一种NOD遗传背景的动脉粥样硬化小鼠模型的制备方法

    公开(公告)号:CN108251456B

    公开(公告)日:2021-08-20

    申请号:CN201810065368.4

    申请日:2018-01-23

    Abstract: 本发明涉及一种NOD遗传背景的动脉粥样硬化小鼠模型的制备方法,属于基因工程和遗传修饰技术领域。本发明首次将NOD遗传背景小鼠中的ApoE和LDLR基因进行同时敲除,获得了NOD遗传背景小鼠的能产生动脉粥样硬化的基因敲除小鼠模型。本发明获得NOD遗传背景的动脉粥样硬化小鼠模型的主动脉有明显的动脉粥样硬化斑块形成,与传统经典的动脉粥样硬化模型C57B/L6背景ApoE基因敲除小鼠相比,其发病程度一致,本发明的方法为研究者提供一种全新的NOD遗传背景动脉粥样硬化的基因敲除小鼠模型,对动脉粥样硬化的基础理论研究和临床诊断治疗具有十分重要的应用价值。

    一种HTLV-1病毒感染阻断剂、其药物组合物、疫苗及其应用

    公开(公告)号:CN118542941A

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202410676773.5

    申请日:2024-05-29

    Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种HTLV‑1病毒感染阻断剂、其药物组合物、疫苗及其应用。本发明通过对比敲除Piezo2和未敲除Piezo2的Jurkat细胞(CD4+T细胞),并经过HTLV‑1病毒感染操作后检测细胞内HTLV‑1相关细胞因子(Tax、P19等)的mRNA表达水平,结果表明Jurkat细胞敲除Piezo2后,其感染HTLV‑1病毒的能力降低(HTLV‑1相关细胞因子Tax、P19等的mRNA表达水平降低),提示靶向Piezo2的抑制剂能够作为HTLV‑1病毒阻断剂,抑制HTLV‑1病毒感染T细胞,具有阻止HTLV‑1病毒感染,预防/抑制病毒感染致急性成人T淋巴细胞白血病的药用价值。

    一种可诱导的中性粒细胞特异性剔除的小鼠模型构建方法

    公开(公告)号:CN112410341A

    公开(公告)日:2021-02-26

    申请号:CN202011388283.3

    申请日:2020-12-01

    Abstract: 本发明涉及一种可诱导的中性粒细胞特异性剔除的小鼠模型构建方法。本发明通过CRISPR/Cas9基因组编辑技术对Ly6G基因位点进行编辑后获得了一种全新的Ly6G‑DTR基因敲入小鼠模型,实现了DTR的表达直接受Ly6G启动子来驱动,并通过流式细胞术验证了DTR仅在Ly6G表达的中性粒细胞中具有很高的表达量,而T细胞、B细胞中均未检测到DTR表达。试验证明,对Ly6G‑DTR基因敲入小鼠注射白喉毒素,能够高度特异性的清除中性粒细胞,且清除效率高达100%,能够实现中性粒细胞的彻底清除;此外,还可以通过调整白喉毒素的给药剂量和时间来诱导中性粒细胞的清除程度,为中性粒细胞在疾病的发生和发展中扮演角色的解析提供更好的动物遗传模型。

    一种通过CRISPR/Cas9系统快速获得大片段缺失的细胞系基因敲除方法

    公开(公告)号:CN107435051B

    公开(公告)日:2020-06-02

    申请号:CN201710633467.3

    申请日:2017-07-28

    Abstract: 本发明涉及一种通过CRISPR/Cas9系统快速获得大片段缺失的细胞系基因敲除方法,属于基因工程和遗传修饰领域。本发明改造pX458载体,使其带有DsRed2和ECFP,然后针对目标基因设计多个特异性的sgRNA位点,将其连接至改造载体中,转染细胞系后利用流式细胞仪对细胞群进行分选,可以非常快速获得基因组被编辑的单细胞,然后用PCR扩增单细胞DNA序列,通过凝胶电泳即可以从中挑选出具有大片段缺失的单细胞。本发明通过将CRISPR/Cas9系统、流式细胞仪单细胞分选和表达载体上的荧光蛋白筛选三者结合起来,可以在短时间内获得具有大片段缺失的阳性单克隆,极大地提高细胞系基因敲除工作效率。

    一种通过CRISPR/Cas9系统快速获得大片段缺失的细胞系基因敲除方法

    公开(公告)号:CN107435051A

    公开(公告)日:2017-12-05

    申请号:CN201710633467.3

    申请日:2017-07-28

    Abstract: 本发明涉及一种通过CRISPR/Cas9系统快速获得大片段缺失的细胞系基因敲除方法,属于基因工程和遗传修饰领域。本发明改造pX458载体,使其带有DsRed2和ECFP,然后针对目标基因设计多个特异性的sgRNA位点,将其连接至改造载体中,转染细胞系后利用流式细胞仪对细胞群进行分选,可以非常快速获得基因组被编辑的单细胞,然后用PCR扩增单细胞DNA序列,通过凝胶电泳即可以从中挑选出具有大片段缺失的单细胞。本发明通过将CRISPR/Cas9系统、流式细胞仪单细胞分选和表达载体上的荧光蛋白筛选三者结合起来,可以在短时间内获得具有大片段缺失的阳性单克隆,极大地提高细胞系基因敲除工作效率。

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