公开(公告)号：KR1020130114946A

公开(公告)日：2013-10-21

申请号：KR1020120037407

申请日：2012-04-10

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 박종현 ,  김수미 ,  이광녕 ,  초가기 ,  이여주 ,  김은정 ,  고영준 ,  이향심 ,  김병한

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/33 ,  C12N7/01

Abstract: PURPOSE: Foot and mouth disease virus expressing defensive protein against foot and mouth disease of O-Cathay topotype is provided to be made into a vaccine, defend against O-Cathy topotype and produce a large amount of antibodies capable of defense within 1-2 weeks by single inoculation. CONSTITUTION: A plasmid has a base sequence like a sequence number 1. In the plasmid, a defensive gene against foot and mouth disease of O-Cathay topotype is inserted. Foot and mouth disease O serotype Cathay structural protein is expressed and produced from the plasmid.

Abstract translation: 目的：提供表达O-Cathay拓扑型口蹄疫防御性蛋白质的口蹄疫病毒，制成疫苗，捍卫O-Cathy拓扑型，并在1-2周内产生大量能够防御的抗体 通过单次接种。 构成：质粒具有序列号1的碱基序列。在质粒中插入了针对O-Cathay拓扑型的口蹄疫的防御基因。 口蹄疫O血清型国泰结构蛋白由质粒表达和产生。

公开(公告)号：KR1020130078265A

公开(公告)日：2013-07-10

申请号：KR1020110147110

申请日：2011-12-30

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 이광녕 ,  김수미 ,  박종현 ,  고영준 ,  이향심 ,  조인수 ,  이서용

IPC: C12N15/33 ,  C12N15/86

Abstract: PURPOSE: A cDNA clone is provided to acquire basic knowledge related to replication, expression, and infection of foot-and-mouth disease virus, and to be used vaccine and diagnostic materials, thereby resolving problems of existing inactivated vaccines. CONSTITUTION: A cDNA clone is prepared using foot-and-mouth disease virus with a base sequence of sequence number 1. The clone is prepared using foot-and-mouth disease virus with a base sequence selected from a group consisted of base sequences of sequence numbers 2, 3, 4, and 5. The clone identifies replication and expression difference of a replicon by manipulating untranslated region (UTR) or T7 promoter site of the clone with a base sequence of sequence number 5. In the clone, G is added at 644nt G and C is substituted with T at 9602nt in T7 promoter. A replicon clone has a base sequence of sequence number 6. [Reference numerals] (AA,BB,CC) Foot-and-mouth disease; (DD) Prepare linear DNA (Nsi cut); (EE) Confirm RNA quantification & integrity; (FF) Confirm virus production; (HH) Acquire infectious foot-and-mouse disease virus or express a non-infectious foot-and-mouth virus-like particle and protein

Abstract translation: 目的：提供cDNA克隆以获得与口蹄疫病毒的复制，表达和感染有关的基础知识，并使用疫苗和诊断材料，从而解决现有灭活疫苗的问题。 构成：使用具有序列号1的碱基序列的口蹄疫病毒制备cDNA克隆。使用口蹄疫病毒制备克隆，碱基序列选自由序列的碱基序列组成的组 编号2,3,4和5.克隆通过用序列号5的碱基序列操纵克隆的非翻译区（UTR）或T7启动子位点来鉴定复制子的复制和表达差异。在克隆中，加入G 在644nt G和C在T7启动子的9602nt被T替代。 复制子克隆具有序列号6的碱基序列。[附图标记]（AA，BB，CC）口蹄疫; （DD）制备线性DNA（Nsi切割）; （EE）确认RNA定量和完整性; （FF）确认病毒生产; （HH）获得感染性脚鼠病毒病毒或表达非感染性口蹄疫病毒样颗粒和蛋白质

公开(公告)号：KR101236203B1

公开(公告)日：2013-02-26

申请号：KR1020100034441

申请日：2010-04-14

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 고영준 ,  이향심 ,  박종현 ,  이광녕 ,  김수미 ,  조인수

