公开(公告)号：KR1020150085550A

公开(公告)日：2015-07-24

申请号：KR1020140004983

申请日：2014-01-15

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  박진서 ,  한규형 ,  음원식 ,  황현숙 ,  조성우 ,  김덕수 ,  김대원

IPC: A61K48/00 ,  A61K38/16 ,  A61P25/16 ,  A61P25/00

CPC classification number: A61K38/44 ,  A23V2200/322 ,  C12N15/62

Abstract: 헴옥시게네이즈-1 (Heme oxygenase-1; HO-1)은헴을이산화탄소, 빌리버딘및 다양한생화학적프로세스에서중요한기능을하는 Fe로분해한다. 본발명자들은 SH-SY5Y 세포와파킨슨병마우스모델에서산화스트레스에대한 HO-1의보호기능을시험하였다. 웨스턴블랏과형광현미경분석을통하여본 발명자들은 PEP-1-HO-1 융합단백질이세포막을가로질러인간신경아세포종 (neuroblastoma) 세포인 SH-SY5Y 내로잘 투과할뿐만아니라, 투과된융합단백질이활성산소종생성및 MPP(1-methyl-4-phenylpyridinium) 이온에의해일어나는세포사멸을저해함을밝혔다. 반면, SH-SY5Y 세포내로투과하지못하는 HO-1 단백질은 MPP에의해유도되는세포독성및 활성산소종생성을감소시키지못하였다. 뿐만아니라, 복강주사한 PEP-1-HO-1 융합단백질은마우스뇌의혈관-뇌장벽을투과하였다. 파킨슨병마우스모델에서, PEP-1-HO-1 융합단백질은 MPP로유도되는독성및 도파민뉴런사멸에대하여 HO-1 단백질또는 PEP-1 펩타이드처리군과달리현저한보호효과를나타내었다. 따라서, HO-1 융합단백질은파킨슨병을포함하는신경질환에대하여치료제로서이용가능하다.

Abstract translation: 本发明涉及将血红素分解成二氧化碳，胆红素或Fe ^（2+）的血红素加氧酶-1（HO-1），其在各种生物化学过程中起关键作用。 本发明人已经测试了SH-SY5Y细胞和帕金森病小鼠模型中HO-1对氧化应激的保护作用。 使用蛋白质印迹和视觉显微镜分析，发明人已经发现PEP-1-HO-1融合蛋白可以容易地穿透细胞膜并进入称为SH-SY5Y的神经母细胞瘤细胞并且还抑制活性氧的产生和 由MPP ^（+）（1-甲基-4-苯基吡啶鎓）离子引起的细胞破坏。 相反，不能穿透SH-SY5Y细胞的HO-1蛋白不能减少MPP ^（+）诱导的细胞毒性和活性氧的产生。 此外，注射到胃中的PEP-1-HO-1融合蛋白穿透小鼠的血管 - 脑壁。 在帕金森病模型中，与HO-1蛋白或PEP-1肽组不同，PEP-1-HO-1融合蛋白对MPP ^（+）诱导的毒性或多巴胺神经元凋亡具有良好的保护作用 。 因此，HO-1融合蛋白可用于治疗包括帕金森病在内的神经疾病。

公开(公告)号：KR1020130003243A

公开(公告)日：2013-01-09

申请号：KR1020110064429

申请日：2011-06-30

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  황현숙 ,  음원식 ,  김대원 ,  박진서 ,  김덕수

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  A61P25/00

CPC classification number: C07K14/4703 ,  A61K38/1709 ,  A61K47/64 ,  C07K14/005 ,  C07K2319/01

Abstract: PURPOSE: A PRAS40 fusion protein with improved cell penetration efficiency is provided to effectively suppress reactive oxygen species(ROS) generation and to be used s a therapeutic agent for treating Parkinson`s disease. CONSTITUTION: A PRAS40 fusion protein contains 9-15 amino acid residues and improves cell penetration efficiency by covalent bond of a transport domain with at least one end of PRAS40(proline-rich Akt substrate 40). The transport domain is HIV Tat 49-57 residue, oligolysine, oligoarginine, or oligo(lysine,arginine). A pharmaceutical composition for preventing and treating Parkinson`s disease, Huntingtun`s disease, Alzheimer`s disease, cerebral ischemia contains the PRAS40 fusion protein as an active ingredient and a pharmaceutically acceptable carrier.

