公开(公告)号：KR1020060057397A

公开(公告)日：2006-05-26

申请号：KR1020040096546

申请日：2004-11-23

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 엄재구 ,  박종현 ,  계수정 ,  김용주 ,  이광녕 ,  박지용 ,  조남인

IPC: C12N15/79

Abstract: 본 발명은 구제역바이러스를 구성하는 구조단백질을 코딩하는 유전자와 비구조단백질인 3C 유전자를 적어도 포함하는 재조합베큘로바이러스를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 재조합베큘로바이러스를 숙주세포에 형질전환시켜 구제역바이러스 백신용 항원 및 진단용 항원제시용 재조합단백질을 제조하는 방법을 제공한다.
베큘로바이러스, 백미드, P1, 3C, 항원

公开(公告)号：KR1020050082512A

公开(公告)日：2005-08-24

申请号：KR1020040010973

申请日：2004-02-19

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 엄재구 ,  박종현 ,  계수정 ,  김용주 ,  이광녕 ,  조남인

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: G01N33/5308 ,  C07K16/44 ,  G01N33/6893

Abstract: 본 발명은 구제역 바이러스의 비구조단백질에 대한 펩타이드를 항원으로 포함하는 구제역 진단용 키트 및 이를 이용하여 구제역을 진단하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 서열번호 17 및 서열번호 18로 기재되는 아미노산 서열을 가지는 구제역 바이러스의 비구조단백질 2C 및 3B에 대한 펩타이드를 항원으로 포함하는 구제역 진단용 키트 및 이를 이용하여 발굽이 둘로 갈라진 모든 유제류에 대하여 구제역을 진단하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 키트에 포함되는 서열번호 17 및 서열번호 18로 기재되는 펩타이드는 종래의 구제역 진단키트에서 사용되는 재조합 단백질보다 백신 접종축과 감염축에 대한 민감도와 특이도가 뛰어나므로, 구제역감염축 및 백신접종축에 대한 감별 진단에 보다 효과적으로 사용될 수 있다.

公开(公告)号：KR1020040095824A

公开(公告)日：2004-11-16

申请号：KR1020030026809

申请日：2003-04-28

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) ,  프린스톤바이오메디테크코포레이션 ,  (주)피비엠이스트

Inventor： 조인수 ,  현방훈 ,  이광녕 ,  엄재구 ,  계수정 ,  고영준 ,  구복경 ,  주이석 ,  안수환 ,  김인중 ,  김옥경 ,  김희정 ,  장기용 ,  신남규 ,  황서하 ,  강제모 ,  김창호 ,  고송우

IPC: G01N33/543

CPC classification number: G01N33/56983 ,  G01N33/526 ,  G01N33/558 ,  G01N2333/09 ,  Y10S436/811

Abstract: PURPOSE: A method for diagnosis of foot and mouth disease and a diagnostic kit are provided, thereby rapidly and accurately diagnosing foot and mouth disease with a small amount of a sample, and easily and rapidly diagnosing foot and mouth disease of domestic animals in the field. CONSTITUTION: The method for diagnosis of foot and mouth disease comprises the steps of: (1) introducing a testing sample into a loading area of a strip; (2) combining a detecting reagent with a marker with a target material in the sample to prepare a complex; (3) developing the complex on a membrane; and (4) measuring the appearance change of a reaction portion having one or more fixing phase selected from antigen, antibody or hapten which is obtainable through the immune reaction from FMDV in a certain region of the membrane. The diagnostic kit comprises a reaction portion(13) having one or more fixing phase selected from antigen, antibody or hapten which is obtainable through the immune reaction from FMDV; a strip(1') having a control portion for determining normal operation on a certain region; a testing sample introducing portion; and a housing with a displaying window(4) for displaying reaction results in the reaction portion(13) and the control portion. on the strip(1').

Abstract translation: 目的：提供口蹄疫诊断方法和诊断试剂盒，用少量样品快速，准确地诊断口蹄疫，容易快速诊断现场家畜的口蹄疫 。 规定：口蹄疫诊断方法包括以下步骤：（1）将检测样品引入条带的装载区域; （2）将检测试剂与标记物与样品中的靶材料组合以制备复合物; （3）在膜上显影复合物; 和（4）测量具有一个或多个定影相的反应部分的外观变化，所述固定相选自抗原，抗体或半抗原，所述抗原，抗体或半抗原可通过膜的某一区域中的FMDV通过免疫反应获得。 诊断试剂盒包括具有选自抗原，抗体或半抗原的一个或多个固定相的反应部分（13），其可通过FMDV的免疫反应获得; 具有用于确定某一区域正常操作的控制部分的条带（1'）; 测试样品引入部分; 以及具有用于在反应部（13）和控制部显示反应结果的显示窗（4）的壳体。 在条带（1'）上。

