Abstract:
본 발명은 돼지의 주요 전염병을 예방하기 위한 벡터백신으로 사용될 수 있는 재조합 돼지오제스키병 바이러스에 관한 것으로, 돼지오제스키병 바이러스 양산주(KFCC-11048)의 TK(Thymidine kinase)유전자를 결실시키고, TK 프로모터하에서 돼지 인터류킨-2(Interleukin-2; IL-2) 유전자가 발현될 수 있도록 삽입하는 것에 의해 병원성이 감소되고 세포면역 향상능을 갖는 벡터백신을 제공할 수 있다. 더구나, TK 유전자 결실 및 IL-2 유전자의 삽입에 더하여, gI 유전자를 결실시키고, β-갈락토시다제 유전자를 마커(marker) 유전자로 하여 삽입, 발현시킴으로써, β-갈락토시다제 유전자 대신 바이러스 병원체에 대한 방어항원을 코딩하는 유전자를 외래 유전자로 삽입, 발현할 수 있는 다가 벡터백신을 제공할 수 있다. 따라서, 본 발명의 벡터백신은 종래 예방약보다 면역 효과가 우수한 돼지 오제스키병의 예방약 생산에 사용될 수 있으며, 다른 바이러스등의 병원체에 대한 항원을 코딩하는 유전자를 외래유전자로 삽입하는 경우 다른 병원체의 예방약 생산에도 사용될 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: Provided is a diagnosis method of bovine viral diarrhea(BVD) using a recombinant protein consisting of gp53 protein of bovine viral diarrhea virus(BVDV) expressed in an insect cell, as an antigen. CONSTITUTION: The diagnosis method of bovine viral diarrhea(BVD) detects a neutralization antibody of BVDV by indirect Sandwich enzyme linked immunosorbent assay(IS-ELISA) using gp53 protein of BVD expressed in an insect cell. The recombinant protein is produced by an expression vector of gp53 protein of BVD in a transformed insect cells.
Abstract:
PURPOSE: Provided is a method for detecting the infectious bovine rhinotracheitis virus(IBRV)-specific neutralizing antibody by ELISA using gD protein of IBRV, thereby the IBRV-specific neutralizing antibody can be rapidly and exactly detected. CONSTITUTION: The recombinant baculovirus that produces gD protein of IBRV is produced by the steps of: inserting the K gene fragment of an IBRV PQ strain into a plasmid pBluescript SK(+) to prepare a plasmid pPQ8H; inserting the fragment of pPQ8H into a plasmid pBluescript SK(+) to prepare pPQM1.3; inserting the universal stop sequence 5'- TAATTAATTAA- 3' and a simian virus 40 polyadenylation signal into a plasmid pVL1393 to prepare a vector pVL-SV40p(A); ligating pVL-SV40p(A) with pPQ1.3 to produce the recombinant baculovirus that produces gD protein of IBRV. The method for detecting the IBRV-specific neutralizing antibody comprises the steps of: coating the purified anti-gD monoclonal antibody using a coating buffer and blocking-reacting with a blocking solution; coating-reacting gD protein of IBRV, which is produced by the recombinant baculovirus, by diluting it in PBS; reacting the coating-reacted gD protein with bovine serum and washing it with water; subjecting it to the anti-bovine conjugate-reaction with a serum diluting solution; and coloring it and measuring its optical density.
Abstract:
본 발명은 국내 돼지 사육농가에 심각한 경제적 피해를 야기시키는 돼지의 주요 전염병 중 하나인 돼지 오제스키병의 백신 제조에 사용될 수 있는 발현 벡터 및 이를 이용하여 재조합 바이러스를 선발하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 발현벡터는 사람아데노바이러스 2형의 E3 유전자 부위를 제거하여 E3 프로모터 또는 메이져 래이트 프로모터(major late promoter; MLP)하에 삽입된 외래 유전자가 발현될 수 있도록 제작한 플라스미드이고, 유전자 재조합 사람아데노바이러스 2형은 발현벡터에 외래 유전자로서 돼지 오제스키병 바이러스 중요 방어 항원을 코딩하는 gp50 유전자를 삽입한 후, 이를 사람아데노바이러스 2형 게놈 유전자와 대장균내에서 동질성 재조합(homologous recombination)하고, 이를 리포펙틴을 사용하여 포유동물세포에 형질도입시켜 gp50 유전� � 재조합 바이러스를 선발한 것이다. 본 발명에 의해 선발된 gp50 유전자 재조합 사람아데노바이러스 2형은 축산 현장에서 많은 경제적 손실을 주는 돼지 오제스키병의 예방에 이용될 수 있다.
Abstract:
면역크로마토그라피법 이용 돼지오제스키병 항체검출은 항체에 감작된 골드 또는 라텍스 입자를 사용하며 오제스키바이러스 항원이 고정된 나이트로셀룰로우스막을 항체가 포함된 완충액에 침지하여 단시간내에 특정 항체를 검출하는 방법으로 돼지의 혈액으로부터 신속하게 오제스키바이러스에 대한 항체를 검사할 수 있다. 이는 야외에서도 항체검사가 가능하므로 돼지오제스키병을 검색하고 진단하는데 유용한 항체검사 킷트 제조방법을 제공한다. 특히 돼지오제스키병의 경우와 같이 항체검사를 신속하게 농장에서 실시할 수 있는 검사방법이 절실하게 필요하므로 면역크로마토그라피법을 이용한 항체검출법을 사용하면 개체검사를 실시하여 돼지의 오제스키병에 대한 항체보유 여부를 신속하게 판단할 수 있다.
Abstract:
The present invention relates to a vaccine composition comprising domestic predominant epidemic genotype strains of bovine viral diarrhea virus for preventing or treating bovine viral diarrhea. When preparing a vaccine by mixing GB44-1 strain, GB45-1 strain, and 08Q723 strain which are the bovine viral diarrhea virus according to the present invention, the vaccine can be valuably used as an effective vaccine for preventing or treating the bovine viral diarrhea since the vaccine is suitable for domestic genotypes and has an outstanding immune function compared to a conventional vaccine, and solves a problem of a conventional vaccine for the bovine viral diarrhea.
Abstract:
PURPOSE: A method for preparing pluripotent stem cells from canine umbilical cord matrix is provided to express one or more differentiation markers(Oct-3/4, Sox-2, SSEA-4, Nanog). CONSTITUTION: A method for preparing umbilical cord matrix-derived mesenchymal stem cells comprises: a step of collecting an umbilical cord matrix and removing amnion from the umbilical cord matrix; a step of treating the umbilical cord matrix with trypsin/EDTA at 36-38°C for 30 minutes to one hour; a step of removing umbilical artery and umbilical vein from the umbilical cord matrix; a step of treating the umbilical cord matrix with collagenase at 36-38°C for 30 minutes to 2 hours and collecting single cells; and a step of culturing and collecting the pluripotent mesenchymal stem cells in a medium. The medium contains bFGF(Basic Fibroblast Growth Factor).