Abstract:
본 발명은 표적 유전자 또는 이의 돌연변이의 검출방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 (a) 중합효소연쇄반응(Polymerase Chain Reaction)으로 증폭된 표적 유전자의 증폭산물에 대하여, 표적 유전자의 5' 영역 및 3' 영역에 각각 상보적으로 결합하는 제 1 프로브 및 제 2 프로브를 사용하여 리가제 반응(Ligase reaction)을 수행하는 단계; (b) 상기 (a) 단계의 리가제 반응산물에 대해, 상기 반응산물에 포함된 제 1 프로브에 상보적으로 결합하는 절단효소 증폭 프라이머, 제 2 프로브의 절단효소 인식 염기서열을 인지하는 절단 효소, 및 중합효소의 혼합용액을 첨가하고 절단효소 증폭반응(Nicking Amplification)을 수행하는 단계; 및 (c) 상기 (b) 단계의 증폭반응에 의한 DNA 절편의 생성유무를 확인하여, 표적 유전자의 존재를 확인하는 단계를 포함하는 표적 유전자 또는 이의 돌연변이의 검출방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 표적 유전자 또는 이의 돌연변이 검출방법은 임의의 짧은 길이의 DNA 조각을 대량 합성하여 질량분석하기 때문에 민감도, 특이도 및 재현성이 우수할 뿐만 아니라 다수의 시료를 대상으로 표적 유전자의 여러 개의 돌연변이 여부를 동시에 신속 정확하게 분석할 수 있어 유전적 요인에 의한 질병의 예방, 조기 진단 및 개인 맞춤 의약품 개발과 처방뿐만 아니라, 현장진단을 위한 바이오센서의 플랫폼으로 유용하다.
Abstract:
본 발명은 비뇨생식기 감염 질환 진단을 위한 올리고뉴클레오티드 프로브를 포함하는 DNA칩에 관한 것으로, 보다 구체적으로, 비뇨생식기 감염 질환 원인균 14종에 대한 올리고뉴클레오티드 프로브가 고정되어 있는 비뇨생식기 감염 질환 진단용 DNA칩에 관한 것이다. 본 발명에 따른 비뇨생식기 감염 질환 진단용 DNA칩은 민감도, 특이도 및 재현성이 우수할 뿐만 아니라 다양한 검체를 대상으로 복합감염까지 포함하여 14종의 비뇨생식기 감염 질환 원인균의 감염 여부를 신속 정확하게 분석할 수 있어 비뇨생식기 감염 질환에 대한 1차 진료기관의 진단 및 처치에 유용하게 사용할 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: A method for detecting metal ion using abnormal nucleic acid polymerase activity is provided to cheaply and easily detect metal ions. CONSTITUTION: A method for detecting metal ion comprises: a step of amplifying template DNA with DNA polymerase using forward primer and reverse primer; and a step of detecting the presence of silver ion. The amplified product is detected by fluorescence signal using electrophoresis analysis or fluorescence dye. The detection of silver ion is performed using logic gate.
Abstract:
PURPOSE: A method for detecting nucleic acids using nuclease with peroxidase activity is provided to measure target nucleic acids and to check numerical result value. CONSTITUTION: A method for electrochemical detection of target nucleic acids using nuclease comprises: a step of amplifying the target nucleic acids using a forward primer and a reverse primer; a step of mixing the amplified product, enzyme with 5'-exonuclease activity, 4-chloronaphthol, hydrogen peroxide, hemin, and electron carrier and to applying to diagnostic electrode; and a step of measuring change of impedance to detect the target nucleic acids.
Abstract:
본 발명은 금 나노입자의 색전이 현상을 이용한 핵산 검출방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 티올기가 표지된 핵산 증폭산물과 금 나노입자 용액의 혼합용액에 염을 첨가할 경우 금 나노입자가 붉은색을 나타내고 티올기가 표지된 핵산 증폭산물이 없을 경우 파란색을 나타내는 것을 특징으로 하는, 금 나노입자의 색전이 현상을 이용한 핵산 검출방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른, 금 나노입자의 색전이 현상에 의한 핵산 검출방법을 이용하면 표적핵산을 단시간 내에 육안으로 간단하게 확인할 수 있고, 또한 현장진단 관련 장치 및 시스템을 개발할 수 있다. 금 나노입자, 색전이, 티올기, 핵산검출, 침전, 핵산 증폭산물
Abstract:
PURPOSE: A method for detecting nucleic acids using color shift of gold nanoparticles is provided to simply check a target nucleic acid by naked eye and to develop diagnosis device and system. CONSTITUTION: A method for detecting nucleic acids using color shift of gold nanoparticles comprises: a step of preparing amplified products of a thiol group-labeled target nucleic acid; a step of preparing a mixture solution of the amplified products and gold nanoparticle solution; a step of adding salt to the mixture solution to induce precipitation of gold nanopaticles; and a step of observing color shift of gold nanoparticles by precipitation.
