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公开(公告)号:DE102019110160A1
公开(公告)日:2020-10-22
申请号:DE102019110160
申请日:2019-04-17
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FÖLLING JONAS , FRIEDRICH LARS
Abstract: Beschrieben ist ein Fluoreszenzmikroskop, umfassend eine Anregungslichtquelle, die ausgebildet ist, eine gepulste oder modulierte Anregungslichtverteilung zu erzeugen, welche in einer Probe vorhandene Fluorophore zur spontanen Emission von Fluoreszenzphotonen anregt, eine Abregungslichtquelle, die ausgebildet ist, eine gepulste oder modulierte Abregungslichtverteilung zu erzeugen, welche die durch die Anregungslichtverteilung in der Probe angeregten Fluorophore im Wege einer stimulierten Emission von Fluoreszenzphotonen abregt, eine Beleuchtungseinheit, die ausgebildet ist, die Anregungslichtverteilung und die Abregungslichtverteilung derart zusammenzuführen, dass ein Intensitätsmaximum der Anregungslichtverteilung und ein Intensitätsminimum der Abregungslichtverteilung in einem Beleuchtungszielpunkt einander räumlich überlagert sind, einen Detektor, der ausgebildet ist, die aus dem Beleuchtungszielpunkt emittierten Fluoreszenzphotonen durch zeitkorrelierte Einzelphotonenzählung in Abhängigkeit ihrer Ankunftszeiten zu erfassen, und einen Prozessor. Der Prozessor ist ausgebildet, die in dem Beleuchtungszielpunkt erfassten Fluoreszenzphotonen hinsichtlich ihrer Ankunftszeiten auszuwerten und auf Basis dieser Auswertung eine Verzögerung zu steuern, die ein Lichtpuls oder eine Lichtmodulation der Abregungslichtverteilung am Ort des Beleuchtungszielpunktes gegenüber einem Lichtpuls oder einer Lichtmodulation der Anregungslichtverteilung aufweist.
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公开(公告)号:DE102019110157A1
公开(公告)日:2020-10-22
申请号:DE102019110157
申请日:2019-04-17
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FÖLLING JONAS , FRIEDRICH LARS
Abstract: Beschrieben ist ein Fluoreszenz-Rastermikroskop, umfassend eine Anregungslichtquelle, die ausgebildet ist, eine Anregungslichtverteilung zu erzeugen, welche in einer Probe vorhandene Fluorophore zur spontanen Emission von Fluoreszenzphotonen anregt; eine Abregungslichtquelle, die ausgebildet ist, eine Abregungslichtverteilung zu erzeugen, welche die durch die Anregungslichtverteilung in der Probe angeregten Fluorophore im Wege einer stimulierten Emission von Fluoreszenzphotonen abregt; eine Beleuchtungseinheit, die ausgebildet ist, die Anregungslichtverteilung und die Abregungslichtverteilung zu einer über mehrere Beleuchtungszielpunkte der Probe rasternden Lichtverteilung derart zusammenzuführen, dass ein Intensitätsmaximum der Anregungslichtverteilung und ein Intensitätsminimum der Abregungslichtverteilung in dem jeweiligen Beleuchtungszielpunkt einander räumlich überlagert sind; einen Detektor, der ausgebildet ist, die aus dem jeweiligen Beleuchtungszielpunkt emittierten Fluoreszenzphotonen in Abhängigkeit ihrer Ankunftszeiten zu erfassen, und einen Prozessor. Der Prozessor ist ausgebildet, die in dem jeweiligen Beleuchtungszielpunkt erfassten Fluoreszenzphotonen hinsichtlich ihrer Ankunftszeiten auszuwerten, auf Basis dieser Auswertung einen ersten Bildpunkt und einen zweiten Bildpunkt zu erzeugen, die den jeweiligen Beleuchtungszielpunkt repräsentieren, die ersten Bildpunkte zu einem ersten Probenbild und die zweiten Bildpunkte zu einem zweiten Probenbild zusammenzusetzen, und an Hand der beiden Probenbilder einen räumlichen Versatz zwischen dem Intensitätsmaximum der Anregungslichtverteilung und dem Intensitätsminimum der Abregungslichtverteilung zu bestimmen.
