一种利用微生物生产酸性蛋白酶的方法

    公开(公告)号:CN108570463A

    公开(公告)日:2018-09-25

    申请号:CN201810409771.4

    申请日:2018-05-02

    Abstract: 本发明属于酸性蛋白酶生产技术领域,具体涉及一种利用微生物生产酸性蛋白酶的方法,包括以下步骤:制备灭菌的固体培养基,其中盛放固体培养基所用曲盘的结构如下:包括一个底部设有若干透气孔的盘体,并且盘体的底部可拆卸的安装在盘体侧壁上,盘体内横向安装有透气承重网,透气承重网和盘体底部之间填充有第一纱布层,盘体上还覆盖有透气网盖;接种与发酵:将发酵菌的液体母种接种于灭菌的固体培养基中,然后进行发酵,发酵过程中每天补水;最后进行酸性蛋白酶的提取。本发明通过改变传统的曲盘结构和液体发酵工艺,采用固体发酵方式来提高酶活力。

    秸秆的酶解糖化处理方法
    12.
    发明公开

    公开(公告)号:CN104561129A

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:CN201410853378.6

    申请日:2014-12-31

    CPC classification number: Y02E50/16 C12P19/14 C12P7/10

    Abstract: 本发明公开了一种秸秆的酶解糖化处理方法,其包括以下步骤:1)将秸秆晒干后粉碎,用筛子进行过筛,得到秸秆粉状物;2)将秸秆粉状物加入稀盐酸中进行酸化反应,反应结束后降至室温,得到秸秆浆液;3)向秸秆浆液中加入纤维素酶、木聚糖酶、氯化镁、吐温80和蒸馏水,得到酶解浆液,然后进行酶解糖化反应。本发明所述的秸秆酶解糖化处理方法,能够显著提高秸秆的酶解糖化效果。

    琼胶酶YM01-3突变体及应用
    13.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119040305A

    公开(公告)日:2024-11-29

    申请号:CN202411157071.2

    申请日:2024-08-22

    Abstract: 本发明利用基因工程技术对琼胶酶YM01‑3进行了截短突变,通过设计一对方向相反的互补序列引物,运用高保真度的DNA聚合酶进行扩增,仅扩增其中的一部分基因,以构建截短的重组DNA分子,并最终构建出一种琼胶酶YM01‑3突变体。本发明的琼胶酶YM01‑3突变体的热稳定性相较野生型YM01‑3有大幅度的提升,是一种极具潜力的新型琼胶酶,可应用于琼胶寡糖的酶法工业化生产中,进而推动琼胶寡糖生产成本的大幅降低。

    一种利用微生物生产酸性蛋白酶的方法

    公开(公告)号:CN108570463B

    公开(公告)日:2021-12-24

    申请号:CN201810409771.4

    申请日:2018-05-02

    Abstract: 本发明属于酸性蛋白酶生产技术领域,具体涉及一种利用微生物生产酸性蛋白酶的方法,包括以下步骤:制备灭菌的固体培养基,其中盛放固体培养基所用曲盘的结构如下:包括一个底部设有若干透气孔的盘体,并且盘体的底部可拆卸的安装在盘体侧壁上,盘体内横向安装有透气承重网,透气承重网和盘体底部之间填充有第一纱布层,盘体上还覆盖有透气网盖;接种与发酵:将发酵菌的液体母种接种于灭菌的固体培养基中,然后进行发酵,发酵过程中每天补水;最后进行酸性蛋白酶的提取。本发明通过改变传统的曲盘结构和液体发酵工艺,采用固体发酵方式来提高酶活力。

    一种琼胶酶融合酶工程菌株的构建方法

    公开(公告)号:CN111850019A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN201910331494.4

    申请日:2019-04-25

    Abstract: 本发明提供一种琼胶酶融合酶工程菌株的构建方法,包括以下步骤:S1、质粒提取得到重组质粒Aga0917-pMD19T和CBM13-pUC57-DH5α;S2、PCR扩增得到Aga0917基因片段和CBM13基因片段;S3、Aga0917基因片段和CBM13基因片段的重叠PCR得到Aga0917-CBM13;S4、Aga0917-CBM13的末端加A;S5、末端带A的Aga0917-CBM13与克隆载体进行连接,得到克隆载体溶液;S6、表达载体构建得到琼胶酶融合酶工程菌株。本发明提出的构建方法,具有应用价值,且得到的琼胶酶融合酶工程菌株酶活性高、耐热性能优越、适用范围广,易应用于工业化生产中。

    一种木聚糖酶杂合酶工程菌株的构建方法

    公开(公告)号:CN105505806B

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201610046663.6

    申请日:2016-01-16

    Abstract: 本发明公开了一种木聚糖酶杂合酶工程菌株的构建方法,首先利用生物信息学比对木聚糖酶XynZF‑2基因序列与耐热木聚糖酶EvXyn11基因序列的同源性,通过N‑端替换将XynZF‑2的N‑端48个氨基酸替换成木聚糖酶EvXyn11N‑端的34个氨基酸,并引入芳香族氨基酸P9Y和H14F,进而在XynZF‑2酶C端继续引入二硫键Cys38‑Cys191、α‑螺旋及cord区域分别引入疏水性氨基酸K164M、G166A、N160I以及V111A、G109A,最后引入糖基化修饰位点E42N和F17S,构建多位点突变杂合酶XynZL,期望杂合酶XynZL的热稳定性有所改善。

    培养基优化方法
    18.
    发明公开

    公开(公告)号:CN106096077A

    公开(公告)日:2016-11-09

    申请号:CN201610357790.8

    申请日:2016-05-26

    CPC classification number: G06F17/5036

    Abstract: 本发明公开了一种培养基优化方法,首先确定培养基关键成分,并用单因素确定其含量的取值范围;对多因素多水平的微生物培养基系统组成进行均匀设计优化;建立关键成分均匀设计配比与对应生物量的第一回归模型,求取预测模型关于培养基关键成分的最优配比Ⅰ及对应的生物量Ⅰ;利用自然邻点插值法对上述均匀设计实验数据进行插值加密,然后建立加密数据与对应生物量的第二回归模型,求取预测模型关于培养基关键成分的最优配比Ⅱ及对应的生物量Ⅱ;对两组最优配比及生物量进行试验验证,选择生物量较大的关键成分配比作为最终最优配方。本发明利用有限实验次数,进行插值优化,获得稳健可靠的回归模型,最终获得最适用于微生物生长的培养基成分配比。

    偶氮还原酶、其突变体及应用

    公开(公告)号:CN118222527A

    公开(公告)日:2024-06-21

    申请号:CN202410367135.5

    申请日:2024-03-28

    Abstract: 本发明从海洋环境中分离到一株可降解偶氮染料的菌株Roseibium sp.H3510,并在其中挖掘到一种新型的偶氮还原酶Azo2326‑wt,证实其具有宽泛的底物催化谱,能够催化多种偶氮染料脱色。此外,本发明通过基于理性设计的方法对偶氮还原酶Azo2326‑wt进行了突变进化,得到了多个酶催化活性以及热稳定性均大幅提升的偶氮还原酶突变体,大大提升了该酶的应用潜力,为偶氮染料废水的生物酶法处理提供了一套新的解决方案。

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