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公开(公告)号：CN107641621B
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN201710448315.6
申请日：2017-06-14
Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 , 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及酶工程及生物医药技术领域，尤其涉及一种糖苷酶组合物及酶法制备淫羊藿苷元的方法。本发明筛选获得了一种能有效降解淫羊藿苷母核结构上鼠李糖残基的α‑L‑鼠李糖苷酶及能高效降解其母核结构中葡萄糖残基耐高温β‑葡萄糖苷酶，随后通过双酶转化高效制备具有完全保持原有生物活性的淫羊藿苷元。本发明提供的组合物中，两种糖苷酶的最适反应温度都较高，底物溶解性较好，不需要助溶剂；并且酶解时间短，得率高。实验表明，采用本发明提供的糖苷酶组合物对淫羊藿苷进行酶解，摩尔转化率为98.3％，淫羊藿苷元的得率为90％。
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公开(公告)号：CN107789376B
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN201711064250.1
申请日：2017-11-02
Applicant: 南京林业大学
IPC: B01D11/02 , A61K36/16 , A61K127/00
Abstract: 本发明公开了一种提取银杏叶活性成分的两相深共熔溶剂及其制备方法和提取方法，该两相深共熔溶剂是由等体积的亲水相和疏水相组成，亲水相由物质A和物质B组成，物质A由DES1和水组成，DES1是由氯化胆碱和乙酰丙酸制备而成；物质B由DES2和水组成，DES2是由氯化胆碱和丙二酸制备而成；疏水相是由甲基三辛基氯化铵、辛醇和辛酸制备而成。本发明制备的两相深共熔溶剂为绿色溶剂，安全无污染，粘度小，氢键稳定，流动性好；可以同时提取银杏叶中疏水性活性成分聚异戊烯醇乙酸酯和亲水性活性成分银杏黄酮、萜内酯和原花青素，提取率高，使用安全，不会形成残留。本发明深共熔溶剂的制备方法简单方便，成本低，生物可降解性高。
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公开(公告)号：CN107384896B
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN201710685211.7
申请日：2017-08-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种制备稀有人参皂苷的酶组合物及其应用，应用于转化多组分人参皂苷制备人参皂苷C‑K等稀有人参皂苷。其特征在于一种嗜热菌来源能够一次性切除人参皂苷母核3位上两个糖基的β‑葡萄糖苷酶，获得稀有组分C‑Y、C‑Mc和C‑Mx，其摩尔转化率均高于96%。再一步，通过3种特异性的糖苷水解酶再分别切除前述三种产物各自20位外侧的阿拉伯吡喃糖、阿拉伯呋喃糖和木糖，获得最终产物稀有人参皂苷C‑K，摩尔转化率也均高于98%。本发明提供了一种新的稀有人参皂苷制备路线，并且能够同时高效转化多组分人参皂苷Rb2、Rc和Rb3获得稀有人参皂苷C‑K。
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公开(公告)号：CN111117988A
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN202010059242.3
申请日：2020-01-18
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 嗜热木糖苷酶的氨基酸突变体及其应用。本发明突变了来源于嗜热网球菌（Dictyoglomus thermophilum）DSM 3960 GH 39家族的β-木糖苷酶，并利用β-木糖苷酶多位点突变体特异性水解三七皂苷R1生成人参皂苷Rg1。所述多位点突变体含有2个突变位点，其中HIS284分别突变为ASP和ALA，突变体使得该β-木糖苷酶耐糖率分别提高了1.35和1.09倍，其Ki系数分别达到了4.6 mol/L和3.7 mol/L；CYS202突变为LEU和PHE，其酶活分别提高了3.28和2.97倍。
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公开(公告)号：CN110870882A
公开(公告)日：2020-03-10
申请号：CN201911036390.7
申请日：2019-10-29
Applicant: 南京林业大学 , 江苏康缘尤赛金生物科技有限公司
Abstract: 一种分离制备银杏叶提取物中银杏黄酮的方法。活性炭能有效将银杏叶提取物中的银杏内酯和银杏黄酮分开，活性炭吸附银杏总黄酮的性能极佳，最大吸附量为195.8 mg/g活性炭，但活性炭吸附银杏黄酮后产生了死吸附，利用不同浓度的乙醇等其他溶剂都无法达到解吸附作用。本发明建立了活性炭解吸银杏黄酮的方法和工艺研究，为实现银杏黄酮回收利用提供了一条可行的方法。适宜的解吸工艺条件为：洗脱液乙醇浓度为73.4%，氨水浓度5.7%，洗脱温度31.5℃，洗脱体积约为4倍柱体积。在此条件下银杏黄酮的解吸率达到70%以上。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109588488A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201910072295.6
