公开(公告)号：KR100737446B1

公开(公告)日：2007-07-09

申请号：KR1020040096546

申请日：2004-11-23

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 엄재구 ,  박종현 ,  계수정 ,  김용주 ,  이광녕 ,  박지용 ,  조남인

IPC: C12N15/79

Abstract: 본 발명은 구제역바이러스를 구성하는 구조단백질을 코딩하는 유전자와 비구조단백질인 3C 유전자를 적어도 포함하는 재조합베큘로바이러스를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 재조합베큘로바이러스를 숙주세포에 형질전환시켜 구제역바이러스 백신용 항원 및 진단용 항원제시용 재조합단백질을 제조하는 방법을 제공한다.
베큘로바이러스, 백미드, P1, 3C, 항원

公开(公告)号：KR100536848B1

公开(公告)日：2005-12-19

申请号：KR1020040010973

申请日：2004-02-19

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 엄재구 ,  박종현 ,  계수정 ,  김용주 ,  이광녕 ,  조남인

IPC: C12Q1/68

Abstract: 본 발명은 구제역 바이러스의 비구조단백질에 대한 펩타이드를 항원으로 포함하는 구제역 진단용 키트 및 이를 이용하여 구제역을 진단하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 서열번호 17 및 서열번호 18로 기재되는 아미노산 서열을 가지는 구제역 바이러스의 비구조단백질 2C 및 3B에 대한 펩타이드를 항원으로 포함하는 구제역 진단용 키트 및 이를 이용하여 발굽이 둘로 갈라진 모든 유제류에 대하여 구제역을 진단하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 키트에 포함되는 서열번호 17 및 서열번호 18로 기재되는 펩타이드는 종래의 구제역 진단키트에서 사용되는 재조합 단백질보다 백신 접종축과 감염축에 대한 민감도와 특이도가 뛰어나므로, 구제역감염축 및 백신접종축에 대한 감별 진단에 보다 효과적으로 사용될 수 있다.

公开(公告)号：KR1020030052858A

公开(公告)日：2003-06-27

申请号：KR1020010082976

申请日：2001-12-21

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 권창희 ,  현방훈 ,  고영준 ,  이광녕 ,  구복경 ,  엄재구 ,  나진주 ,  남향미 ,  박지용 ,  계수정 ,  김인중 ,  이세영 ,  최광석 ,  손현주 ,  주이석

IPC: C12N15/33

CPC classification number: C12N15/866 ,  C07K14/005 ,  C07K16/1009 ,  C07K2317/14 ,  C12N5/163 ,  C12N2770/32131 ,  G01N33/56983 ,  G01N33/577 ,  G01N2333/09

Abstract: PURPOSE: Diagnostic methods of foot-and-mouth disease using recombinant 3ABC non-structural protein expressed in insect cells and a monoclonal antibody is provided, thereby more rapidly and accurately diagnosing the foot-and-mouth disease than the prior methods. CONSTITUTION: A gene encoding a recombinant 3ABC non-structural protein derived from Korean foot-and-mouth disease virus O/SKR/2000 has the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1. A recombinant baculovirus to be expressed in insect cells is prepared by co-transfection with a recombinant vector containing the recombinant 3ABC non-structural protein gene of SEQ ID NO: 1. The recombinant 3ABC non-structural protein is expressed by infection of the insect cells with the recombinant baculovirus. A hybridoma cell line 3F-11(KCTC 10138BP) is prepared by introducing the recombinant 3ABC non-structural protein expressed in E. coli into an animal, collecting an immunized cell from the animal and fusing the immunized cell with a cancer cell. A monoclonal antibody is produced from the hybridoma cell line 3F-11(KCTC 10138BP). A diagnostic method of foot-and-mouth disease comprises the steps of: (1) diluting the recombinant 3ABC non-structural protein in a coating buffer solution and pouring the diluate on a plate; (2) reacting the testing serum with the plate; (3) reacting a conjugate, which binds with an antibody for foot-and-mouth disease virus in the testing serum and has an enzyme, a radioactive material or a fluorescent material, with the testing serum; and (4) measuring intensity of the enzyme reaction, fluorescence reaction or radiation reaction with the conjugate.

Abstract translation: 目的：提供使用在昆虫细胞中表达的重组3ABC非结构蛋白和单克隆抗体的口蹄疫诊断方法，从而比现有方法更快速，准确地诊断口蹄疫。 构成：编码来自韩国口蹄疫病毒O / SKR / 2000的重组体3ABC非结构蛋白的基​​因具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列。在昆虫细胞中表达的重组杆状病毒通过 用含有SEQ ID NO：1的重组3ABC非结构蛋白基因的重组载体共转染。重组体3ABC非结构蛋白用重组杆状病毒感染昆虫细胞表达。 通过将在大肠杆菌中表达的重组3ABC非结构蛋白质导入动物中，从动物中收集免疫的细胞并将免疫的细胞与癌细胞融合来制备杂交瘤细胞系3F-11（KCTC 10138BP）。 从杂交瘤细胞系3F-11（KCTC 10138BP）产生单克隆抗体。 口蹄疫的诊断方法包括以下步骤：（1）在包被缓冲溶液中稀释重组体3ABC非结构蛋白，将稀释液倒入平板上; （2）使测试血清与板反应; （3）使与测试血清中的口蹄疫病毒抗体结合并具有酶，放射性物质或荧光材料的缀合物与测试血清反应; 和（4）测量酶反应的强度，荧光反应或与缀合物的辐射反应。