的VP2抗原含量可以采用琼脂扩散试验法进行检测；破乳后水相中抗原回收率高，达40％。适用于对marcol52佐剂乳化的鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗和其他基因工程亚单位疫苗进行破乳，进而对水相进行内毒素含量检测，从而评价成品疫苗的内毒素含量。
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公开(公告)号：CN104474540A
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201410515139.X
申请日：2014-09-29
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供一种噬菌体展示表达圆环病毒抗原疫苗的制备方法，包括以下步骤：提取猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)RNA，反转录，聚合酶链式反应(PCR)扩增获取猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因开放阅读框片段，并铆定定向插入T4噬菌体；利用免疫筛选的方法获取具有ORF2基因的T4噬菌体；经纯化后重新侵染X-Blue ST1(CCTCC M 2014397)宿主细胞；发酵培养获得的X-BlueST1宿主细胞，诱导表达灭活后培养物作为抗原；ELISA标定抗原效价，并用生理盐水倍比稀释抗原终浓度为107U/ml；1:2.5的比例加入疫苗佐剂，即为疫苗。本发明利用噬菌体表达猪圆环病毒Ⅱ型抗原并制备疫苗，避免了弱毒疫苗毒力返强风险，且采用发酵培养利于大规模工业化生产，成本远低于通过细胞培养的方式生产疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104356211B
公开(公告)日：2017-08-29
申请号：CN201410485475.4
申请日：2014-09-22
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种应用Triton X‑114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法，包括以下步骤：在100ml VP2重组蛋白质溶液中加入1ml Triton X‑114，充分混溶得到混合物A，将混合物A冰浴30min；混合物A在37℃条件下水浴放置10min，搅拌；25℃条件下，将搅拌均匀的混合物A在12000g下离心15min，移出上层水相；将用于去除内毒素的尿囊素直接加到上层水相中，得到混合物B，将混合物B在室温下震荡20min；25℃条件下，将震荡后的混合物B在5000g下离心5min，去除底层沉淀，保留上清溶液，上清液即为去除内毒素的VP2重组蛋白质溶液。本方法具有处理量大、处理周期短、生产成本低、去除内毒素彻底，可将内毒素含量控制在畜禽临床应用标准范围内的优点，并且符合规模化生产的需求。
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公开(公告)号：CN104560889A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410673855.0
申请日：2014-11-21
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供猪流行性腹泻病毒分离技术。本发明包括以下步骤：用支原体去除剂将Vero细胞的支原体去除，进行细胞培养；对培养后的细胞注入胰蛋白酶的猪流行性腹泻病毒滤液，静置培养，收集猪流行性腹泻病毒液。本发明猪流行性腹泻病毒滤液与去除支原体以后的Vero细胞相互作用，在胰蛋白酶的作用下，产生明显细胞病变效应的时间稳定，没有支原体对细胞的干扰，从而使得收获猪流行性腹泻病毒时，病毒滴度高。由以前的103.64半数组织培养感染剂量升高到105.38TCID50，提高了近2个滴度；细胞产生病变的时间推后，由以前的24-48h推迟到72h。
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公开(公告)号：CN104513298A
公开(公告)日：2015-04-15
申请号：CN201410753079.5
申请日：2014-12-09
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
CPC classification number: C07K14/005 , C12N2720/00022 , C12N2720/00034
Abstract: 本发明的目的是提供一种表达鸡传染性法氏囊可溶性VP2-4-3多肽的方法，能够克服目前鸡传染性法氏囊可溶性VP2-4-3蛋白重组表达时主要以包涵体方式表达的问题，从而弥补现有技术的不足。本发明提供一种改造的鸡传染性法氏囊VP 2-4-3多肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明优化获得的VP2-4-3抗原保持了其主要抗原性，且经过了细胞周质的加工和修饰过程，结构上比单纯的原核表达的包涵体更接近于原蛋白结构，抗原特异性更强。并且该抗原为分泌表达，抗原纯化无需裂解细胞，避免了内毒素的引入回避了内毒素去除程序。该抗原更适于低成本大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN112501133A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011386352.7
申请日：2020-12-01
Applicant: 山东信得科技股份有限公司 , 青岛信得药业有限公司
IPC: C12N7/00 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种猪伪狂犬病毒QD株gE‑/gI‑/11K‑三基因缺失致弱株，是对猪伪狂犬病病毒株进行gE和gI和11K基因进行缺失后制成的。所述的猪伪狂犬病病毒株，为猪伪狂犬病病毒株PRV‑QD株，其保藏编号为CGMCC No.10266。本发明制备的疫苗株可有效预防猪伪狂犬病，而且作为抗原的猪伪狂犬病病毒为基因缺失株，通过水平传播感染在小鼠体连续传代，均未见毒力返强现象，遗传性稳定，符合猪伪狂犬病病毒缺失疫苗株无毒力返强的标准，制成的疫苗能够提供有效的免疫保护，具有很好的商品化开发前景。
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公开(公告)号：CN104513298B
公开(公告)日：2018-07-17
申请号：CN201410753079.5
申请日：2014-12-09
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明的目的是提供一种表达鸡传染性法氏囊可溶性VP 2‑4‑3多肽的方法，能够克服目前鸡传染性法氏囊可溶性VP 2‑4‑3蛋白重组表达时主要以包涵体方式表达的问题，从而弥补现有技术的不足。本发明提供一种改造的鸡传染性法氏囊VP 2‑4‑3多肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明优化获得的VP 2‑4‑3抗原保持了其主要抗原性，且经过了细胞周质的加工和修饰过程，结构上比单纯的原核表达的包涵体更接近于原蛋白结构，抗原特异性更强。并且该抗原为分泌表达，抗原纯化无需裂解细胞，避免了内毒素的引入回避了内毒素去除程序。该抗原更适于低成本大规模工业化生产。
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