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公开(公告)号:CN119432914A
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202411600734.3
申请日:2024-11-11
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种基因编辑载体、胃癌细胞模型的构建方法及应用。所述基因编辑载体表达Cas9酶和sgRNA;所述sgRNA为sgRNA1或sgRNA3;所述sgRNA1由sgRNA1‑F和sgRNA1‑R拼接而成;所述sgRNA3由sgRNA3‑F和sgRNA3‑R拼接而成。本发明采用CRISPR/Cas9技术靶向STK39基因外显子构建基因编辑载体,得到STK39基因敲除的SGC‑7901细胞株。STK39基因敲除的SGC‑7901细胞株为胃癌内源性STK39基因的相关研究建立了有效的胃癌细胞模型。
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公开(公告)号:CN117586351A
公开(公告)日:2024-02-23
申请号:CN202311625165.3
申请日:2023-11-30
Applicant: 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡学院
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及稳定子、融合蛋白、表达载体、表达系统、及其应用。本发明提供的稳定子,具有特定的氨基酸序列结构,通过融合在目的蛋白C末端的方式与目的蛋白融合表达,一方面能够实现目的蛋白稳定表达水平,另一方面能够提高目的蛋白稳定性,使得目的蛋白能够抵抗蛋白酶水解。
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公开(公告)号:CN116376841A
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202310431399.8
申请日:2023-04-21
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于无血清培养基技术领域,本发明提供了大豆异黄酮在制备CHO细胞无血清培养基中的应用。本发明将大豆异黄酮作为添加剂添加到CHO细胞无血清培养基中,所述大豆异黄酮在所述CHO细胞无血清培养基中的终浓度为0.25~3.00mM。本发明培养基在一定程度上可提高目的蛋白在CHO细胞中的表达水平;本发明添加的大豆异黄酮的浓度合理,可在不影响细胞生长的情况下,通过减轻细胞凋亡,阻止细胞周期在G1期,增加细胞特异性生产力,提高重组蛋白的体积产量,从而降低生产制品生产工艺对生物反应器规模的需求和培养基的消耗,提高生产效率,最终降低生物制品的生产成本。
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公开(公告)号:CN113621577B
公开(公告)日:2023-03-10
申请号:CN202110893768.6
申请日:2021-08-05
Applicant: 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
Abstract: 本发明属于基因重组疫苗技术领域,具体涉及人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂、重组乙肝疫苗、表达方法。本发明提供人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂,在转染重组表达载体的HEK293细胞悬浮无血清培养过程中添加丁酸钠和氢化肉桂酸,并优选丁酸钠添加量为1.0~3.0 mol/L,氢化肉桂酸的添加量为0.2~1.0 mol/L,协同增效,提高重组蛋白表达量。试验表明,利用本发明提供的培养基添加剂,低温条件下培养,提高乙肝表面抗原(HBsAg)目的基因在HEK293细胞的表达水平。
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公开(公告)号:CN114720674A
公开(公告)日:2022-07-08
申请号:CN202210306821.2
申请日:2022-03-25
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种用简易鸡尾酒溶剂系统评价天然植物产品体外生物学活性的方法,属于天然植物提取技术领域。该方法包括以下步骤:①将天然植物产品与二甲基亚砜混合,制得DMSO储存液;②将所述DMSO储存液用DMEM全培养液稀释,固液分离,制得DMEM/DMSO鸡尾酒储存溶液;③用DMEM全培养液将所述DMEM/DMSO鸡尾酒储存溶液稀释成1×工作液,然后进行细胞实验。该方法使用的鸡尾酒溶剂系统具有较高的准确性和实用性,能够充分溶解水溶性和有机溶剂可溶性的多种化合物组分,使这些化合物充分表现出各自的生物学活性;同时,本发明采用的连续稀释鸡尾酒溶剂系统制备法,具有很强的简易可操作性。
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公开(公告)号:CN111235100B
公开(公告)日:2022-04-29
申请号:CN202010109042.4
申请日:2020-02-21
