一种重组糖基转移酶及其应用
    24.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118599798A

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202410468133.5

    申请日:2024-04-18

    Abstract: 一种重组糖基转移酶及其应用,氨基酸序列如SEQ ID.NO:3所示。本发明通过基因工程技术,结合生物信息学手段,采用结构域重组的方法,获得一种新型糖基转移酶ZmDo。该酶最适反应温度、pH分别为35℃和pH 9.0,在温度为30~45℃、pH 5.5~8.5的范围内,均具有较高的酶活。同时,该糖基转移酶ZmDo专一性强、催化效率高,能够高效特异性地转化木犀草素为木犀草素‑5‑O‑葡萄糖苷。在适宜的条件下,体外酶转化时,转化率达70%以上;体内重组菌转化时,转化率达95%以上,产量达到2253 mg/L。本发明创制了特异性强、能在木犀草素5号位点上接上葡萄糖糖基的新型糖基转移酶,从而为一些高附加值的稀有天然糖苷类化合物的开发和利用提供了新方法。

    一种催化柚皮素生成山萘酚的融合酶及其应用

    公开(公告)号:CN108220260B

    公开(公告)日:2021-06-08

    申请号:CN201711304614.9

    申请日:2017-12-11

    Abstract: 一种催化柚皮素生成山萘酚的融合酶及其应用,氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示。本发明通过组合筛选策略获得能有效催化柚皮素生成山萘酚的黄烷酮3‑羟化酶(PeF3H)和黄酮醇合成酶(CuFLS),是目前报道的最佳组合。通过连接肽的筛选,获得了能适合PeF3H和CuFLS功能化融合的连接肽TPTPTPTP,通过该连接肽构建的融合酶(F69)能高效催化柚皮素生成山萘酚。携带该融合酶(F69)的重组菌BL21‑F69,通过高密度发酵,山萘酚的产量达到1010.2 mg/L,是目前报道最高产量的17倍。

    青蒿醛双键还原酶DBR1及其重组菌在制备二氢-β-紫罗兰酮中的应用

    公开(公告)号:CN107142287B

    公开(公告)日:2020-12-08

    申请号:CN201710332991.7

    申请日:2017-05-12

    Abstract: 青蒿醛双键还原酶DBR1及其重组菌在制备二氢‑β‑紫罗兰酮中的应用,该酶或其基因重组菌可以高效转化β‑紫罗兰酮制备二氢‑β‑紫罗兰酮。在加入40μL 1mol/L IPTG,初始OD600为1.8,加入250μL 250mmol/Lβ‑紫罗兰酮‑乙醇溶液在27℃条件下全细胞转化18小时,二氢‑β‑紫罗兰酮产量达308.3mg/L。酶转化反应体系为500μL,其中β‑紫罗兰酮浓度为1mmol/L,酶添加量约为30U/mg,反应在pH 6.5,45℃下反应60min,二氢β‑紫罗兰酮浓度为76.49mg/L,底物有效转化率为78.77%。

    一种耐高温复合酶及其应用

    公开(公告)号:CN108384769A

    公开(公告)日:2018-08-10

    申请号:CN201810111588.6

    申请日:2018-02-05

    Abstract: 一种耐高温复合酶及其应用,由β-葡萄糖苷酶与β-木糖苷酶组成。本发明提供的复合酶专一性强,且能够完全转化黄芪甲苷,使得环黄芪醇的转化回收率提高。本发明整个工艺完成时间不超过3 h,大大缩短了环黄芪醇的制备工艺,提高了生产效率;且反应过程中不需要添加强还原剂、氧化剂及强酸等试剂,降低了环境污染;该两种酶均可以自制,生产成本大大降低,适宜于工业化生产。

    一种利用漆酶降解辛基酚的方法

    公开(公告)号:CN103055464A

    公开(公告)日:2013-04-24

    申请号:CN201210539590.6

    申请日:2012-12-14

    Abstract: 一种利用漆酶降解辛基酚的方法,步骤为:制备LacA酶液,调节辛基酚浓度在25~200mg/L,加入漆酶为LacA的酶液浓度0.5~3U/mL,控制反应体系的pH3.5~6,温度保持在25~50℃条件下降解。本发明采用的是生物酶催化工艺,具有去除效率高,方便,安全无污染等突出特点;本发明比较不同的同工酶对辛基酚的专一性,选取对辛基酚专一性最强的漆酶,添加介体物质,能提高漆酶的反应效率,减少反应时间,从而降低漆酶的使用量,降低了运行成本。本发明能高效地降解辛基酚,当辛基酚浓度为100mg/L时,在适宜催化条件下反应12h降解率可以达到97.2%。

    一种糖基转移酶的氨基酸突变体及其应用

    公开(公告)号:CN118240790A

    公开(公告)日:2024-06-25

    申请号:CN202410334541.1

    申请日:2024-03-22

    Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶的氨基酸突变体及其应用,所述氨基酸突变体是将来源于黍Panicum hallii GT 1家族的糖基转移酶PhUGT氨基酸序列的第141位脯氨酸替换为甘氨酸获得;所述氨基酸突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过基因工程技术,对具有优良特性或具有一定转木糖基能力的葡萄糖基转移酶实施定向改造,通过单点突变法获得能高效转化芹菜素为芹菜素5‑O‑木糖苷的方法。本发明获得的新型氨基酸突变体专一性强,定向转化效率高,且创制了非天然的黄酮糖苷类化合物芹菜素5‑O‑木糖苷及其制备工艺。

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