公开(公告)号：KR101462985B1

公开(公告)日：2014-11-18

申请号：KR1020120150976

申请日：2012-12-21

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 최강석 ,  계수정 ,  김지예 ,  권준헌 ,  이희수 ,  성환우

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/45 ,  C12N15/85 ,  G01N33/68

Abstract: 본 발명은 제3형 조류파라믹소바이러스 (avian paramyxovirus-3, APMV-3)의 헤마글루티닌-뉴라미니다아제 (hemagglutinin-neuraminidase, HN) 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 바이러스 발현 벡터, 상기 벡터에 의해 형질전환된 제3형 조류파라믹소바이러스의 헤마글루티닌-뉴라미니다아제 단백질을 발현하는 재조합 곤충 세포, 상기 재조합 곤충세포가 발현하는 제3형 조류파라믹소바이러스의 헤마글루티닌-뉴라미니다아제 재조합 항원 단백질을 포함하는 제3형 조류파라믹소바이러스 진단용 조성물, 진단 키트 및 이를 이용한 진단 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 진단용 조성물은 살아있는 바이러스 취급에 따른 오염 가능성 없이 안전하고, 신속하게 대량의 샘플로부터 제3형 조류파라믹소바이러스의 감염 여부를 정확하게 진단할 수 있는 우수한 효과를 가지고 있다.

公开(公告)号：KR1020140081332A

公开(公告)日：2014-07-01

申请号：KR1020120150960

申请日：2012-12-21

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 최강석 ,  계수정 ,  김지예 ,  권준헌 ,  이희수 ,  성환우

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/45 ,  C12N15/85 ,  G01N33/68

Abstract: The present invention relates to a recombinant virus expression vector including a gene which encodes hemagglutinin-neuraminidase (HN) protein of avian paramyxovirus-2 (APMV-2); to recombinant insect cells transformed by the vector and expressing the HN protein of APMV-2; and to a diagnostic composition for APMV-2 including the recombinant antigenic HN protein of APMV-2 expressed by the recombinant insect cells, a diagnostic kit including the HN protein, and a diagnostic method using the HN protein. The diagnostic composition for APMV-2 according to the present invention is safe without the possibility of contamination caused by treatment of live viruses and has an excellent effect of quickly and accurately diagnosing whether there is infection with APMV-2 from a large number of samples.

Abstract translation: 本发明涉及包含编码禽副粘病毒-2（APMV-2）的血凝素 - 神经氨酸酶（HN）蛋白的基因的重组病毒表达载体; 通过载体转化并表达APMV-2的HN蛋白的重组昆虫细胞; 以及包含由重组昆虫细胞表达的APMV-2的重组抗原性HN蛋白质的APMV-2诊断组合物，包含HN蛋白质的诊断试剂盒和使用HN蛋白质的诊断方法。 根据本发明的APMV-2的诊断组合物是安全的，没有由病毒治疗引起的污染的可能性，并且具有快速且准确地诊断来自大量样品是否存在APMV-2感染的优异效果。

公开(公告)号：KR1020140081287A

公开(公告)日：2014-07-01

申请号：KR1020120150870

申请日：2012-12-21

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 최강석 ,  계수정 ,  김지예 ,  권준헌 ,  이희수 ,  성환우

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/45 ,  C12N15/85 ,  C07K14/08

Abstract: The present invention relates to avian paramyxovirus (APMV)-7 recombinant hemagglutinin-neuraminidase (HN) protein expressed by baculoviruses, and a diagnostic method of APMV-7 using the same. The baculoviruses expressing APMV-7 HN protein according to the present invention, or insect cells transfected with the baculoviruses produce a high concentration of APMV-7 HN protein; easily enable the production of a large number of antigens even in a general laboratory allowing cell culture by using the APMV-7 HN protein; and enable the production of an antigen diagnostic reagent within a week by an insect cell culture method, thereby having an effect of shortening the production period of the antigen diagnostic reagent by at least one week. In addition, an APMV-7 HN protein antigen produced by the present invention has hemagglutination ability for erythrocytes of a chicken and thermal stability; has exhibited a specific HI reaction by APMV-7 immune serum; and also has an effect of exhibiting the same test result in comparison with a HI reaction test result from a conventional antigen (APMV-7 virus antigen). Therefore, a conventional APMV-7 virus antigen diagnostic reagent can be replaced with the APMV-7 HN protein antigen produced by the present invention even if infectious APMV-7 viruses are not secured.