Abstract translation: 目的：提供具有改善的细胞渗透效率的PRAS40融合蛋白，以有效抑制活性氧（ROS）产生，并被用作治疗帕金森病的治疗剂。 构成：PRAS40融合蛋白含有9-15个氨基酸残基，并通过PRAS40（富含脯氨酸的Akt底物40）的至少一端的转运结构域的共价键提高细胞的穿透效率。 转运结构域是HIV Tat 49-57残基，寡聚赖氨酸，寡精氨酸或寡聚（赖氨酸，精氨酸）。 用于预防和治疗帕金森病，亨特屯病，阿尔茨海默病，脑缺血的药物组合物含有PRAS40融合蛋白作为活性成分和药学上可接受的载体。

公开(公告)号：KR1020150095984A

公开(公告)日：2015-08-24

申请号：KR1020140016451

申请日：2014-02-13

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  박진서 ,  권혁일 ,  음원식 ,  황현숙 ,  김현아 ,  김송자 ,  김대원

IPC: A61K38/16 ,  A61K47/48 ,  A61P19/02

CPC classification number: A61K38/16 ,  C07K14/00 ,  C12N15/62 ,  Y10S514/825

Abstract: 본 발명은 염증성 관절염 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 관한 것으로서, 좀더 구체적으로는 연골조직 내로 투과가 가능한 SIRT2 융합단백질을 유효성분으로 함유하는 염증성 관절염 예방 또는 질환 치료용 약제학적 조성물에 관한 것이다.

Abstract translation: 本发明涉及用于预防或治疗炎性关节炎的药物组合物。 更具体地说，该药物组合物含有能够穿透软骨作为有效成分的SIRT2融合蛋白。 SIRT2蛋白包括与转运结构域PEP-1共价结合的N-末端。

公开(公告)号：KR1020140010536A

公开(公告)日：2014-01-27

申请号：KR1020120076387

申请日：2012-07-13

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  음원식 ,  김대원 ,  황현숙 ,  박진서 ,  한규형 ,  조윤신 ,  김덕수

IPC: A61K38/17 ,  A61K38/16 ,  A61P29/00

CPC classification number: A61K38/1709 ,  C07K14/47 ,  C12N15/62 ,  Y10S514/886

Abstract: Refined SIRT2 fusion protein is penetrated into a Raw 264.7 cell in a time and injection amount dependent way, and protects the cell from cell death and cytotoxicity induced by lipopolysaccharide and hydrogen peroxide. The penetrated SIRT2 fusion protein also controls the activation of NF-kB and MAPKs (mitogen-activated protein kinases), and the expression of cytokine.

Abstract translation: 精制的SIRT2融合蛋白以时间和注射量依赖的方式穿透到Raw 264.7细胞中，并保护细胞免受细胞死亡和由脂多糖和过氧化氢诱导的细胞毒性。 穿透的SIRT2融合蛋白也控制NF-kB和MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）的活化以及细胞因子的表达。

公开(公告)号：KR1020130134530A

公开(公告)日：2013-12-10

申请号：KR1020120058107

申请日：2012-05-31

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  김대원 ,  안은희 ,  음원식 ,  황현숙 ,  박진서 ,  조윤신 ,  김덕수

IPC: A61K38/17 ,  A61K38/16 ,  A61K48/00 ,  A61P25/16

CPC classification number: A61K38/177 ,  Y10S530/839

Abstract: Phosphoprotein enriched in astrocytes-15 (PEA-15) is a small protein created in neurons or astrocytic cells in brain. This protein which is a multi-functional protein can increase the cell survival rate thanks to its antiapoptotic and proapoptotic properties. Parkinson's disease is a neurodegenerative disease that dopamine neurons are reduced in substantia nigra in brain. The inventers found out that PEP-1-PEA-15 fusion protein can protect dopamine neurons from oxidation stress in SH-SY5Y neuroblastom cells and animals suffering from Parkinson's disease. It is confirmed that PEP-1-PEA-15 fusion protein can be transferred to SH-SY5Y cells and substantia nigra through western blot analysis. PEP-1-PEA-15 fusion protein prevents the active oxygen species production DNA tessellation induced to MPP+ and induces SH-SY5Y cell survival. Transmitted PEP-1-PEA-15 fusion protein improves the expression level of Bcl-2 protein but reduces the impression level of Bax protein. Also, PEP-1-PEA-15 fusion protein is transmitted to substantia nigra and prevents dopamine neuron cell death in substantia nigra. Therefore, PEP-1-PEA-15 fusion protein can prevent and treat Parkinson's disease.