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公开(公告)号:DE102017121926A1
公开(公告)日:2019-03-21
申请号:DE102017121926
申请日:2017-09-21
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FRIEDRICH LARS , MRAWEK PATRIC
Abstract: Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren und eine Vorrichtung zur Ansteuerung eines akusto-optischen Elements (106) mit einem akusto-optischen Kristall (107) und einem piezoelektrischen Wandler (105) zur Versetzung des akusto-optischen Kristalls (107) in mechanische Schwingungen. Der piezoelektrische Wandler (105) wird gleichzeitig mit wenigstens zwei verschiedenen Frequenzen angeregt. Der piezoelektrische Wandler (105) wird zusätzlich mit wenigstens einer Mischfrequenz aus den wenigstens zwei verschiedenen Frequenzen angeregt. Des Weiteren betrifft die vorliegende Erfindung Verfahren ein Mikroskop.
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公开(公告)号:DE102019110157B4
公开(公告)日:2021-06-17
申请号:DE102019110157
申请日:2019-04-17
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FÖLLING JONAS , FRIEDRICH LARS
Abstract: Fluoreszenz-Rastermikroskop (100, 200) umfassend:eine Anregungslichtquelle (102), die ausgebildet ist, eine Anregungslichtverteilung (E) zu erzeugen, welche in einer Probe (104) vorhandene Fluorophore zur spontanen Emission von Fluoreszenzphotonen anregt,eine Abregungslichtquelle (106), die ausgebildet ist, eine Abregungslichtverteilung (D) zu erzeugen, welche die durch die Anregungslichtverteilung (E) in der Probe (104) angeregten Fluorophore im Wege einer stimulierten Emission von Fluoreszenzphotonen abregt,eine Beleuchtungseinheit (108), die ausgebildet ist, die Anregungslichtverteilung (E) und die Abregungslichtverteilung (D) zu einer über mehrere Beleuchtungszielpunkte der Probe (104) rasternden Lichtverteilung derart zusammenzuführen, dass ein Intensitätsmaximum (M) der Anregungslichtverteilung (E) und ein Intensitätsminimum (N) der Abregungslichtverteilung (D) in dem jeweiligen Beleuchtungszielpunkt einander räumlich überlagert sind,einen Detektor (110), der ausgebildet ist, die aus dem jeweiligen Beleuchtungszielpunkt emittierten Fluoreszenzphotonen in Abhängigkeit ihrer Ankunftszeiten zu erfassen, undeinen Prozessor (112), der ausgebildet ist,die in dem jeweiligen Beleuchtungszielpunkt erfassten Fluoreszenzphotonen hinsichtlich ihrer Ankunftszeiten auszuwerten,auf Basis dieser Auswertung einen ersten Bildpunkt und einen zweiten Bildpunkt zu erzeugen, die den jeweiligen Beleuchtungszielpunkt repräsentieren,die ersten Bildpunkte zu einem ersten Probenbild (P1) und die zweiten Bildpunkte zu einem zweiten Probenbild (P2) zusammenzusetzen, undan Hand der beiden Probenbilder (P1, P2) einen räumlichen Versatz (dx) zwischen dem Intensitätsmaximum (M) der Anregungslichtverteilung (E) und dem Intensitätsminimum (N) der Abregungslichtverteilung (D) zu bestimmen.
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5.