Abstract translation: 本发明涉及由杆状病毒表达的禽副粘病毒（APMV）-7重组血凝素 - 神经氨酸酶（HN）蛋白，以及使用其的APMV-7的诊断方法。 表达本发明的APMV-7HH蛋白的杆状病毒或用杆状病毒转染的昆虫细胞产生高浓度的APMV-7HH蛋白; 即使在通常使用APMV-7HH蛋白的细胞培养的实验室中也容易产生大量抗原; 并且能够通过昆虫细胞培养法在一周内生产抗原诊断试剂，从而具有将抗原诊断试剂的生产周期缩短至少一周的效果。 此外，本发明生产的APMV-7HH蛋白抗原具有鸡的红细胞的血细胞凝集能力和热稳定性; 已经通过APMV-7免疫血清显示出特异的HI反应; 并且与常规抗原（APMV-7病毒抗原）的HI反应试验结果相比，具有显示相同试验结果的效果。 因此，即使不能确保感染性APMV-7病毒，也可以用本发明生产的APMV-7HH蛋白抗原代替传统的APMV-7病毒抗原诊断试剂。

公开(公告)号：KR101395347B1

公开(公告)日：2014-05-19

申请号：KR1020110139057

申请日：2011-12-21

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 최강석 ,  전우진 ,  이은경 ,  계수정 ,  김새로미 ,  박미자 ,  권준헌

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/64 ,  C12N15/866 ,  C12P21/00

Abstract: 본 발명은 닭의 악성 전염병인 뉴캐슬병(Newcastle disease, ND) 진단에 관한 것이다.
상기와 같은 본 발명에 따르면, 뉴캐슬병 바이러스(Newcastle disease virus, NDV) HN(haemagglutinin-neuraminidase) 유전자를 포함하는 재조합 베큘로바이러스 발현벡터를 곤충세포에 형질감염시키고, 상기 곤충세포에서 발현된 NDV HN 단백질 및 이를 포함하는 혈구응집억제시험법(hemagglutination inhibition, HI법) 검사용 NDV 항원진단액을 제공함으로서, 살아있는 NDV를 취급하는 과정에서 발생할 수 있는 주변 오염이나 질병 전염의 위험성을 배제할 뿐만 아니라 신속하고 경제적인 방법으로 NDV 항원진단액을 대량생산할 수 있는 효과가 있다.

公开(公告)号：KR1020130071693A

公开(公告)日：2013-07-01

申请号：KR1020110139057

申请日：2011-12-21

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 최강석 ,  전우진 ,  이은경 ,  계수정 ,  김새로미 ,  박미자 ,  권준헌

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/64 ,  C12N15/866 ,  C12P21/00

Abstract: PURPOSE: An HN protein of Newcastle disease virus (NDV) and an NDV antigen diagnostic liquid containing the same for a hemagglutination inhibition (HI) method are provided to quickly and cheaply produce the NDV antigen diagnostic liquid without contamination or disease infection. CONSTITUTION: A method for preparing a recombinant baculovirus expression vector comprises the steps of: isolating virus genome RNA from NDV Lasota strain; synthesizing cDNA of HN protein of NDV protein using a reverse primer of sequence number 2 and RNA; performing PCR of cDNA using a forward primer of sequence number 1, and a reverse primer of sequence number 2 to synthesize DNA; treating the synthesized DNA with Xba1 and Hind III, and extracting DNA fragments; and inserting the DNA fragment into a multicloning site of pFastBac TM 1 expression vector with baculovirus polyhedron promoter. [Reference numerals] (AA) Novel method; (BB) Conventional method; (CC) Normal cells

Abstract translation: 目的：提供新城疫病毒（NDV）的HN蛋白和含有血细胞凝集抑制（HI）方法的NDV抗原诊断液，以快速，便宜地生产无污染或疾病感染的NDV抗原诊断液。 构成：制备重组杆状病毒表达载体的方法包括以下步骤：从NDV Lasota菌株中分离病毒基因组RNA; 使用序列号2和RNA的反向引物合成NDV蛋白的HN蛋白的cDNA; 使用序列号1的正向引物进行cDNA的PCR和序列号2的反向引物合成DNA; 用Xba1和Hind III处理合成的DNA，提取DNA片段; 并将DNA片段插入具有杆状病毒多面体启动子的pFastBac TM 1表达载体的多克隆位点。 （附图标记）（AA）新方法; （BB）常规方法; （CC）正常细胞