Abstract translation: 富含星形胶质细胞-15（PEA-15）的磷酸蛋白是在脑中神经元或星形细胞细胞中产生的小蛋白质。 作为多功能蛋白质的蛋白质可以通过其抗细胞凋亡和促凋亡性质而增加细胞存活率。 帕金森病是神经退行性疾病，多巴胺神经元在脑黑质中减少。 发明人发现PEP-1-PEA-15融合蛋白可以保护多巴胺神经元免受SH-SY5Y神经母细胞和帕金森病动物的氧化应激。 证实通过western印迹分析可以将PEP-1-PEA-15融合蛋白转移至SH-SY5Y细胞和黑质。 PEP-1-PEA-15融合蛋白可阻止活性氧生成诱导MPP +的DNA镶嵌，诱导SH-SY5Y细胞存活。 转染的PEP-1-PEA-15融合蛋白提高了Bcl-2蛋白的表达水平，降低了Bax蛋白的印象。 此外，PEP-1-PEA-15融合蛋白传播到黑质，并防止黑质中的多巴胺神经元细胞死亡。 因此，PEP-1-PEA-15融合蛋白可以预防和治疗帕金森病。

公开(公告)号：KR1020120119561A

公开(公告)日：2012-10-31

申请号：KR1020110037572

申请日：2011-04-22

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  김대원 ,  박진서 ,  음원식 ,  황현숙 ,  김덕수 ,  강태천 ,  김준 ,  임순성

IPC: A61K47/42 ,  A61K9/38 ,  C07K19/00 ,  C12N9/02

CPC classification number: A61K47/64 ,  A23L33/17 ,  A61K8/64 ,  A61K47/22 ,  Y10S514/824 ,  Y10S514/885 ,  Y10S514/886

Abstract: PURPOSE: An increase method of fused protein into living cells or organs by adding levosulpiride to fused protein in which protein transport domains and therapeutic protein are covalently bonded is provided to increase therapeutic effects of protein medicines for various diseases. CONSTITUTION: An increase method of fused protein into living cells or organs is processed by adding levosulpiride to fused protein in which protein transport domains and therapeutic protein are covalently bonded. The levosulpiride is primarily processed in the living cells or organs than the fused protein. A protein transport domain is Tat, PEP-1, oligolysine, oligo arginine or oligo(lysine and arginine). The therapeutic protein is rpS3. A composition for preventing and treating inflammatory diseases comprises fused proteins in which is covalently bonded with the protein transport domain and levosulpiride. The inflammation therapeutic protein is rpS3. A composition for preventing and improving skin external application comprises fused proteins in which is covalently bonded with the protein transport domain and levosulpiride.

Abstract translation: 目的：提供蛋白质转运区域和治疗性蛋白质共价键合的融合蛋白中的左半乳糖苷加入活细胞或器官中的融合蛋白的增加方法，以增加蛋白质药物对各种疾病的治疗效果。 构成：将融合蛋白加入到活细胞或器官中的增加方法是通过将蛋白质转运结构域和治疗性蛋白质共价结合的融合蛋白中加入左美沙比来进行加工。 左氧氟沙棱主要在活体细胞或器官中处理，而不是融合蛋白。 蛋白质转运结构域是Tat，PEP-1，寡聚赖氨酸，寡聚精氨酸或寡聚（赖氨酸和精氨酸）。 治疗性蛋白质是rpS3。 用于预防和治疗炎性疾病的组合物包括其中与蛋白质转运结构域和左旋舒巴比妥共价键合的融合蛋白。 炎症治疗蛋白是rpS3。 用于预防和改善皮肤外用的组合物包括其中与蛋白质转运结构域和左旋肉碱共价结合的融合蛋白。

公开(公告)号：KR1020150106985A

公开(公告)日：2015-09-23

申请号：KR1020140028817

申请日：2014-03-12

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  박진서 ,  한규형 ,  음원식 ,  황현숙 ,  조용준 ,  조성우 ,  박종훈 ,  박은영 ,  김대원

IPC: A61K38/16 ,  A61K38/10 ,  A61P9/10

CPC classification number: A61K38/08 ,  A61K38/10 ,  A61K38/1709 ,  C07K7/06 ,  C07K7/08 ,  C07K14/47 ,  C12N15/62

