Abstract:
본 발명은 구제역바이러스를 구성하는 구조단백질을 코딩하는 유전자와 비구조단백질인 3C 유전자를 적어도 포함하는 재조합베큘로바이러스를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 재조합베큘로바이러스를 숙주세포에 형질전환시켜 구제역바이러스 백신용 항원 및 진단용 항원제시용 재조합단백질을 제조하는 방법을 제공한다. 베큘로바이러스, 백미드, P1, 3C, 항원
Abstract:
본 발명은 구제역 바이러스의 비구조단백질에 대한 펩타이드를 항원으로 포함하는 구제역 진단용 키트 및 이를 이용하여 구제역을 진단하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 서열번호 17 및 서열번호 18로 기재되는 아미노산 서열을 가지는 구제역 바이러스의 비구조단백질 2C 및 3B에 대한 펩타이드를 항원으로 포함하는 구제역 진단용 키트 및 이를 이용하여 발굽이 둘로 갈라진 모든 유제류에 대하여 구제역을 진단하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 키트에 포함되는 서열번호 17 및 서열번호 18로 기재되는 펩타이드는 종래의 구제역 진단키트에서 사용되는 재조합 단백질보다 백신 접종축과 감염축에 대한 민감도와 특이도가 뛰어나므로, 구제역감염축 및 백신접종축에 대한 감별 진단에 보다 효과적으로 사용될 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: Diagnostic methods of foot-and-mouth disease using recombinant 3ABC non-structural protein expressed in insect cells and a monoclonal antibody is provided, thereby more rapidly and accurately diagnosing the foot-and-mouth disease than the prior methods. CONSTITUTION: A gene encoding a recombinant 3ABC non-structural protein derived from Korean foot-and-mouth disease virus O/SKR/2000 has the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1. A recombinant baculovirus to be expressed in insect cells is prepared by co-transfection with a recombinant vector containing the recombinant 3ABC non-structural protein gene of SEQ ID NO: 1. The recombinant 3ABC non-structural protein is expressed by infection of the insect cells with the recombinant baculovirus. A hybridoma cell line 3F-11(KCTC 10138BP) is prepared by introducing the recombinant 3ABC non-structural protein expressed in E. coli into an animal, collecting an immunized cell from the animal and fusing the immunized cell with a cancer cell. A monoclonal antibody is produced from the hybridoma cell line 3F-11(KCTC 10138BP). A diagnostic method of foot-and-mouth disease comprises the steps of: (1) diluting the recombinant 3ABC non-structural protein in a coating buffer solution and pouring the diluate on a plate; (2) reacting the testing serum with the plate; (3) reacting a conjugate, which binds with an antibody for foot-and-mouth disease virus in the testing serum and has an enzyme, a radioactive material or a fluorescent material, with the testing serum; and (4) measuring intensity of the enzyme reaction, fluorescence reaction or radiation reaction with the conjugate.
Abstract translation:目的:提供使用在昆虫细胞中表达的重组3ABC非结构蛋白和单克隆抗体的口蹄疫诊断方法,从而比现有方法更快速,准确地诊断口蹄疫。 构成:编码来自韩国口蹄疫病毒O / SKR / 2000的重组体3ABC非结构蛋白的基因具有SEQ ID NO:1的核苷酸序列。在昆虫细胞中表达的重组杆状病毒通过 用含有SEQ ID NO:1的重组3ABC非结构蛋白基因的重组载体共转染。重组体3ABC非结构蛋白用重组杆状病毒感染昆虫细胞表达。 通过将在大肠杆菌中表达的重组3ABC非结构蛋白质导入动物中,从动物中收集免疫的细胞并将免疫的细胞与癌细胞融合来制备杂交瘤细胞系3F-11(KCTC 10138BP)。 从杂交瘤细胞系3F-11(KCTC 10138BP)产生单克隆抗体。 口蹄疫的诊断方法包括以下步骤:(1)在包被缓冲溶液中稀释重组体3ABC非结构蛋白,将稀释液倒入平板上; (2)使测试血清与板反应; (3)使与测试血清中的口蹄疫病毒抗体结合并具有酶,放射性物质或荧光材料的缀合物与测试血清反应; 和(4)测量酶反应的强度,荧光反应或与缀合物的辐射反应。