申请日：2019-01-25
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种白果藏灵菇发酵酸奶及其制备方法，该白果藏灵菇发酵酸奶主要由新鲜纯牛奶中加入白果汁、蔗糖、增稠剂后接种藏灵菇发酵制备而成，各物质初始添加量为白果汁40-80g/L、蔗糖40-80g/L、增稠剂6-1.4g/L、藏灵菇60-100g/L。本发明制备得到的白果藏灵菇发酵酸奶，产品酸甜适宜，有较浓厚的发酵乳的香甜气味，无白果的不良风味，组织均匀，无乳清析出，不分层，口感细腻滑润且丰富；发酵过后的白果藏灵菇发酵酸奶兼有传统酸奶、白果、藏灵菇的营养与保健功能，具有较良好的市场开发价值。
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公开(公告)号：CN105238826B
公开(公告)日：2019-02-05
申请号：CN201510812991.8
申请日：2015-11-20
Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 , 南京林业大学
IPC: C12P17/06
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及β‑葡萄糖苷酶的用途及用其制备黄芩素的方法。所述β‑葡萄糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还提供了酶水解黄芩苷的方法，将一种耐热耐糖β‑葡萄糖苷酶固定化后在缓冲溶液中将黄芩苷水解，获得黄芩素。该酶具有很强的产物耐受性，无需在双相体系中就能将黄芩苷水解完全，避免了双相体系中的有机溶剂使酶活力下降。固定化酶可以多次利用。本发明得到纯度较高的黄芩素，纯度在95％以上。本发明所述的方法中乙酸乙酯萃取得到黄芩素后，可用有机溶剂重结晶，得到高纯度的黄芩素，纯度在98％以上。
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公开(公告)号：CN108220260A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201711304614.9
申请日：2017-12-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种催化柚皮素生成山萘酚的融合酶及其应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示。本发明通过组合筛选策略获得能有效催化柚皮素生成山萘酚的黄烷酮3‑羟化酶（PeF3H）和黄酮醇合成酶（CuFLS），是目前报道的最佳组合。通过连接肽的筛选，获得了能适合PeF3H和CuFLS功能化融合的连接肽TPTPTPTP，通过该连接肽构建的融合酶（F69）能高效催化柚皮素生成山萘酚。携带该融合酶（F69）的重组菌BL21‑F69，通过高密度发酵，山萘酚的产量达到1010.2 mg/L，是目前报道最高产量的17倍。
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公开(公告)号：CN104805064B
公开(公告)日：2018-03-27
申请号：CN201510070692.1
申请日：2015-02-10
Applicant: 南京林业大学 , 广元贝尔天然生物活性物质工程技术研究院 , 四川金贝尔生态科技开发有限公司
Abstract: 耐高温黄酮苷元转化酶及其应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的耐高温黄酮苷元转化酶热稳定性好，能耐受高温，对不同母核类型及不同糖苷键类型的黄酮糖苷都具有较强的催化转化能力，本发明提供的耐高温黄酮苷元转化酶与典型的黄酮糖苷(异槲皮素、紫云英苷、大豆苷、染木苷)孵育一定时间后经检测，黄酮糖苷几乎完全转化为相应的黄酮苷元(槲皮素、山奈酚、大豆苷元和染木素)。
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公开(公告)号：CN104651336B
公开(公告)日：2018-02-09
申请号：CN201510053105.8
申请日：2015-02-02
Applicant: 南京林业大学
Abstract: α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶及其在制备人参皂苷Rd中的应用，属于基因工程技术及生物医药领域，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶对人参皂苷Rc的转化能力强，本发明所述α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶与人参皂苷Rc孵育一定时间后经检测，人参皂苷Rc几乎完全转化为人参皂苷Rd。本发明所述α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶对阿拉伯糖具有较高的耐受能力，且不被葡萄糖反馈抑制。
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