Abstract:
본 발명은 비정상적인 핵산 중합 효소의 활성을 이용한 금속이온의 검출방법 및 논리게이트에 관한 것으로, 보다 구체적으로, 티민-티민 염기쌍과 수은 이온의 특이적인 결합 또는 시토신-시토신 염기쌍과 은 이온의 특이적인 결합을 통해 형성되는 비상보적인 티민-수은-티민 또는 시토신-은-시토신 염기쌍에 의해 유도되는 비정상적인 핵산 중합 효소의 활성을 이용한 수은 또는 은의 검출방법 및 이를 이용한 논리게이트에 관한 것이다. 본 발명에 따른 비정상적인 핵산 중합 효소의 활성을 이용한 금속이온의 검출방법은 비용이 저렴하고 손쉽게 금속이온을 검출할 수 있으며, 값비싼 RNA 또는 키메릭 DNA가 필요하여 비용이 많이 들고, 시스템 디자인 및 작동의 어려움을 가져 실질적인 적용이 힘들었던 종래 핵산 기반의 논리게이트와 비교하여 비용이 저렴하고, 논리적인 출력 신호 조절이 가능한 분자 수준의 논리게이트로의 실질적인 적용이 용이하다.
Abstract:
PURPOSE: A method for detecting metal ions using the activity of abnormal nucleic acid polymerase is provided to easily detect metal ions and to enable substantial application into a logical gate. CONSTITUTION: A method for detecting mercury ions comprises: a step of amplifying template DNA using DNA polymerase and primer designed to form a thymine-thymine base pair; and a step of detecting the presence of mercury ions by the presence of the amplified product. The amplified product is detected by electrophoretic analysis or fluorescent dye. The presence of the mercury ions is detected by a logic gate.
Abstract:
PURPOSE: A novel PNA(peptide nucleic acid) and hybridized PNA oligomer using the same is provided to selectively bind to RNA and to treat and diagnose various diseases targeting RNA. CONSTITUTION: A gamma3-PNA monomer molecule is denoted by chemical formula 18. A method for preparing gamma3-PNA comprises: a step of performing ring-opening reaction of (R)-azidomethyl gamma-butylolactone(chemical formula 1) to obtain a compound of chemical formula 2; a step of reacting nucleic acid with the compound of chemical formula 2 or performing protection reaction of exocyclic amino or hydroxyl group of nucleic acid after reacting nucleic acid with the compound of chemical formula 2; a step of reducing azide from the compound which is bound to nucleic acid; and a step of attaching a protection group to obtain a compound of chemical formula 19.
Abstract:
본 발명은 표적물질에 특이적으로 결합하는 압타머(aptamer)의 구조 변화 특성을 이용한 등온 핵산 증폭방법 및 이를 이용한 초고감도 생체물질 검출방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 생리활성 물질에 특이적으로 결합하는 압타머의 구조 변화 특성을 이용한 등온 핵산 증폭방법 (APINA: APtamer-based Isothermal Nucleic acid Amplification) 및 이를 이용하여 DNA, 단백질, 또는 생리활성 물질을 고감도로 검출할 수 있는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 현재의 핵산검사를 현장진단 기술로 구현하는데 가장 큰 걸림돌인 기존 핵산 증폭방법(PCR)의 온도 변화를 요구하는 문제점을 해결함으로서, 체외진단 시장에서 경쟁력을 가지게 되어 막대한 경제, 산업적 가치의 창출을 기대할 수 있고, 상기 개발된 압타머 기반 등온 핵산증폭 기술(APINA)을 면역검사에도 적용하여 표적물질 (DNA, 단백질 및 생리활성물질)을 초고감도로 검출하기에 유용하다.