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公开(公告)号：CN106497973B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201611019369.2
申请日：2016-11-18
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种人类和其他哺乳动物细胞附着体表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。该附着体表达载体上插入有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的分段β‑干扰素MAR序列(或者与该序列95％以上同源的核苷酸序列)，相较包含全长MAR序列或387bp MAR序列的表达载体，该载体能高效、持续、稳定地表达外源目的基因，尤其是包含E段MAR序列的载体表达最佳，可用于基因治疗。在该载体中，分段MAR序列插入载体的多克隆位点也即eGFP下游处，一方面能克服转基因沉默，另一方面能提高目的蛋白的表达水平以及后续单克隆细胞株筛选的有效性。
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公开(公告)号：CN117683812A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311539461.1
申请日：2023-11-18
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及外源基因表达用调控元件、应用、表达盒、载体、表达系统、试剂盒。本发明提供一种调控元件，并优化确定其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，或者核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。通过试验验证，本发明提供的调控元件作为功能元件构建重组表达系统，能够调控外源重组蛋白基因表达，相比现有同类型调控元件，本发明提供的调控元件提高稳定表达水平约1.3~1.7倍。
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公开(公告)号：CN117106697A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202311250024.8
申请日：2023-09-26
Applicant: 新乡医学院 , 新乡银海医学检验实验室有限公司 , 北京同立海源生物科技有限公司
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明涉及无血清培养基技术领域。本发明提供了Palbociclib在制备CHO细胞无血清培养基中的应用。通过添加Palbociclib制备一种CHO细胞无血清培养基，所述Palbociclib在该CHO细胞无血清培养基中的终浓度为2‑50μM。本发明CHO细胞无血清培养基中还包括维生素C，与Palbociclib搭配使用，能够更好的提高目的蛋白在CHO细胞中的表达水平，增加细胞特异性生产力，促进CHO细胞生长、提高细胞活率和产量，同时达到降低生产成本的目的。
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公开(公告)号：CN117004651A
公开(公告)日：2023-11-07
申请号：CN202310773723.4
申请日：2023-06-28
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及YTHDC2过表达载体的应用、CHO细胞系的应用、重组蛋白表达系统。本发明将YTHDC2过表达载体转染至CHO细胞构建过表达YTHDC2的CHO细胞系，该CHO细胞系能够显著提高YTHDC2的mRNA和蛋白表达水平，同时该CHO细胞系作为重组蛋白表达用宿主细胞，相比野生型CHO细胞系，提升重组蛋白表达量，有效克服了目前CHO细胞表达系统存在的表达水平较低的问题；进一步的，本发明以含转座子元件的出发载体，构建YTHDC2过表达载体，并且通过PBase持续高效催化YTHDC2过表达载体整合到CHO细胞的基因中，实现CHO细胞中YTHDC2的稳定过表达。
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公开(公告)号：CN116790670A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202311034790.0
申请日：2023-08-17
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及YTHDF3过表达载体的应用、CHO细胞系的应用、重组蛋白表达系统。本发明将YTHDF3过表达载体转染至CHO细胞构建过表达YTHDF3的CHO细胞系，该CHO细胞系能够显著提高YTHDF3的mRNA和蛋白表达水平，同时该CHO细胞系作为重组蛋白表达用宿主细胞，相比野生型CHO细胞系，提升重组蛋白表达量，有效克服了目前CHO细胞表达系统存在的表达水平较低的问题；进一步的，本发明以含转座子元件的出发载体，构建YTHDF3过表达载体，并且通过PBase持续高效催化YTHDF3过表达载体整合到CHO细胞的基因中，实现CHO细胞中YTHDF3的稳定过表达。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116790664A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310631107.5
申请日：2023-05-31
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N5/10 , C07K16/24 , C07K14/765
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及敲低SUV39H1基因表达的CHO细胞系的应用、重组蛋白表达系统。本发明构建靶向SUV39H1基因的shRNA表达载体，利用SSR重组酶实现干扰序列DNA载体高效稳转，催化shRNA载体整合到细胞基因组，可明显提升干扰效率；敲低SUV39H1基因表达，应用于重组蛋白表达系统，能够显著提高目的蛋白表达水平，有效解决了CHO细胞表达系统在生物制药生产过程中存在的表达水平较低的问题。
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公开(公告)号：CN114316065B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202111269645.1
申请日：2021-10-29
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于重组蛋白细胞培养技术领域，具体涉及小分子肽及其应用、细胞培养基、核酸分子。本发明将细胞穿膜肽氨基酸序列与自噬调控蛋白的功能结构域氨基酸序列整合，合成小分子肽，作为重组蛋白表达的哺乳动物细胞培养基的补充添加物，能够促进细胞自噬，实现重组蛋白在细胞的高效表达。
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公开(公告)号：CN105802997B
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN201610270090.5
申请日：2016-04-27
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明公开了一种人类及哺乳动物细胞附着体表达载体、构建方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。本发明以pEGFP‑C1为出发载体构建含核基质结合区特征性序列(如SEQ ID NO:1所示)的附着体表达载体，并以EF‑1α启动子(如SEQ ID NO:2所示)替换pEGFP‑C1载体上原CMV启动子，得到的pEME载体能高效、持续、稳定表达外源目的基因。
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公开(公告)号：CN119709864A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202411913965.X
申请日：2024-12-24
Applicant: 新乡医学院 , 常州南京大学高新技术研究院
IPC: C12N15/85 , C12N15/67 , C12N15/64 , C12N15/113 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供了Aars1基因在调控外源重组蛋白表达中的应用，属于重组蛋白表达、基因工程及细胞培养技术领域。本发明将靶向Aars1基因的shRNA片段插入整合到piggyBac转座子载体中，构建得到了抑制/沉默Aars1基因的重组载体和Aars1低表达的CHO细胞系，该CHO细胞系能够显著降低Aars1的mRNA表达水平，同时该CHO细胞系作为重组蛋白表达用宿主细胞，相比野生型CHO细胞系，能够提升重组蛋白表达量(重组阿达木单抗表达量增加了3.1±0.18倍)，有效的克服了目前CHO细胞表达系统表达水平较低的问题，可用于进一步构建重组蛋白表达系统或试剂盒。
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公开(公告)号：CN117535292A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311439094.8
申请日：2023-11-01
Applicant: 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C07K16/24
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及let‑7a在CHO细胞重组蛋白表达中的应用、表达系统。本发明通过在CHO细胞重组蛋白表达系统中增加miRNA let‑7a的量提高重组蛋白表达量，并且设计试验验证在CHO细胞重组蛋白表达系统中直接转染let‑7a mimics能够提高目的蛋白，例如阿达木抗体，表达量；同时，通过试验验证，将let‑7a mimics编码核酸序列插入出发载体构建let‑7a过表达载体，将let‑7a过表达载体转染至CHO细胞重组蛋白表达系统，增加miRNA let‑7a的量，更高效提高目的蛋白表达量。
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