公开(公告)号:DE102016125630A1
公开(公告)日:2018-06-28
申请号:DE102016125630
申请日:2016-12-23
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FRIEDRICH LARS , FEHRER DIRK-OLIVER , KREMER MANUEL
Abstract: Im Hinblick auf das Erzielen eines flexiblen Wechsels zwischen verschiedenen Beugungsordnungen eines durch ein Volumengitter (1) geführten Lichtstrahls ist eine optische Anordnung mit einem Volumengitter (1) zur Beeinflussung der Strahlrichtung mindestens eines Lichtstrahls (2), dadurch gekennzeichnet, dass in einem Strahlengang vor dem Volumengitter (1) eine Umschalteinrichtung (4) zum Umschalten der Strahlrichtung und/oder Strahllage mindestens eines Lichtstrahls (2) von einer ersten Strahlrichtung und/oder Strahllage, in der der mindestens eine Lichtstrahl (2) nicht unter einem Akzeptanzwinkel des Volumengitters (1) auf das Volumengitter (1) trifft, zu einer zweiten Strahlrichtung und/oder Strahllage, in der der mindestens eine Lichtstrahl (2) unter dem Akzeptanzwinkel auf das Volumengitter (1) trifft, und/oder umgekehrt angeordnet ist. Des Weiteren ist ein Verfahren zur Beeinflussung der Strahlrichtung mindestens eines Lichtstrahls (2), insbesondere unter Verwendung der voranstehenden optischen Anordnung, angegeben.
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公开(公告)号:LU93117B1
公开(公告)日:2018-01-24
申请号:LU93117
申请日:2016-06-23
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FAHRBACH FLORIAN , FRIEDRICH LARS , KNEBEL WERNER
Abstract: Die Erfindung betrifft eine Beleuchtungsvorrichtung für ein Mikroskop zum Erzeugen einer Abregungs- oder Schaltlichtverteilung mit einer Lichtquelle, die ein Primärbeleuchtungslichtbündel erzeugt. Die Beleuchtungsvorrichtung ist gekennzeichnet durch eine Strahlteilungsvorrichtung, die das Primärbeleuchtungslichtbündel in zwei Teilbeleuchtungslichtbündel aufteilt, ein Beleuchtungsobjektiv, das die Teilbeleuchtungslichtbündel auf und/oder in eine Probe fokussiert, wobei die Teilbeleuchtungslichtbündel räumlich getrennt voneinander durch die Eintrittspupille des Beleuchtungsobjektivs verlaufen und sich nach dem Durchlaufen des Beleuchtungsobjektivs auf und/oder in der Probe räumlich überlagern, und durch wenigstens ein Phasenbeeinflussungsmittel, das einen relativen Phasenversatz der Teilbeleuchtungslichtbündel zueinander bewirkt derart, dass die Teilbeleuchtungslichtbündel in der Eintrittspupille des Beleuchtungsobjektivs einen Phasenversatz von n aufweisen. (Fig. 1) 93117
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公开(公告)号:DE102012009780A1
公开(公告)日:2013-11-21
申请号:DE102012009780
申请日:2012-05-18
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FOUQUET WERNHER , FRIEDRICH LARS , GISKE ARNOLD , KUSCHEL LIOBA DR , SCHNEIDER JUERGEN , SIEBER JOCHEN DR , WIDZGOWSKI BERND
IPC: G01N21/64
Abstract: Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Untersuchen einer Probe in Bezug auf die Lebensdauer eines angeregten Zustandes, insbesondere einer Fluoreszenzlebensdauer, und/oder in Bezug auf einen mit einer Lebensdauer eines angeregten Zustandes, insbesondere einer Fluoreszenzlebensdauer, korrelierten Eigenschaft einer Probe, wobei ein Probenbereich mit einer Folge von Anregungslichtpulsen beleuchtet wird. Das Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, dass zeitlich zwischen den Anregungslichtpulsen jeweils ausschließlich innerhalb eines Detektionszeitfensters jeweils die Lichtmenge und/oder die Anzahl der Photonen des von dem Probenbereich ausgehenden Detektionslichtes, insbesondere Fluoreszenzlichtes, gemessen wird, wobei wenigstens zwei Detektionszeitfenster zeitlich unterschiedlich lang sind.
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8.
