公开(公告)号：WO2015199282A1

公开(公告)日：2015-12-30

申请号：PCT/KR2014/008882

申请日：2014-09-24

Applicant: 충남대학교산학협력단

Inventor： 안현주 ,  김재한 ,  정하늘 ,  오명진

IPC: C07H1/06

CPC classification number: C08H1/00 ,  C08B37/0003 ,  C08B37/006 ,  C12P19/12 ,  C12Y114/18001 ,  C12Y305/01052

Abstract: 본 발명은 비드 고정화 (Bead Immobiliization) 방법을 이용하여 N-당쇄와 O-당쇄가 동시에 존재하는 당단백질에서 O-당쇄만을 선택적으로 추출 및 분리할 수 있는 방법에 관한 것이다. 좀 더 구체적으로는 N-당쇄와 O-당쇄가 모두 존재하는 당단백질을 비드에 고정시키고 N-당쇄만 선택적으로 분리할 수 있는 특이적 효소인 PNGase F를 이용하여 N-당쇄를 제거한 후 β-제거 (β-elimination)를 통해 O-당쇄만을 선택적으로 분리하는 것이다. 본 발명의 비파괴적인 O-당쇄 분리방법은 다양한 당단백질에서 O-당쇄 분석에 효과적으로 이용될 수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及一种能够通过使用珠固定方法从N-糖苷和O-聚糖共存的糖蛋白中仅选择性提取和分离O-聚糖的方法。 更具体地，其中N-聚糖和O-聚糖共存的糖蛋白固定在珠粒上; 使用能够选择性分离N-聚糖的特异性酶PNGase F来除去N-聚糖; 然后仅通过β-消除选择性地分离O-聚糖。 本发明的O-聚糖分离的非破坏性方法可以有效地用于各种糖蛋白中的O-聚糖分析。

公开(公告)号：WO2016200099A2

公开(公告)日：2016-12-15

申请号：PCT/KR2016/005907

申请日：2016-06-03

Applicant: 충남대학교산학협력단 ,  한국기초과학지원연구원

Inventor： 안현주 ,  김재한 ,  김범진 ,  최종순 ,  이동기 ,  권요셉

IPC: G01N27/62 ,  G01N33/487 ,  G01N1/28 ,  G01N1/40 ,  H01J49/40 ,  H01J49/04

CPC classification number: G01N1/28 ,  G01N1/40 ,  G01N27/62 ,  G01N33/487 ,  H01J49/04 ,  H01J49/40

Abstract: 본 발명은 인간 타액 특이적 당사슬을 이용하여 인간 타액을 검증하는 방법에 관한 것이다. 인간 타액을 비롯한 인간 체액들과 쥐 타액 등을 대상으로 N-당사슬을 분리 및 정제하여 질량분석을 수행한 결과, 인간 타액에는 네 개 이상의 퓨코스를 포함하는 고퓨코실화 N-당사슬이 50% 이상 함유되어 다른 인간 체액이나 다른 동물의 타액과 구별되는 특징이 있어, 법의학 분야 등에 응용할 수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及通过使用人唾液特异性糖链检测人唾液的方法。 通过使用包含人唾液，大鼠唾液等的人体液体的N-聚糖分离和纯化进行质谱分析，结果表明，人唾液与其他动物的其他人体液或唾液不同，其特征在于由 包含至少4个岩藻糖的至少50％高度岩藻糖化的N-聚糖，因此本发明可以应用于取证领域等。

