一种重组蛋白油乳剂亚单位疫苗的破乳方法

    公开(公告)号:CN111228859A

    公开(公告)日:2020-06-05

    申请号:CN202010126855.4

    申请日:2020-02-28

    Abstract: 本发明是提供一种重组抗原蛋白亚单位疫苗的破乳方法,是将使用油乳剂作为佐剂的亚单位疫苗在冰浴上进行超声破乳;其中超声破乳,一种具体条件如下:1000-2500焦耳,超声2-5秒,停止2-5秒,共30-45个循环,超声结束后在室温条件下离心获得水相。本发明的方法简便、迅速,可在10分钟内完成;抗原分离效果好,同时可保证法氏囊病毒VP2蛋白的稳定性;破乳后分离出的水相中的VP2抗原含量可以采用琼脂扩散试验法进行检测;破乳后水相中抗原回收率高,达40%。适用于对marcol52佐剂乳化的鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗和其他基因工程亚单位疫苗进行破乳,进而对水相进行内毒素含量检测,从而评价成品疫苗的内毒素含量。

    一种应用Triton X‑114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法

    公开(公告)号:CN104356211B

    公开(公告)日:2017-08-29

    申请号:CN201410485475.4

    申请日:2014-09-22

    Abstract: 本发明公开了一种应用Triton X‑114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法,包括以下步骤:在100ml VP2重组蛋白质溶液中加入1ml Triton X‑114,充分混溶得到混合物A,将混合物A冰浴30min;混合物A在37℃条件下水浴放置10min,搅拌;25℃条件下,将搅拌均匀的混合物A在12000g下离心15min,移出上层水相;将用于去除内毒素的尿囊素直接加到上层水相中,得到混合物B,将混合物B在室温下震荡20min;25℃条件下,将震荡后的混合物B在5000g下离心5min,去除底层沉淀,保留上清溶液,上清液即为去除内毒素的VP2重组蛋白质溶液。本方法具有处理量大、处理周期短、生产成本低、去除内毒素彻底,可将内毒素含量控制在畜禽临床应用标准范围内的优点,并且符合规模化生产的需求。

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