公开(公告)号:DE102016125630B4
公开(公告)日:2022-07-28
申请号:DE102016125630
申请日:2016-12-23
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FRIEDRICH LARS , FEHRER DIRK-OLIVER , KREMER MANUEL
Abstract: Optische Anordnung mit einem Volumengitter (1) zur Beeinflussung der Strahlrichtung mindestens eines Lichtstrahls (2),wobei in einem Strahlengang vor dem Volumengitter (1) eine Umschalteinrichtung (4) zum Umschalten der Strahlrichtung und/oder Strahllage mindestens eines Lichtstrahls (2) zwischen einer ersten Strahlrichtung und/oder Strahllage, in der der mindestens eine Lichtstrahl (2) in einem ersten Schaltzustand nicht unter einem Akzeptanzwinkel des Volumengitters (1) auf das Volumengitter (1) trifft, und einer zweiten Strahlrichtung und/oder Strahllage, in der der mindestens eine Lichtstrahl (2) in einem zweiten Schaltzustand unter dem Akzeptanzwinkel auf das Volumengitter (1) trifft, angeordnet ist,wobei das Volumengitter (1) in dem ersten Schaltzustand als passives Element ohne Beugung des mindestens einen Lichtstrahls (2) und in dem zweiten Schaltzustand als aktives Element mit Beugung des mindestens einen Lichtstrahls (2) verwendbar ist, wobei die optische Anordnung eine optische Achse (11) hat, entlang der nach dem Volumengitter (1) ein gemeinsamer Strahlengang für die Ausbreitungsrichtung des in dem ersten Schaltzustand nicht gebeugten Lichtstrahls und für eine der möglichen Ausbreitungsrichtungen des in dem zweiten Schaltzustand gebeugten Lichtstrahls verläuft, unddas Volumengitter (1) ein akustooptischer Deflektor, AOD, ein akustooptischer Modulator, AOM, oder ein akustooptisch durchstimmbarer Filter, AOTF, ist.
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公开(公告)号:DE102018123381A1
公开(公告)日:2020-03-26
申请号:DE102018123381
申请日:2018-09-24
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FRIEDRICH LARS
Abstract: Bei einem Verfahren werden mindestens drei Beleuchtungspunkte 12, 13 zur Bildung eines Punktmusters 10 erzeugt. Das Punktmuster 10 wird zum Abrastern zumindest eines vorgegebenen Bereichs 40 einer Probe 102 entlang einer ersten Richtung und entlang einer zweiten Richtung bewegt. Das Punktmuster 10 hat mindestens zwei Beleuchtungspunkte 12 mit einer ersten Wellenlänge L1 und einen Beleuchtungspunkt 13 mit einer zweiten Wellenlänge L2. Eine Vorrichtung 110 zum Abrastern einer Probe 102 hat eine Beleuchtungseinheit 114, die mindestens drei Beleuchtungspunkte 12, 13 zur Bildung eines Punktmusters 10 erzeugt, eine Steuereinheit 116, welche die Beleuchtungseinheit 114 derart steuert, dass diese das Punktmuster 10 zum Abrastern zumindest eines vorgegebenen Bereichs 40 der Probe 102 entlang einer ersten Richtung und entlang einer zweiten Richtung bewegt. Das Punktmuster 10 hat mindestens zwei Beleuchtungspunkte 12 mit einer ersten Wellenlänge L1 und einen Beleuchtungspunkt 13 mit einer zweiten Wellenlänge L2.
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公开(公告)号:DE102017125688A1
公开(公告)日:2019-05-09
申请号:DE102017125688
申请日:2017-11-03
Applicant: LEICA MICROSYSTEMS
Inventor: FRIEDRICH LARS , BIRK HOLGER
Abstract: Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Abrastern einer Probe 100, bei dem mindestens zwei Beleuchtungspunkte 12 zur Bildung eines Punktmusters 10 erzeugt werden. Das Punktmuster 10 hat eine einstellbare Anzahl von Beleuchtungspunkten 12. Mindestens ein frei wählbarer Parameter zur Definition des Punktmusters 10 ist voreingestellt oder wird eingestellt. Das durch den frei wählbaren Parameter definierte Punktmuster 10 wird zum Abrastern zumindest eines vorgegebenen Bereichs 40 der Probe 10 entlang einer ersten Richtung zur Erzeugung von den Beleuchtungspunkten 12 des Punktmusters 10 zugeordneten Rasterzeilen 14 und entlang einer zweiten Richtung zur Erzeugung von den Rasterzeilen 14 jeweils nachfolgend erzeugten Rasterzeilen 14 bewegt.
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