公开(公告)号：WO2018026235A1

公开(公告)日：2018-02-08

申请号：PCT/KR2017/008448

申请日：2017-08-04

Applicant: 충남대학교산학협력단 ,  (주)글라이칸

Inventor： 안현주 ,  김재한 ,  오명진 ,  김운용 ,  이주아 ,  백학선 ,  이성현

IPC: G01N33/68

CPC classification number: G01N33/68

Abstract: 과제: 단백질의 당쇄화는 체내외 환경변화에 매우 민감하여 암을 포함한 다양한 질병에 직접적으로 관련되어 진단시스템에 활용하려는 연구가 진행되고 있다. 당사슬을 이용한 질병진단 방법은 매우 효율적이나, 당사슬을 분리하여 진단에 사용할 경우 시료 전처리, 질량분석 및 데이터 처리에 많은 시간과 노력이 요구되고 원하지 않는 인공조성물이 생성될 수 있다. 해결수단: 이를 최소화하고자 당쇄화된 단백질을 있는 그대로 분석하여 암진단에 적용하는 새로운 암진단 분석방법을 발명하였다. 본 발명에서는 다량체 구조의 햅토글로빈의 이황화 결합을 절단하여 알파 사슬과 베타 사슬로 분리한 후 전분자량을 측정함으로써 베타 사슬의 당쇄화 패턴을 분석하였다. 당사슬을 분리하지 않고 이황화 결합 절단이라는 최소한의 전처리만 수행한 후 10분 이내의 짧은 질량분석시간 소요 및 신속한 데이터 처리를 통해 단백질의 당쇄화 패턴을 인식함으로써 질병진단시 빠르고 정확한 진단방법으로 활용할 수 있다.

Abstract translation: 挑战：蛋白质糖基化对身体环境的变化高度敏感，正在研究将其用于与包括癌症在内的各种疾病直接相关的诊断系统。 使用寡糖来诊断疾病是非常有效的，但是当将寡糖分离并用于诊断时，样品制备，质量分析和数据处理需要很多时间和精力，并且可以产生不希望的人造组合物。 解决方案：为了尽量减少这种情况，我们发明了一种新的癌症诊断分析方法，可以将糖基化蛋白原样分析并应用于癌症诊断。 在本发明中，将多因子结构的二硫键切断，将其分成α链和β链，然后测定总分子量，分析β链的糖链模式。 不通过经由二硫键裂解识别的蛋白的糖基化模式，至少去除寡糖，走短质谱10分钟内后仅进行前处理和快速的数据处理可以作为一个快速和准确的诊断时的疾病的诊断 。

公开(公告)号：WO2021154015A1

公开(公告)日：2021-08-05

申请号：PCT/KR2021/001183

申请日：2021-01-29

Applicant: 충남대학교산학협력단

Inventor： 김재한 ,  안현주 ,  이현준 ,  서나리

IPC: G01N30/88 ,  G01N30/72 ,  G01N30/60

Abstract: 본 발명은 반려동물의 미량의 혈액 시료에서 면역 정보를 내포하고 있는 당사슬의 조성과 발현 정도를 측정하여 퇴행성 질환인 골관절염을 진단하는 방법 및 그 바이오마커에 관한 것이다. 본 발명은 최초로 반려동물 골관절염 진단을 위한 바이오마커 및 이를 이용한 반려동물 골관절염 진단방법을 제공한다.

公开(公告)号：WO2014163421A1

公开(公告)日：2014-10-09

申请号：PCT/KR2014/002912

申请日：2014-04-04

Applicant: 충남대학교산학협력단

Inventor： 안현주 ,  김재한 ,  한찬영

IPC: G01N33/53 ,  G01N33/68 ,  G01N30/00

CPC classification number: G01N33/66 ,  G01N2030/8822

Abstract: 본 발명은 인간 혈청 N-당쇄 지도, 인간 혈청 N-당쇄 라이브러리 및 이를 이용하여 혈청 시료를 검증하는 방법에 관한 것이다. 정상인과 환자의 혈청시료 200여 개로부터 당쇄를 분리하여 분석한 결과, 정상인과 환자 모두에게서 100% 발견되는 18개의 기본 당쇄를 찾아내었다. 이 기본 당쇄 18종의 존재는 인간 혈청시료가 채취 및 처리과정에서 문제가 없음을 검증하는데 이용될 수 있다. 또한, 본 발명자들은 인간 혈청 단백질의 N-당쇄는 이론적으로는 가능한 당쇄 종류가 매우 많지만, 실제로 N-당쇄는 도 3a, 3b, 3c에 나타낸 것과 같은 구조만이 존재함을 밝혔으며, 존재하는 구조의 N-당쇄들의 출현 백분율을 밝힘으로써 출현 확률이 낮은 N-당쇄들을 특정 질환의 마커로 사용할 수 있음을 밝혔다.