IPC: G01N33/569 ,  C07K14/09 ,  C07K16/08 ,  C12N15/40

Abstract: 본 발명은 구제역바이러스 SAT2형 유전자재조합 단백질과 단클론항체를 제작하고 이를 이용하여 구제역 SAT2형 항체를 검출하는 효소결합면역측정법에 관한 것이다.
본 발명의 목적은 진단항원으로서 기존의 불활화바이러스를 유전자재조합 단백질로 대체하여 일반실험실에서 안전하게 제작할 수 있는 형태의 진단항원을 개발하고 구제역바이러스 SAT2형에 대해서 중화역가를 보유한 단클론항체를 제작하여 구제역바이러스 SAT2형 항체를 신속하게 검출하는 새로운 진단방법을 제공함에 있다.
좀 더 상세하게는, 구제역바이러스 SAT2형 구조단백질에 해당하는 P1 유전자와 3C 단백분해효소 유전자를 하나의 발현벡터에 클로닝한 후에 곤충세포에서 발현하여 바이러스유사입자를 제작하고 중화 단클론항체는 바이러스의 중화 에피톱에 해당하는 펩타이드를 합성하여 마우스에 접종한 후 면역세포와 골수종유래 세포를 융합하여 제작하였다. 이렇게 만들어진 유전자재조합 단백질 항원과 단클론항체를 이용하여 새로운 형태의 효소결합면역측정법을 개발하였다.
본 발명의 진단방법은 일반실험실에서도 안전하게 생산할 수 있는 유전자재조합 단백질 진단항원을 이용한 경합방식의 효소결합면역측정법으로서 소, 돼지, 염소 등 축종에 상관없이 동일한 방식으로 검사할 수 있으며 구제역바이러스 SAT2형 감염여부를 판정하거나 백신접종시 백신항체역가를 신속하게 측정할 수 있기 때문에 표준검사법인 바이러스중화시험법을 대체할 수 있는 신규 진단법으로의 활용이 가능하다.

公开(公告)号：KR101077188B1

公开(公告)日：2011-10-31

申请号：KR1020080117663

申请日：2008-11-25

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 김수미 ,  박종현 ,  이광녕 ,  고영준 ,  박지용 ,  주이석

IPC: C12N15/86 ,  C12N15/40 ,  C12N15/10 ,  C12N15/09

Abstract: 본발명은구제역바이러스억제및 예방을목적으로특이적으로제작된 siRNA를발현하는재조합아데노바이러스에관한것이다. 보다상세하게는, 우리나라에발생하였던구제역바이러스주(O/SKR/2002)의염기서열을바탕으로비구조단백질부위의특이염기서열을찾고이를디자인한후 아데노클로닝벡터에클로닝하여제조한유전자재조합아데노바이러스에관한것으로서, 이를동물이바이러스에감염되기전에적용하면, 바이러스억제효과를나타내며, 동물이바이러스에감염된이후에적용하더라도바이러스의증식억제효과를나타내어구제역의예방과치료에모두활용할수 있다.

公开(公告)号：KR1020110115006A

公开(公告)日：2011-10-20

申请号：KR1020100034441

申请日：2010-04-14

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 고영준 ,  이향심 ,  박종현 ,  이광녕 ,  김수미 ,  조인수

IPC: G01N33/569 ,  C07K14/09 ,  C07K16/08 ,  C12N15/40

Abstract: 본 발명은 구제역바이러스 SAT2형 유전자재조합 단백질과 단클론항체를 제작하고 이를 이용하여 구제역 SAT2형 항체를 검출하는 효소결합면역측정법에 관한 것이다.
본 발명의 목적은 진단항원으로서 기존의 불활화바이러스를 유전자재조합 단백질로 대체하여 일반실험실에서 안전하게 제작할 수 있는 형태의 진단항원을 개발하고 구제역바이러스 SAT2형에 대해서 중화역가를 보유한 단클론항체를 제작하여 구제역바이러스 SAT2형 항체를 신속하게 검출하는 새로운 진단방법을 제공함에 있다.
좀 더 상세하게는, 구제역바이러스 SAT2형 구조단백질에 해당하는 P1 유전자와 3C 단백분해효소 유전자를 하나의 발현벡터에 클로닝한 후에 곤충세포에서 발현하여 바이러스유사입자를 제작하고 중화 단클론항체는 바이러스의 중화 에피톱에 해당하는 펩타이드를 합성하여 마우스에 접종한 후 면역세포와 골수종유래 세포를 융합하여 제작하였다. 이렇게 만들어진 유전자재조합 단백질 항원과 단클론항체를 이용하여 새로운 형태의 효소결합면역측정법을 개발하였다.
본 발명의 진단방법은 일반실험실에서도 안전하게 생산할 수 있는 유전자재조합 단백질 진단항원을 이용한 경합방식의 효소결합면역측정법으로서 소, 돼지, 염소 등 축종에 상관없이 동일한 방식으로 검사할 수 있으며 구제역바이러스 SAT2형 감염여부를 판정하거나 백신접종시 백신항체역가를 신속하게 측정할 수 있기 때문에 표준검사법인 바이러스중화시험법을 대체할 수 있는 신규 진단법으로의 활용이 가능하다.