Abstract: 본 발명자들은 PRAS40 융합단백질이 인비트로에서 산화 스트레스로 유도된 신경세포사멸에 대한 세포 보호효과와 인비보에서 뇌허혈 동물모델 보호효과가 있음을 밝혔다. PRAS40 융합단백질은 신경세포 내로 농도 및 시간 의존적으로 효과적으로 투과하였다. 세포 내로 투과된 PRAS40 융합단백질은 과산화수소 독성에 대해 세포생존율을 증가시켰고, 세포내 활성산소종 수준 및 과산화수소로 유도되는 DNA 단편화를 감소시켰다. 동물모델에서는 전뇌 해마 CA1 부분에 일시적 허혈을 유도했을 때 일어나는 신경세포사멸에 대해 PRAS40 융합단백질이 보호효과를 나타내었다. 이러한 결과들은 PRAS40 융합단백질이 세포사멸에 대해 보호효과가 있으며, 뇌허혈 손상으로부터 신경세포를 보호하는 치료효과가 있음을 말해준다.

Abstract translation: 本发明证实，PRAS40融合蛋白在体外保护神经细胞免受来自氧化应激的细胞死亡有效，并保护体内具有脑缺血的动物模型。 根据浓度和时间，将PRAS40融合蛋白有效地注入神经细胞。 进入细胞的PRAS40融合蛋白增加了抗过氧化氢毒性的细胞存活率，并减少了由过氧化氢引起的DNA断裂和细胞中活性氧的水平。 在动物模型中，PRAS40融合蛋白可以防止在前脑海马CA1区域引起临时缺血时发生神经细胞死亡。 结果表明，PRAS40融合蛋白对细胞死亡有保护作用，有效保护神经细胞免受脑缺血损伤。

公开(公告)号：KR101761550B1

公开(公告)日：2017-07-27

申请号：KR1020160060729

申请日：2016-05-18

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  김대원 ,  음원식 ,  신민재 ,  손은정 ,  손오라 ,  박진서 ,  한규형 ,  조성우 ,  김현아 ,  황현숙

IPC: A61K38/16 ,  A61K9/20 ,  A61K9/48 ,  A61K9/00 ,  C07K14/47 ,  C07K14/005 ,  C07K14/395

CPC classification number: A61K38/16 ,  A61K9/0019 ,  A61K9/20 ,  A61K9/48 ,  C07K14/005 ,  C07K14/395 ,  C07K14/47 ,  C07K2319/00

Abstract: 과제: 세포침투가용이하고, 염증성관절염에효과적인약학조성물을제공하려는것. 해결수단: 본발명은연골조직내로투과가능한 PEA15 융합단백질을유효성분으로함유하는관절염예방및 치료용약제학적조성물에관한것으로, 염증유발연골세포내에서염증마커의단백질및 mRNA 발현수준및 염증성싸이토카인의발현을저하시켰다. 따라서, 본발명에따른 PEP-1-PEA15 융합단백질은염증성관절염의예방또는치료용약학조성물로서유용할것으로예상된다.

Abstract translation: 问题：提供易于穿透细胞并对炎性关节炎有效的药物组合物。 解决问题的手段：关节炎预防的本发明和涉及蛋白和mRNA和炎性细胞因子的表达在含有可渗透PEA15融合蛋白进入软骨组织作为活性成分的炎性软骨细胞中的炎症标记物的水平的治疗性药物组合物 Lt。 因此，预期本发明的PEP-1-PEA15融合蛋白可用作用于预防或治疗炎性关节炎的药物组合物。

公开(公告)号：KR1020150061689A

公开(公告)日：2015-06-05

申请号：KR1020130145388

申请日：2013-11-27

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  박진서 ,  한규형 ,  조성우 ,  음원식 ,  김덕수 ,  황현숙 ,  김대원