Abstract translation: 本发明涉及人血清N-糖链图，人血清N-糖链文库，以及使用其进行血清样品检测的方法。 通过分离和分析来自正常受试者和患者的200多个血清样品的糖链的结果，确定了在正常受试者和患者的100％中发现的18个基本糖链。 这些18种类型的碱性糖链的存在可用于验证在人血清样品的收集和处理过程中没有问题。 此外，本发明人证明，尽管人血清蛋白的N-糖链具有大量理论上可能的糖链类型，但是仅有如图1所示的结构。 对于实际的N-糖链，3a，3b和3c是存在的。 此外，通过确定现有结构的N-糖链的出现百分比，本发明人证明，出现概率低的N-糖链可用作特定疾病的标记物。

公开(公告)号：WO2016199998A1

公开(公告)日：2016-12-15

申请号：PCT/KR2015/013780

申请日：2015-12-16

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김정회 ,  이성현 ,  박승열 ,  안현주 ,  김재한 ,  오명진 ,  김진만 ,  이주아

IPC: G01N30/72 ,  G01N30/86 ,  G01N30/88

CPC classification number: G01N33/57419 ,  C07H5/04 ,  G01N30/72 ,  G01N30/7233 ,  G01N30/86 ,  G01N30/8631 ,  G01N30/88 ,  G01N2030/027 ,  G01N2560/00

Abstract: 본 발명은 당쇄변화 탐지를 통한 대장암 진단방법에 관한 것으로서, 좀 더 구체적으로는 질량분석방법을 통해 탐지된 대장암 환자 유래 당단백질의 N-당쇄화 (N-linked glycosylation) 변화에 따른 특정 당쇄구조들이 증가 또는 감소하거나 유의하게 변화한 경우, 발굴된 N-당쇄 구조들은 진단마커로서 질량분석방법을 활용하는 대장암 진단 방법에 유용하게 사용될 수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及通过检测聚糖改变来诊断结肠癌的方法。 更具体地，在通过质谱法检测到的根据来自结肠癌患者的糖蛋白的N-连接糖基化的变化的情况下，特异性聚糖结构增加，减少或显着改变，检测到的N-聚糖结构可有效地用作 在使用质谱法的结肠癌诊断方法中的诊断制造商。

公开(公告)号：WO2015126030A1

公开(公告)日：2015-08-27

申请号：PCT/KR2014/009921

申请日：2014-10-22

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김정회 ,  이성현 ,  박승열 ,  김진만 ,  안현주 ,  김재한 ,  오명진

IPC: C12Q1/68 ,  G01N33/574 ,  G01N33/68

CPC classification number: G01N33/57446 ,  G01N2333/00 ,  G01N2333/47 ,  G01N2400/38

Abstract: 본 발명은 당쇄변화 탐지를 통한 위암 진단방법 및 위암 진단용 킷트에 관한 것으로서, 좀 더 구체적으로는 렉틴 및 질량분석방법을 통해 탐지된 위암 환자 유래 햅토글로빈 (haptoglobin)의 N-당쇄화 (N-linked glycosylation) 변화 중 퓨코실화의 증가, 가지 (antennary) 구분에 따른 특정 당쇄구조들이 증가하거나 유의하게 변화한 경우, 또는 N-당쇄의 고 만노스 구조가 정상인에 비해 감소하는 것을 바탕으로, 상기 발굴된 N-당쇄 구조들은 진단마커로서 렉틴 또는 질량분석방법을 활용하는 위암 진단 방법 및 위암을 진단하는 킷트에 유용하게 사용될 수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及通过检测聚糖变化的胃癌诊断方法以及用于胃癌诊断的试剂盒。 更具体地，基于通过凝集素和质谱法检测的胃癌患者来源的触珠蛋白的N-连接糖基化的变化，岩藻糖基化的增加，特定聚糖结构的增加或显着变化根据分类 的触角，或与正常人相比，N-连接聚糖的高甘露糖结构的降低，所发现的N-糖基化结构可以有利地用于使用凝集素作为诊断标记或质谱的胃癌诊断方法 ，以及用于诊断胃癌的试剂盒。

公开(公告)号：KR1020160146102A

公开(公告)日：2016-12-21

申请号：KR1020150082751

申请日：2015-06-11

Applicant: 한국과학기술원 ,  충남대학교산학협력단

Inventor： 김정회 ,  이성현 ,  박승열 ,  안현주 ,  김재한 ,  오명진 ,  이주아 ,  김진만

IPC: G01N30/72 ,  G01N30/86 ,  G01N30/88

CPC classification number: G01N33/57419 ,  C07H5/04 ,  G01N30/72 ,  G01N30/7233 ,  G01N30/86 ,  G01N30/8631 ,  G01N30/88 ,  G01N2030/027 ,  G01N2560/00

