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公开(公告)号：CN104830810A
公开(公告)日：2015-08-12
申请号：CN201510248661.0
申请日：2015-05-15
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
IPC: C12N7/04 , A61K35/763 , A61P31/22
Abstract: 本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病病毒疫苗，由抗原和保护剂组成的，其中抗原包含有由保藏编号为CGMCC No.10266的猪伪狂犬病病毒株进行毒力基因TK、gE和gI缺失后制成的减毒病毒株。本发明制备的疫苗可有效预防猪伪狂犬病，而且作为抗原的猪伪狂犬病病毒为基因缺失株，通过水平传播感染在小鼠体连续传代，均未见毒力返强现象，遗传性稳定，符合猪伪狂犬病病毒缺失疫苗株无毒力返强的标准，制成的疫苗能够提供有效的免疫保护，具有很好的商品化开发前景。
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公开(公告)号：CN104560889A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410673855.0
申请日：2014-11-21
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供猪流行性腹泻病毒分离技术。本发明包括以下步骤：用支原体去除剂将Vero细胞的支原体去除，进行细胞培养；对培养后的细胞注入胰蛋白酶的猪流行性腹泻病毒滤液，静置培养，收集猪流行性腹泻病毒液。本发明猪流行性腹泻病毒滤液与去除支原体以后的Vero细胞相互作用，在胰蛋白酶的作用下，产生明显细胞病变效应的时间稳定，没有支原体对细胞的干扰，从而使得收获猪流行性腹泻病毒时，病毒滴度高。由以前的103.64半数组织培养感染剂量升高到105.38TCID50，提高了近2个滴度；细胞产生病变的时间推后，由以前的24-48h推迟到72h。
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公开(公告)号：CN104888210A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510244210.X
申请日：2015-05-14
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明涉及猪圆环病毒2型基因工程亚单位口服疫苗的制备方法，包括以下步骤：1、序列合成；2、重组载体在大肠杆菌中的构建；3、重组载体在乳酸乳球菌MG1363中的构建；4、蛋白的表达，重组菌保存实验以及疫苗的制备。本发明具有以下有益效果：不需要对抗原进行特殊处理，避免了抗原纯化，减少抗原损失；优化基因序列，提高了抗原表达量；优化表达条件，解决了其他原核表达添加诱导剂对动物存在毒性问题以及高成本问题，并且避免了在表达过程中添加诱导剂增加污染几率和加大工作量；采用本发明的方法，成本低，效果显著；本发明采用口服疫苗，避免了常规注射疫苗所引起的应激及疫苗吸收问题。
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公开(公告)号：CN104805060A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510246420.2
申请日：2015-05-15
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
IPC: C12N7/00 , C12N7/04 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病病毒及其在制备疫苗中的应用，本发明提供的猪伪狂犬病病毒的保藏编号为CGMCC No.10266。本发明筛选的猪伪狂犬病病毒具有安全性好，且保护率高的特点，用本发明猪伪狂犬病病毒PRV-QD株接种Vero细胞，收获细胞毒液，提取该分离株的DNA，采用基因工程的方法对该分离株进行毒力基因TK、gE和gI基因的缺失，并在细胞上进行拯救后，繁毒，加入保护剂后制成疫苗。制成的疫苗对仔猪的保护率为100％，效果明显优于Bartha-K61组(20％)，此疫苗具有高效、安全性好的优点。
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公开(公告)号：CN104474540A
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201410515139.X
申请日：2014-09-29
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供一种噬菌体展示表达圆环病毒抗原疫苗的制备方法，包括以下步骤：提取猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)RNA，反转录，聚合酶链式反应(PCR)扩增获取猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因开放阅读框片段，并铆定定向插入T4噬菌体；利用免疫筛选的方法获取具有ORF2基因的T4噬菌体；经纯化后重新侵染X-Blue ST1(CCTCC M 2014397)宿主细胞；发酵培养获得的X-BlueST1宿主细胞，诱导表达灭活后培养物作为抗原；ELISA标定抗原效价，并用生理盐水倍比稀释抗原终浓度为107U/ml；1:2.5的比例加入疫苗佐剂，即为疫苗。本发明利用噬菌体表达猪圆环病毒Ⅱ型抗原并制备疫苗，避免了弱毒疫苗毒力返强风险，且采用发酵培养利于大规模工业化生产，成本远低于通过细胞培养的方式生产疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105348372A