IPC: A61K38/16 ,  A61K48/00 ,  A61P25/16

CPC classification number: A61K38/1709

Abstract: 비정상적세포과정에서생성되는과량의활성산소종은염증, 허혈및 파킨슨병과같은다양한인간의질병을일으킨다. 링-핑거단백질인 SAG (sensitive to apoptosis gene)는항자기세포사멸활성과항산화활성을가진다. 본발명자들은단백질수송도메인 Tat과융합한 Tat-SAG 융합단백질이 MPP독성에대하여 SH-SY5Y 신경아세포종세포를보호하고, MPTP 독성에대하여흑색질의도파민뉴런을보호함을밝혔다. 웨스턴블랏팅결과, SAG 단백질과달리, Tat-SAG 융합단백질은 SH-SY5Y 세포와뇌에효과적으로투과되었다. Tat-SAG 융합단백질은 SH-SY5Y 세포에서 MPP에의해일어나는활성산소종생성, DNA 손상및 세포자기사멸진행을현저히억제하였다. 또한, 타이로신하이드롤레이즈항체와크레실바이올렛염색을이용한면역조직화학데이타에서 Tat-SAG 융합단백질은파킨슨병동물모델에서 MPTP 독성에대하여흑색질내 도파민뉴런을보호하는것으로나타났다. 따라서, Tat-SAG 융합단백질은파킨슨병과같은활성산소종관련질환에대한치료제로서이용가능성이있다.

Abstract translation: 在异常细胞形成过程中产生的活性氧异常过量引起各种人类疾病，如炎症，缺血和帕金森病。 对作为RING指蛋白的凋亡基因（SAG）敏感表现出抗凋亡活性和抗氧化活性。 本发明人已经发现，与蛋白质转移结构域Tat融合的Tat-SAG融合蛋白保护SH-SY5Y神经母细胞瘤免受MPP ^（+）毒性，并保护黑质多巴胺神经元免受MPTP毒性。 作为Western印迹的结果，Tat-SAG融合蛋白已被有效地传递到SH-SY5Y细胞和大脑不同于SAG蛋白。 Tat-SAG融合蛋白显着抑制由MPP ^（+）触发的SH-SY5Y细胞中活性氧的形成，DNA损伤和凋亡过程。 此外，Tat-SAG融合蛋白已经表明，根据使用酪氨酸水解酶抗体和甲酚紫染色的免疫组织化学数据，在具有帕金森病的动物模型中，保护黑质中的多巴胺神经元抵抗MPTP毒性。 因此，Tat-SAG融合蛋白可用作与帕金森氏病相关的活性氧相关疾病的治疗剂。

公开(公告)号：KR101347734B1

公开(公告)日：2014-01-14

申请号：KR1020120027117

申请日：2012-03-16

Applicant: 한림대학교 산학협력단

Inventor： 최수영 ,  김대원 ,  음원식 ,  황현숙 ,  박진서 ,  한규형 ,  김준 ,  안은희

IPC: A61K38/16 ,  A61K38/17 ,  A61P25/16

Abstract: 파킨슨병은 뇌의 흑색질 내에서 도파민 뉴런이 점차 상실되는 신경퇴행성 질환이다. 리보솜 단백질 S3 (rpS3)는 단백질 합성, 항산화 및 UV 엔도뉴클리에이즈 Ⅲ 활성과 같은 다양한 기능을 수행한다. 본 발명자들은 앞선 연구에서 PEP-1-rpS3 융합단백질이 피부염증을 억제하고 뇌허혈 손상에서 신경보호효과를 나타냄을 밝혔다. 본 발명자들은 PEP-1-rpS3 융합단백질이 SH-SY5Y 신경아세포종 세포 및 파킨슨병 동물모델에서 산화 스트레스로부터 도파민 뉴런을 보호할 수 있음을 밝혀내었다. PEP-1-rpS3 융합단백질은 SH-SY5Y 세포 내로 그리고 뇌의 흑색질 내로 잘 이동함을 웨스턴 블랏 분석으로 확인하였다. PEP-1-rpS3 융합단백질은 MPP
+ 로 유도되는 활성산소종 생성 및 DNA 조각화를 현저히 저해하였으며, 결과적으로 SH-SY5Y 세포의 생존을 유도했다. 신경보호 효과는 PEP-1-rpS3 융합단백질이 친-자기세로사멸 매개자 및 항-자기세포사멸 매개자의 수준에 영향을 미침으로써 얻어진다. 나아가, TH 항체 및 크레실 바이올렛 염색을 이용한 면역조직화학 분석 데이타는 PEP-1-rpS3 융합단백질이 MPTP와 같은 산화 스트레스에 대하여 흑색질 내의 도파민 세포를 현저히 보호함을 나타낸다. 따라서, PEP-1-rpS3 융합단백질은 파킨슨병의 예방 및 치료 용도로 이용 가능하다.