Abstract: 본발명은당쇄변화탐지를통한대장암진단방법에관한것으로서, 좀더 구체적으로는질량분석방법을통해탐지된대장암환자유래당단백질의 N-당쇄화 (N-linked glycosylation) 변화에따른특정당쇄구조들이증가또는감소하거나유의하게변화한경우, 발굴된 N-당쇄구조들은진단마커로서질량분석방법을활용하는대장암진단방법에유용하게사용될수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及通过检测聚糖改变来诊断结肠癌的方法。 更具体地说，在根据通过质谱法检测的结肠癌患者的糖蛋白的N-连接糖基化的N-连接糖基化的改变而增加特异性聚糖结构，降低或显着改变的情况下，检测到的N-聚糖结构可有效地用作 在使用质谱法的结肠癌诊断方法中的诊断者。

公开(公告)号：KR101484969B1

公开(公告)日：2015-01-22

申请号：KR1020140035062

申请日：2014-03-26

Applicant: 충남대학교산학협력단 ,  한국과학기술원

Inventor： 안현주 ,  김재한 ,  씨리너스화 ,  오명진 ,  김정회 ,  이성현 ,  박승열

IPC: C07K1/14 ,  G01N33/574 ,  G01N33/68 ,  G01N33/58

Abstract: 본 발명은 바이오마커로서 부위 특이적으로 Ｎ-당쇄화된 당펩타이드를 이용하여 바이오마커의 N-당쇄변화를 탐지하는 방법에 관한 것이다. 좀 더 구체적으로, 본 발명에서는 비특이적 단백질 분해효소를 이용하여 혈액의 햅토글로빈을 펩타이드와 당펩타이드로 분해하였으며, 207번과 211번 등 총 4개의 N-당쇄화 부위를 가진 당펩타이드만을 분리하였다. 본 발명자들은 이렇게 얻은 4개의 N-당쇄화 부위에 결합된 당펩타이드를 이용하여 종양 특이적 바이오마커를 발굴함으로써 고특이적이고 고감도인 종양의 N-당쇄변화를 탐지하는 방법을 발명하기에 이르렀다.

Abstract translation: 本发明涉及通过使用位点直接N-糖基化糖肽作为生物标志物来检测生物标志物的N-聚糖的变化的方法。 具体地说，在本发明中，通过使用非特异性蛋白酶将血液的触珠蛋白分解为肽和糖肽，分离出具有总共4个N-糖基化位点的糖肽，例如No.207，No.211等。 本发明人通过使用与同样获得的四个N-糖基化位点结合的糖肽发现了肿瘤特异性生物标志物，从而开发了以高特异性和高灵敏度检测肿瘤N-聚糖变化的方法。

公开(公告)号：KR101530210B1

公开(公告)日：2015-06-22

申请号：KR1020140135330

申请日：2014-10-07

Applicant: 충남대학교산학협력단 ,  한국과학기술원

Inventor： 안현주 ,  김재한 ,  씨리너스화 ,  오명진 ,  김정회 ,  이성현 ,  박승열

IPC: C07K1/14 ,  G01N33/68

CPC classification number: C12Q1/6886

Abstract: 본발명은바이오마커로서부위특이적으로 N-당쇄화된당펩타이드를이용하여바이오마커의 N-당쇄변화를탐지하는방법에관한것이다. 좀더 구체적으로, 본발명에서는비특이적단백질분해효소를이용하여혈액의햅토글로빈을펩타이드와당펩타이드로분해하였으며, 207번과 211번등 총 4개의 N-당쇄화부위를가진당펩타이드만을분리하였다. 본발명자들은이렇게얻은 4개의 N-당쇄화부위에결합된당펩타이드를이용하여종양특이적바이오마커를발굴함으로써고특이적이고고감도인종양의 N-당쇄변화를탐지하는방법을발명하기에이르렀다.

Abstract translation: 本发明涉及使用N-糖肽作为生物标志物的特殊部位检测生物标志物的N-糖交换的方法。 更具体地，本发明用非特异性蛋白质分解酶将血液的触珠蛋白溶解成肽和糖肽，并分离总共四个N-糖基化部分的糖肽，包括数字207,211等。本发明的发明人发现 具有与N-糖基化部分结合的糖肽的肿瘤特异性生物标志物，本发明人能够找到检测高特异性和高敏感性肿瘤的N-糖交换的方法。