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域,具体涉及一种人脐带血间充质干细胞的培养方法。包括以下步骤:将脐带血单个核细胞用第一培养基培养至细胞生长状态稳定,后续改用第二培养基进行培养,所述第一培养基主要由基础培养基、胎牛血清、抗生素和间充质干细胞生长添加物组成,其中胎牛血清体积占比为8‑12%,间充质干细胞生长添加物体积占比为0.1‑0.2%;所述第二培养基主要由基础培养基、胎牛血清、抗生素组成,其中胎牛血清体积占比为8‑12%;所述基础培养基为DMEM/F12培养基。本发明的人脐带血间充质干细胞的培养方法,步骤简单、经济成本较低、培养成功率高,适于获取大量的间充质干细胞以满足相关疾病治疗时的使用量较大的需求。
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公开(公告)号:CN113621577A
公开(公告)日:2021-11-09
申请号:CN202110893768.6
申请日:2021-08-05
Applicant: 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
Abstract: 本发明属于基因重组疫苗技术领域,具体涉及人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂、重组乙肝疫苗、表达方法。本发明提供人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂,在转染重组表达载体的HEK293细胞悬浮无血清培养过程中添加丁酸钠和氢化肉桂酸,并优选丁酸钠添加量为1.0~3.0 mol/L,氢化肉桂酸的添加量为0.2~1.0 mol/L,协同增效,提高重组蛋白表达量。试验表明,利用本发明提供的培养基添加剂,低温条件下培养,提高乙肝表面抗原(HBsAg)目的基因在HEK293细胞的表达水平。
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公开(公告)号:CN106520832B
公开(公告)日:2020-02-18
申请号:CN201611024593.0
申请日:2016-11-17
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明公开了一种双顺反子表达载体、表达系统、制备方法及应用,属于基因工程技术领域。该表达载体包含核基质结合区序列、内核糖体进入位点序列和筛选标记,通过在启动子与IRES序列之间插入目的基因,可构成目的基因‑IRES序列‑筛选标记基因依次连接的双顺反子序列。表达载体的结构为:MAR‑启动子‑目的基因‑IRES序列‑筛选标记‑PolyA‑MAR。该载体利用一个启动子实现目的基因和筛选标记的同时表达,可减少由于不同表达框存在导致的假阳性细胞克隆,提高阳性细胞克隆筛选率,并克服传统载体目的基因与筛选标记表达不均衡的问题;载体上包含MAR序列能克服转基因沉默,实现转基因在宿主细胞中的高效、长期表达。
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公开(公告)号:CN105039411B
公开(公告)日:2019-01-18
申请号:CN201510534187.8
申请日:2015-08-27
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/867 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种附着型慢病毒载体、制备方法及应用,属于生物技术领域。本发明中附着型慢病毒载体由pLRZM载体与包装系统共同转染宿主细胞获得,pLRZM载体为pLVX‑IRES‑ZsGreen1载体中土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件替换为人源性MAR序列或其95%以上同源序列所得,土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件序列如SEQ ID NO.2所示,人源性MAR序列如SEQ ID NO.3中第14~2161位碱基所示。该附着型慢病毒载体附着于宿主细胞染色体上,而非整合到宿主细胞染色体中,并且能够介导外源基因在哺乳动物细胞中稳定、高效、持久的表达,可用于基因治疗,具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号:CN106868146A
公开(公告)日:2017-06-20
申请号:CN201710129192.X
申请日:2017-03-06
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12Q1/68 , C12N15/11 , A61K31/7105 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种用于检测与结直肠癌长春新碱耐药相关的miRNA表达的引物、试剂盒、方法及应用,属于肿瘤生物治疗技术领域。本发明首次通过试验证实SEQ ID NO:1所示miRNA序列与长春新碱的耐药性相关,miRNA在长春新碱耐药细胞中高表达、敏感细胞中低表达,因此可以作为肿瘤细胞长春新碱耐药的标志物。根据该标志物设计的引物、试剂盒及检测方法可用于临床判断肿瘤细胞对长春新碱的耐药性,进一步指导临床用药并实现精准治疗,提高疗效,降低副作用。本发明为设计肿瘤细胞长春新碱耐药药物提供了新的靶点,可用于直接开发拮抗肿瘤细胞长春新碱耐药性的药物。
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