Abstract:
본 발명은 구제역 바이러스 비구조단백질 3AB을 코딩하는 유전자를 대장균을 이용하여 발현한 재조합단백질과 구제역 바이러스의 비구조 단백질 3B의 특정 항원 결정부위(epitope)에 특이적인 반응성을 가지는 단일클론 항체를 생산하는 방법과 이를 통하여 생산된 단클론항체를 이용하여 구제역 바이러스 비구조단백질에 대한 항체를 검출하는 방법에 관한 것으로, 구제역 바이러스의 단백질 중 동일성이 가장 높은 부위인 비구조단백질에 대한 항체 검출 방법으로 특히 항원결정부위 타겟팅(epitope targeting)을 통하여 구제역 바이러스의 모든 혈청형에 대해 검출이 가능하여 혈청형별 항체 검사를 수행하는 하는 번거로움을 해소할 수 있는 장점을 제공한다. 본 발명에 의한 진단방법은 구제역 바이러스 비구조단백질의 일부인 3AB 펩타이드 또는 재조합단백질과 3B의 에피토프에 특이적으로 반응하는 단일클론 항체 조합을 이용하여 동물의 구제역바이러스의 비구조 단백질에 대한 항체 존재여부를 정량적으로 검출하여 구제역 바이러스 감염을 진단할 수 있는 방법이다. 또한 이 기술은 구제역바이러스에 감염되는 대부분의 유제류에 대해서 각 축종별 이차항체를 따로 사용하는 번거로움 없이 항체 검출이 가능하며 이 기술을 이용하여 차단효소면역검사법 (Blocking ELISA), 경쟁효소면역검사법(Competitive ELISA) 등 다양한 검사기술에 사용하여 구제역 바이러스에 대한 감염항체를 검사할 수 있다. 구제역, 구제역 바이러스, 비구조단백질, 3AB, 단일클론 항체, 차단 효소면역검사법
Abstract:
본 발명은 구제역바이러스를 구성하는 구조단백질을 코딩하는 유전자와 비구조단백질인 3C 유전자를 적어도 포함하는 재조합베큘로바이러스를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 재조합베큘로바이러스를 숙주세포에 형질전환시켜 구제역바이러스 백신용 항원 및 진단용 항원제시용 재조합단백질을 제조하는 방법을 제공한다. 베큘로바이러스, 백미드, P1, 3C, 항원
Abstract:
본 발명은 구제역 바이러스의 비구조단백질에 대한 펩타이드를 항원으로 포함하는 구제역 진단용 키트 및 이를 이용하여 구제역을 진단하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 서열번호 17 및 서열번호 18로 기재되는 아미노산 서열을 가지는 구제역 바이러스의 비구조단백질 2C 및 3B에 대한 펩타이드를 항원으로 포함하는 구제역 진단용 키트 및 이를 이용하여 발굽이 둘로 갈라진 모든 유제류에 대하여 구제역을 진단하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 키트에 포함되는 서열번호 17 및 서열번호 18로 기재되는 펩타이드는 종래의 구제역 진단키트에서 사용되는 재조합 단백질보다 백신 접종축과 감염축에 대한 민감도와 특이도가 뛰어나므로, 구제역감염축 및 백신접종축에 대한 감별 진단에 보다 효과적으로 사용될 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: A method for diagnosis of foot and mouth disease and a diagnostic kit are provided, thereby rapidly and accurately diagnosing foot and mouth disease with a small amount of a sample, and easily and rapidly diagnosing foot and mouth disease of domestic animals in the field. CONSTITUTION: The method for diagnosis of foot and mouth disease comprises the steps of: (1) introducing a testing sample into a loading area of a strip; (2) combining a detecting reagent with a marker with a target material in the sample to prepare a complex; (3) developing the complex on a membrane; and (4) measuring the appearance change of a reaction portion having one or more fixing phase selected from antigen, antibody or hapten which is obtainable through the immune reaction from FMDV in a certain region of the membrane. The diagnostic kit comprises a reaction portion(13) having one or more fixing phase selected from antigen, antibody or hapten which is obtainable through the immune reaction from FMDV; a strip(1') having a control portion for determining normal operation on a certain region; a testing sample introducing portion; and a housing with a displaying window(4) for displaying reaction results in the reaction portion(13) and the control portion. on the strip(1').