公开(公告)号：KR1020070046390A

公开(公告)日：2007-05-03

申请号：KR1020050103057

申请日：2005-10-31

Applicant: 주식회사 메디안디노스틱 ,  강원도 ,  대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 주후돈 ,  장병식 ,  박경민 ,  이현정 ,  이정자 ,  홍경수 ,  정기수 ,  서종억 ,  김지태 ,  이상록 ,  홍원우 ,  엄재구 ,  박종현 ,  계수정 ,  김용주 ,  이광녕

IPC: C12Q1/00 ,  G01N33/53

CPC classification number: C07K16/1009 ,  G01N33/56983 ,  G01N2333/09

Abstract: 본 발명은 구제역 바이러스 비구조단백질 3AB을 코딩하는 유전자를 대장균을 이용하여 발현한 재조합단백질과 구제역 바이러스의 비구조 단백질 3B의 특정 항원 결정부위(epitope)에 특이적인 반응성을 가지는 단일클론 항체를 생산하는 방법과 이를 통하여 생산된 단클론항체를 이용하여 구제역 바이러스 비구조단백질에 대한 항체를 검출하는 방법에 관한 것으로, 구제역 바이러스의 단백질 중 동일성이 가장 높은 부위인 비구조단백질에 대한 항체 검출 방법으로 특히 항원결정부위 타겟팅(epitope targeting)을 통하여 구제역 바이러스의 모든 혈청형에 대해 검출이 가능하여 혈청형별 항체 검사를 수행하는 하는 번거로움을 해소할 수 있는 장점을 제공한다.
본 발명에 의한 진단방법은 구제역 바이러스 비구조단백질의 일부인 3AB 펩타이드 또는 재조합단백질과 3B의 에피토프에 특이적으로 반응하는 단일클론 항체 조합을 이용하여 동물의 구제역바이러스의 비구조 단백질에 대한 항체 존재여부를 정량적으로 검출하여 구제역 바이러스 감염을 진단할 수 있는 방법이다. 또한 이 기술은 구제역바이러스에 감염되는 대부분의 유제류에 대해서 각 축종별 이차항체를 따로 사용하는 번거로움 없이 항체 검출이 가능하며 이 기술을 이용하여 차단효소면역검사법 (Blocking ELISA), 경쟁효소면역검사법(Competitive ELISA) 등 다양한 검사기술에 사용하여 구제역 바이러스에 대한 감염항체를 검사할 수 있다.
구제역, 구제역 바이러스, 비구조단백질, 3AB, 단일클론 항체, 차단 효소면역검사법

公开(公告)号：KR100531760B1

公开(公告)日：2005-11-29

申请号：KR1020030026809

申请日：2003-04-28

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) ,  프린스톤바이오메디테크코포레이션 ,  (주)피비엠이스트

Inventor： 조인수 ,  현방훈 ,  이광녕 ,  엄재구 ,  계수정 ,  고영준 ,  구복경 ,  주이석 ,  안수환 ,  김인중 ,  김옥경 ,  김희정 ,  장기용 ,  신남규 ,  황서하 ,  강제모 ,  김창호 ,  고송우

IPC: G01N33/543

CPC classification number: G01N33/56983 ,  G01N33/526 ,  G01N33/558 ,  G01N2333/09 ,  Y10S436/811

Abstract: 본 발명은 (1) 검체를 스트립의 로딩영역에 일정량 투입하는 단계; (2) 소정의 표지가 구비된 검출시약과 상기 검체 중의 분석물과 결합시켜 복합체를 형성하는 단계; (3) 상기 복합체를 전개막에 전개하는 단계; 및 (4) 상기 전개막 상의 소정 영역에 FMDV로부터 유래된 또는 FMDV로부터 면역반응을 통해 얻어질 수 있는 항원, 항체 또는 합텐 중에서 선택되는 적어도 하나 이상의 고정상을 갖는 반응부의 외관 변화를 관찰하여 구제역 바이러스의 감염여부를 판단하는 단계를 포함하는 구제역 바이러스 감염 진단방법을 제공한다.
또한 본 발명은 상기 진단방법을 구현하기 위한 진단 키트로서, FMDV로부터 유래된 또는 FMDV로부터 면역반응을 통해 얻어질 수 있는 항원, 항체 또는 합텐 중에서 선택되는 적어도 하나 이상의 고정상을 갖는 반응부(13) 및 정상동작여부를 판단하기 위한 대조부(14)가 전개막(9)상의 소정영역에 구비된 스트립(1); 상기 스트립(1)을 각종 오염물질로부터 보호하며, 적어도 검체를 투입하기 위한 검체투입부(2) 및 스트립상의 반응부(13)와 대조부(14)에서의 반응결과를 관찰하기 위한 표시창(4)이 구비된 하우징(20)을 포함하는 구제역 바이러스 감염 진단용 키트를 제공한다.