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公开(公告)号:CN108251456B
公开(公告)日:2021-08-20
申请号:CN201810065368.4
申请日:2018-01-23
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/90 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种NOD遗传背景的动脉粥样硬化小鼠模型的制备方法,属于基因工程和遗传修饰技术领域。本发明首次将NOD遗传背景小鼠中的ApoE和LDLR基因进行同时敲除,获得了NOD遗传背景小鼠的能产生动脉粥样硬化的基因敲除小鼠模型。本发明获得NOD遗传背景的动脉粥样硬化小鼠模型的主动脉有明显的动脉粥样硬化斑块形成,与传统经典的动脉粥样硬化模型C57B/L6背景ApoE基因敲除小鼠相比,其发病程度一致,本发明的方法为研究者提供一种全新的NOD遗传背景动脉粥样硬化的基因敲除小鼠模型,对动脉粥样硬化的基础理论研究和临床诊断治疗具有十分重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN111778278A
公开(公告)日:2020-10-16
申请号:CN202010537546.6
申请日:2020-06-12
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种Slfn4缺失的动脉粥样硬化模型小鼠的构建方法及其应用。本发明将Slfn4基因敲除通过CRISPR-Cas9系统引入ApoE基因缺失遗传背景的动脉粥样硬化小鼠,回交和杂交后进行基因型筛选,获得了双基因缺失的纯合子模型小鼠ApoE–/–Slfn4–/–。Slfn4缺失动脉粥样硬化模型小鼠(ApoE–/–Slfn4–/–)较ApoE–/–小鼠动脉粥样硬化斑块显著减少,症状显著减轻,表明Slfn4基因具有促进主动脉粥样硬化斑块形成的作用。针对Slfn4上述功能,Slfn4可以作为药物靶标筛选治疗动脉粥样硬化疾病的药物;Slfn4抑制剂能够用于制备治疗动脉粥样硬化疾病的药物。
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公开(公告)号:CN118542941A
公开(公告)日:2024-08-27
申请号:CN202410676773.5
申请日:2024-05-29
Applicant: 新乡医学院
IPC: A61K45/00 , A61K31/7088 , A61P31/14 , A61P35/02
Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种HTLV‑1病毒感染阻断剂、其药物组合物、疫苗及其应用。本发明通过对比敲除Piezo2和未敲除Piezo2的Jurkat细胞(CD4+T细胞),并经过HTLV‑1病毒感染操作后检测细胞内HTLV‑1相关细胞因子(Tax、P19等)的mRNA表达水平,结果表明Jurkat细胞敲除Piezo2后,其感染HTLV‑1病毒的能力降低(HTLV‑1相关细胞因子Tax、P19等的mRNA表达水平降低),提示靶向Piezo2的抑制剂能够作为HTLV‑1病毒阻断剂,抑制HTLV‑1病毒感染T细胞,具有阻止HTLV‑1病毒感染,预防/抑制病毒感染致急性成人T淋巴细胞白血病的药用价值。
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公开(公告)号:CN108300738B
公开(公告)日:2020-12-18
申请号:CN201810102962.6
申请日:2018-02-01
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/90 , C12N15/89 , C12N9/22 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种NOD遗传背景的中性粒细胞缺失的人源化小鼠模型的制备方法,属于基因工程和遗传修饰技术领域。本发明的制备方法包括:将NOD小鼠中Gfi1基因敲除后,即得NOD遗传背景的中性粒细胞缺失的人源化小鼠模型。本发明首次在NOD遗传背景小鼠模型中利用CRISPR/Cas9系统实现了对控制小鼠中性粒细胞发育的关键基因Gfi1进行特异性敲除,获得一种在NOD遗传背景下中性粒细胞缺失的新的人源化小鼠动物模型。该小鼠模型具有接受异种移植的潜力,为开发全新的人源化小鼠提供了新的思路。
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公开(公告)号:CN110295147A
公开(公告)日:2019-10-01
申请号:CN201910662025.0
申请日:2019-07-22
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N5/10 , C12N15/90 , C12Q1/6886
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,尤其涉及一种食管癌细胞系中功能基因敲除后增殖表型的快速鉴定方法及其应用。本发明通过分别转染目的基因sgRNA与CRISPR/Cas9载体同源重组后的质粒和CRISPR/Cas9的空载,然后利用流式细胞仪分选细胞,接种至六孔板中。余下的细胞裂解获取DNA,PCR后作琼脂糖凝胶鉴定验证。分选的细胞在细胞培养箱中培养2周后,终止培养,以4%多聚甲醛固定后,再经结晶紫染色。此时可肉眼判断每组细胞的克隆形成数目,克隆形成率可准确反映细胞的增殖能力和群体依赖性。根据克隆形成结果即可快速判断食管癌功能基因敲除后的增殖表型,本发明具有高效率、高精确和高通量等优势。