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201510697228.5
申请日：2015-10-22
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
IPC: C07K14/03 , C07K16/08 , C12N15/38 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/005 , C07K16/085 , C12N2710/16722 , G01N33/56983 , G01N2333/032
Abstract: 本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病毒的检测方法，本发明的方法使用针对氨基酸序列为SEQ ID NO:1的gE蛋白的高特异性单克隆抗体，基于该单抗建立的阻断ELISA方法具有特异性高、灵敏度强、无假阳检测的特点，从而为PR准确诊断提供科学的依据。
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公开(公告)号：CN104888210B
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201510244210.X
申请日：2015-05-14
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
Abstract: 本发明涉及猪圆环病毒2型基因工程亚单位口服疫苗的制备方法，包括以下步骤：1、序列合成；2、重组载体在大肠杆菌中的构建；3、重组载体在乳酸乳球菌MG1363中的构建；4、蛋白的表达，重组菌保存实验以及疫苗的制备。本发明具有以下有益效果：不需要对抗原进行特殊处理，避免了抗原纯化，减少抗原损失；优化基因序列，提高了抗原表达量；优化表达条件，解决了其他原核表达添加诱导剂对动物存在毒性问题以及高成本问题，并且避免了在表达过程中添加诱导剂增加污染几率和加大工作量；采用本发明的方法，成本低，效果显著；本发明采用口服疫苗，避免了常规注射疫苗所引起的应激及疫苗吸收问题。
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公开(公告)号：CN104877972B
公开(公告)日：2018-01-02
申请号：CN201510246482.3
申请日：2015-05-15
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
IPC: C12N7/04 , A61K35/763 , A61P31/22
Abstract: 本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病病毒疫苗，由抗原和保护剂组成的，其中抗原包含有由保藏编号为CGMCC No.10266的猪伪狂犬病病毒株进行毒力基因gE和gI缺失后制成的减毒病毒株。本发明制备的疫苗可有效预防猪伪狂犬病，而且作为抗原的猪伪狂犬病病毒为基因缺失株，通过水平传播感染在小鼠体连续传代，均未见毒力返强现象，遗传性稳定，符合猪伪狂犬病病毒缺失疫苗株无毒力返强的标准，制成的疫苗能够提供有效的免疫保护，具有很好的商品化开发前景。
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公开(公告)号：CN104830810B
公开(公告)日：2018-01-02
申请号：CN201510248661.0
申请日：2015-05-15
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
IPC: C12N7/04 , A61K35/763 , A61P31/22
Abstract: 本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病病毒疫苗，由抗原和保护剂组成的，其中抗原包含有由保藏编号为CGMCC No.10266的猪伪狂犬病病毒株进行毒力基因TK、gE和gI缺失后制成的减毒病毒株。本发明制备的疫苗可有效预防猪伪狂犬病，而且作为抗原的猪伪狂犬病病毒为基因缺失株，通过水平传播感染在小鼠体连续传代，均未见毒力返强现象，遗传性稳定，符合猪伪狂犬病病毒缺失疫苗株无毒力返强的标准，制成的疫苗能够提供有效的免疫保护，具有很好的商品化开发前景。
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公开(公告)号：CN104805060B
公开(公告)日：2017-12-01
申请号：CN201510246420.2
申请日：2015-05-15
Applicant: 山东信得科技股份有限公司
IPC: C12N7/00 , C12N7/04 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病病毒及其在制备疫苗中的应用，本发明提供的猪伪狂犬病病毒的保藏编号为CGMCC No.10266。本发明筛选的猪伪狂犬病病毒具有安全性好，且保护率高的特点，用本发明猪伪狂犬病病毒PRV‑QD株接种Vero细胞，收获细胞毒液，提取该分离株的DNA，采用基因工程的方法对该分离株进行毒力基因TK、gE和gI基因的缺失，并在细胞上进行拯救后，繁毒，加入保护剂后制成疫苗。制成的疫苗对仔猪的保护率为100％，效果明显优于Bartha‑K61组(20％)，此疫苗具有高效、安全性好的优点。
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