公开(公告)号：KR1020110034154A

公开(公告)日：2011-04-05

申请号：KR1020090091578

申请日：2009-09-28

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 고영준 ,  이향심 ,  허은정 ,  정혜영 ,  권창희

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/33 ,  C12N15/85

Abstract: PURPOSE: A method for diagnosing vesicular stomatitis virus serotype New Jersey is provided to detect New Jersey specific antibody in the livestock serum. CONSTITUTION: A gene recombinant baculovirus expression vector contains a gene of sequence number 1 vesicular stromatitis virus serotype New Jersey protein. A method for preparing the glycoprotein comprises: a step of co-infecting a vector and baculovirus gene to a host cell; a step of culturing the infected host cell and separating supernatant containing the recombinant baculovirus from the culture; a step of infecting the host cell with the supernatant; a step of collecting cell pellet and crushing the cells; and a step of isolating the glycoprotein from the crushed cell culture. The baculovirus gene is pBacPAK6. The host cell is an insect cell.

Abstract translation: 目的：提供一种用于诊断水泡性口炎病毒血清型新泽西的方法，用于检测家畜血清中的新泽西特异性抗体。 构成：基因重组杆状病毒表达载体含有序列号1的囊泡性间质炎病毒血清型新泽西蛋白的基因。 制备糖蛋白的方法包括：将宿主细胞共同感染载体和杆状病毒基因的步骤; 培养受感染的宿主细胞并从培养物中分离含有重组杆状病毒的上清液的步骤; 用上清液感染宿主细胞的步骤; 收集细胞沉淀并粉碎细胞的步骤; 以及从破碎的细胞培养物中分离糖蛋白的步骤。 杆状病毒基因是pBacPAK6。 宿主细胞是昆虫细胞。

公开(公告)号：KR100968069B1

公开(公告)日：2010-07-08

申请号：KR1020070107293

申请日：2007-10-24

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 조윤상 ,  이상은 ,  고영준 ,  조동희 ,  이향심 ,  황인영 ,  남향미 ,  허은정 ,  김종만 ,  정석찬

IPC: C07K14/35 ,  C07K1/14

Abstract: 본 발명은 우 결핵균 항체에 특이적으로 반응하는 단백질 및 그 정제 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 우 결핵균 단백질 중 우결핵균 감염 혈청에 대한 항체 특이 단백질 및 그 정제 방법에 관한 것이다. 본 발명은 우결핵균의 혈청학적 진단 기술을 향상시킴으로써 우결핵의 확산방지를 도모할 수 있다.
우결핵, 단백질항원, 이온교환크로마토그래피, 항체검사, 면역블롯팅

公开(公告)号：KR1020060034945A

公开(公告)日：2006-04-26

申请号：KR1020040083994

申请日：2004-10-20

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 최강석 ,  고영준 ,  나진주 ,  조남인

IPC: C12N15/79 ,  C12N15/63

CPC classification number: C12N7/00 ,  A61K2039/5258 ,  C12N2770/32323

Abstract: 본 발명은 유전자 재조합 기법을 이용한 돼지 수포병 바이러스 유사입자(Swine Vesicular Disease Virus-Like Particle) 및 그 제조 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 돼지 수포병 바이러스 전체 유전자 중에서 구조단백질 전구체(P1) 유전자 및 3CD 프로테아제(protease) 유전자를 베큘로 바이러스 발현벡터에 동시 삽입하여 곤충세포에서 발현함으로써, 발현된 3CD 프로테아제 효소가 구조단백질 전구체를 개별적인 단백질로 절단하여 개별단백질들이 자체적인 조립과정을 통해서 돼지 수포병 바이러스의 캡시드(capsid)를 형성하는 것을 특징으로 하는 돼지 수포병 바이러스 유사입자의 제조 방법에 관한 것이다.
유전자 재조합, 돼지 수포병 바이러스 유사입자, 진단용 항원, 백신개발, 구조단백질 전구체, 3CD 프로테아제

公开(公告)号：KR1020040073034A

公开(公告)日：2004-08-19

申请号：KR1020030008750

申请日：2003-02-12

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 최강석 ,  나진주 ,  손현주 ,  고영준 ,  주이석

IPC: C07K7/08

CPC classification number: C07K7/08 ,  G01N33/56983 ,  G01N2333/115

Abstract: PURPOSE: A peptide specifically reactive with antibodies against rinderpest virus and uses thereof are provided, thereby reducing the detection time and improving detection activity of rinderpest virus antibodies by using the peptide with bovine serum albumin. CONSTITUTION: The peptide specifically reactive with antibodies against rinderpest virus has the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO:1, wherein the peptide further contains cysteine in the N-terminal and amino group(-NH2) in the C-terminal. A composition for detecting antibodies against rinderpest virus contains the peptide of SEQ ID NO:1. A kit for detecting antibodies against rinderpest virus contains the peptide of SEQ ID NO:1.