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公开(公告)号:CN118384275A
公开(公告)日:2024-07-26
申请号:CN202410401105.1
申请日:2024-04-03
Applicant: 河南省精神病医院(新乡医学院第二附属医院)
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体为Zdhhc2基因在制备抗肿瘤免疫产品中的应用,T细胞中特异性敲除Zdhhc2基因能够显著抑制肿瘤生长,且肿瘤的大小和重量也均显著减小,会显著抑制Tregs细胞核中Foxp3蛋白的含量。
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公开(公告)号:CN112410341A
公开(公告)日:2021-02-26
申请号:CN202011388283.3
申请日:2020-12-01
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/90 , C12Q1/686 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种可诱导的中性粒细胞特异性剔除的小鼠模型构建方法。本发明通过CRISPR/Cas9基因组编辑技术对Ly6G基因位点进行编辑后获得了一种全新的Ly6G‑DTR基因敲入小鼠模型,实现了DTR的表达直接受Ly6G启动子来驱动,并通过流式细胞术验证了DTR仅在Ly6G表达的中性粒细胞中具有很高的表达量,而T细胞、B细胞中均未检测到DTR表达。试验证明,对Ly6G‑DTR基因敲入小鼠注射白喉毒素,能够高度特异性的清除中性粒细胞,且清除效率高达100%,能够实现中性粒细胞的彻底清除;此外,还可以通过调整白喉毒素的给药剂量和时间来诱导中性粒细胞的清除程度,为中性粒细胞在疾病的发生和发展中扮演角色的解析提供更好的动物遗传模型。
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公开(公告)号:CN107435051B
公开(公告)日:2020-06-02
申请号:CN201710633467.3
申请日:2017-07-28
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种通过CRISPR/Cas9系统快速获得大片段缺失的细胞系基因敲除方法,属于基因工程和遗传修饰领域。本发明改造pX458载体,使其带有DsRed2和ECFP,然后针对目标基因设计多个特异性的sgRNA位点,将其连接至改造载体中,转染细胞系后利用流式细胞仪对细胞群进行分选,可以非常快速获得基因组被编辑的单细胞,然后用PCR扩增单细胞DNA序列,通过凝胶电泳即可以从中挑选出具有大片段缺失的单细胞。本发明通过将CRISPR/Cas9系统、流式细胞仪单细胞分选和表达载体上的荧光蛋白筛选三者结合起来,可以在短时间内获得具有大片段缺失的阳性单克隆,极大地提高细胞系基因敲除工作效率。
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公开(公告)号:CN107435051A
公开(公告)日:2017-12-05
申请号:CN201710633467.3
申请日:2017-07-28
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种通过CRISPR/Cas9系统快速获得大片段缺失的细胞系基因敲除方法,属于基因工程和遗传修饰领域。本发明改造pX458载体,使其带有DsRed2和ECFP,然后针对目标基因设计多个特异性的sgRNA位点,将其连接至改造载体中,转染细胞系后利用流式细胞仪对细胞群进行分选,可以非常快速获得基因组被编辑的单细胞,然后用PCR扩增单细胞DNA序列,通过凝胶电泳即可以从中挑选出具有大片段缺失的单细胞。本发明通过将CRISPR/Cas9系统、流式细胞仪单细胞分选和表达载体上的荧光蛋白筛选三者结合起来,可以在短时间内获得具有大片段缺失的阳性单克隆,极大地提高细胞系基因敲除工作效率。
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公开(公告)号:CN116479046A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310265937.0
申请日:2023-03-20
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , A61K45/00 , A61P35/02 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及DOCK8基因在调控HTLV‑1病毒感染中的用途。所述用途具体为降低DOCK8基因表达水平的物质在制备体外促进HTLV‑1病毒感染的产品中的用途,DOCK8基因或其表达促进剂在制备用于抑制HTLV‑1病毒感染的产品中的应用,以及DOCK8基因或其表达促进剂在制备预防T淋巴细胞白血病的药物中的应用。本发明实验结果证明敲除DOCK8基因可以促进HTLV‑1病毒的感染与复制,提示过表达DOCK8基因可有效抑制HTLV‑1病毒感染,可为急性成人T淋巴细胞白血病(ATL)的靶向治疗奠定基础。
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