Abstract translation: 目的：提供与抗牛瘟病毒抗体特异性反应的肽及其用途，通过使用牛血清白蛋白的肽，减少检测时间，提高牛瘟病毒抗体检测活性。 构成：与牛瘟病毒抗体特异性反应的肽具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，其中肽在N-末端还含有C-末端的氨基（-NH 2）。 用于检测针对牛瘟病毒的抗体的组合物含有SEQ ID NO：1的肽。 用于检测针对牛瘟病毒的抗体的试剂盒含有SEQ ID NO：1的肽。

公开(公告)号：KR1020030052858A

公开(公告)日：2003-06-27

申请号：KR1020010082976

申请日：2001-12-21

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 권창희 ,  현방훈 ,  고영준 ,  이광녕 ,  구복경 ,  엄재구 ,  나진주 ,  남향미 ,  박지용 ,  계수정 ,  김인중 ,  이세영 ,  최광석 ,  손현주 ,  주이석

IPC: C12N15/33

CPC classification number: C12N15/866 ,  C07K14/005 ,  C07K16/1009 ,  C07K2317/14 ,  C12N5/163 ,  C12N2770/32131 ,  G01N33/56983 ,  G01N33/577 ,  G01N2333/09

Abstract: PURPOSE: Diagnostic methods of foot-and-mouth disease using recombinant 3ABC non-structural protein expressed in insect cells and a monoclonal antibody is provided, thereby more rapidly and accurately diagnosing the foot-and-mouth disease than the prior methods. CONSTITUTION: A gene encoding a recombinant 3ABC non-structural protein derived from Korean foot-and-mouth disease virus O/SKR/2000 has the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1. A recombinant baculovirus to be expressed in insect cells is prepared by co-transfection with a recombinant vector containing the recombinant 3ABC non-structural protein gene of SEQ ID NO: 1. The recombinant 3ABC non-structural protein is expressed by infection of the insect cells with the recombinant baculovirus. A hybridoma cell line 3F-11(KCTC 10138BP) is prepared by introducing the recombinant 3ABC non-structural protein expressed in E. coli into an animal, collecting an immunized cell from the animal and fusing the immunized cell with a cancer cell. A monoclonal antibody is produced from the hybridoma cell line 3F-11(KCTC 10138BP). A diagnostic method of foot-and-mouth disease comprises the steps of: (1) diluting the recombinant 3ABC non-structural protein in a coating buffer solution and pouring the diluate on a plate; (2) reacting the testing serum with the plate; (3) reacting a conjugate, which binds with an antibody for foot-and-mouth disease virus in the testing serum and has an enzyme, a radioactive material or a fluorescent material, with the testing serum; and (4) measuring intensity of the enzyme reaction, fluorescence reaction or radiation reaction with the conjugate.

Abstract translation: 目的：提供使用在昆虫细胞中表达的重组3ABC非结构蛋白和单克隆抗体的口蹄疫诊断方法，从而比现有方法更快速，准确地诊断口蹄疫。 构成：编码来自韩国口蹄疫病毒O / SKR / 2000的重组体3ABC非结构蛋白的基​​因具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列。在昆虫细胞中表达的重组杆状病毒通过 用含有SEQ ID NO：1的重组3ABC非结构蛋白基因的重组载体共转染。重组体3ABC非结构蛋白用重组杆状病毒感染昆虫细胞表达。 通过将在大肠杆菌中表达的重组3ABC非结构蛋白质导入动物中，从动物中收集免疫的细胞并将免疫的细胞与癌细胞融合来制备杂交瘤细胞系3F-11（KCTC 10138BP）。 从杂交瘤细胞系3F-11（KCTC 10138BP）产生单克隆抗体。 口蹄疫的诊断方法包括以下步骤：（1）在包被缓冲溶液中稀释重组体3ABC非结构蛋白，将稀释液倒入平板上; （2）使测试血清与板反应; （3）使与测试血清中的口蹄疫病毒抗体结合并具有酶，放射性物质或荧光材料的缀合物与测试血清反应; 和（4）测量酶反应的强度，荧光反应或与缀合物的辐射反应。